BTN100803 酸酚

酸酚是高品质的RNA提取纯化产品，由北京百奥莱博供应，本产品用于科学研究，我公司专注于RNA提取纯化产品的研发、生产和供应，为您提供的酸酚质量可靠，批间差小，且价格公道，热切盼望您选购我们的产品。...

特别提示：包括酸酚在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：酸酚
英文名称：Acidic Phenol
产品货号：BTN100803
产品规格：100mL

本品是将重蒸馏用乙酸钠酸性缓冲液充分饱和而得，pH在4-5之间，不会再吸收样品的水分，可以直接用于RNA提取。

储存条件：常温运输和保存、避光。有效期一年。

疑难解答：
Q：离心后为何酚相在下面？
A：苯酚的比重是1.071，水饱和苯酚的比重更低，只比纯水稍重。如果水溶液中有较高浓度的盐和其他成分(细胞裂解后也会释放出大量的如核酸，糖分等细胞成分)，其比重很容易超过苯酚，在此情况下离心，苯酚将在下层，水相将在上层，取样时需要十分小心。如果要使苯酚相在下层，可以使用比重更大的酚-lǜ仿-异戊醇混合液。

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本试剂盒是在柱式植物RNA提取试剂盒(BTN71203)的基础上经过配方和流程优化得到的无lǜ仿升级产品，它结合了植物RNA提取试剂盒的性、快捷性以及无lǜ仿处理的安全性。

试剂盒特点：
1. 免酚和lǜ仿处理，操作安全可靠。
2. 简单快速，处理一个样品只需要约十分钟。
3. RNA 纯度更高，平均 OD260/280一般都在2.0左右，能够有效去除大多数植物中的多糖污染。
4. 目前已测试过上百种植物。
5. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA 合成等实验。
6. 高于进口的柱式植物RNA提取产品。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	50ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
RNA 洗脱液	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

使用方法：
1. 估算组织细胞的用量。每次微量提取一般需要100-200mg植物叶片、或50-100mg植物种子、或200-500mg植物果实。
2. 先将新鲜植物组织剪切成小块(保存在RNAhold中的植物组织需用纸吸去RNAhold液体后再剪切成小块)，放入10-15mL塑料离心管中，加入1mL溶液A，然后用匀浆器匀浆5-20秒。匀浆时会产生泡沫，但不影响提取效果。也可以使用液氮砚磨法破碎植物组织，砚磨完后加入1mL溶液A。注意：溶液A在4℃放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3. 将匀浆物或砚磨物转移至干净的1.5mL塑料离心管中(可以不必转移非液体的细胞碎片)。有的植物组织(比如果实)含有大量水份，匀浆液会多于1mL，转移时也只取1mL。
4.室温12000～15000g离心3～5分钟，管底沉淀为细胞破碎物。
5. 将上清液(约0.6mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中。
6. 加入等体积的溶液B，充分颠倒混匀。如果有沉淀产生(对某些植物，属于正常现象)，千万不要去掉沉淀，一定要把所有的混合物上柱。
7. 将一半的溶液(如果有沉淀，则先混匀)转移到离心吸附柱中，13000-15000g室温离心半分钟，弃穿透液。
8. 将剩下的一半溶液(如果有沉淀，则先混匀)转移到同一离心吸附柱中，13000-15000g室温离心半分钟，弃穿透液。
9. 加0.7mL 通用洗柱液，室温离心半分钟，弃穿透液。再加0.3mL 通用洗柱液，室温离心半分钟，弃穿透液。一般样品如此洗涤两次即可，但如果在第7 步加入溶液B后有沉淀产生，则需要洗三次，每次加入的通用洗涤液的量分别为0.4、0.3和0.3mL。
10.室温离心半分钟。此步十分重要，否则残留的乙醇会影响RNA的使用。
11. 将离心吸附柱转移到RNase-free 收集管中，加入50-100μL RNA 洗脱液，室温放置1-2分钟。
12. 13000-15000g室温离心半分钟，离心管中溶液即为RNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。
13. RNA 完整性的电泳检测：如果需要做Northern杂交，强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳，因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques，28：414，2000)。
14. RNA产量产率测定：将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，进而计算出RNA的产量(浓度X 体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
15. RNA 纯度测定：无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1 之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染，但一般不影响RT-PCR等反应。

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