ALH036 植物RNA提取试剂盒
产品简介
植物RNA提取试剂盒的品牌是百奥莱博,是优质的RNA提取纯化产品,本制品仅用于生物化学研究方面,植物RNA提取试剂盒是我司众多优质RNA提取纯化之一,质量堪比同类进口产品,价格非常优惠,目前正热烈促销中,恭候您的咨询订购。...
产品详细介绍
特别提示:包括植物RNA提取试剂盒(含DNA清除柱)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:植物RNA提取试剂盒(含DNA清除柱)
英文名称:Plant RNA Extraction Kit
产品货号:ALH036
产品规格:20次|50次
本试剂盒适用于快速提取植物组织细胞总RNA,是在无苯酚、氯fǎngRNA快速提取技术基础上,又采用基因组DNA清除柱技术可以有效清除gDNA残留,得到的RNA一般不需要DNase消化,可用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,植物RNA助提剂帮助结合多糖多酚并通过离心去除,然后裂解混合物用乙醇调节RNA结合吸附到基因组DNA清除柱,基因组DNA清除柱子同时吸附清除残留的DNA, 然后RNA被选择性洗脱滤过。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, zuì后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
本试剂盒特点:
1.完全不使用有毒的苯酚,氯fǎng等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.简捷,单个样品操作一般可在25分钟内完成,上zuì简单快速的试剂盒。
3.独特的植物RNA助提剂可以有效结合多糖多酚,提高清除效果。
4.独特研发成功基因组DNA清除柱技术可以有效清除gDNA残留,得到的RNA一般不需要DNase消化,可用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。
5.适应性其广泛,可以提取包括棉花、松针、冬青树叶、葡萄叶片、等100多种外试剂盒提取失败的样品。详细样品列表请参考公司主页产品介绍。
6.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.2,基本无DNA残留,可用于RT-PCR,Northern-blot和各种实验。
试剂盒组份:
组份 | 20次 | 50次 |
裂解液RLT | 20ml | 50ml |
裂解液CLB | 8ml | 8ml |
裂解液RLT Plus | 10ml | 25ml |
去蛋白液RW1 | 15ml | 40ml |
漂洗液RW | 5ml | 10ml |
RNase-freeH2O | 10ml | 10ml |
PLANTbalb | 2ml | 5ml |
基因组DNA清除柱和收集管 | 20套 | 50套 |
吸附柱和收集管 | 20套 | 50套 |
注意事项:
1. 所有的离心步骤均可在室温完成(4℃离心也可以),使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 需要自备乙醇,研钵(可选)。
3. 样品处理量不要超过基因组清除柱DA和和RNA吸附柱处理能力,否则造成DNA残留或产量降低。开始摸索实验条件时,如果不清楚样品DNA/RNA含量时可使用较少的样品处理量,将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
4. 裂解液RLT和RLT Plus 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. 关于DNA 的微量残留:
一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留(DNase 消化也无法做到无残留),本试剂盒RNA提取产品,由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA 清除柱技术,大多数DNA 已经被清除,不需要DNase 消化,可直接用于反转录PCR 和荧光定量PCR。个别特殊情况如DNA 含量过于丰富造成残留或者要进行严格的mRNA 表达量分析荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时:
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA中的连接区,这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。
3) 将RNA提取物用RNase-free的DNase I 处理。本试剂盒还可以用于DNase I处理后的RNA清洁,请联系我们索取具体操作说明书。
4) 在步骤去蛋白液RW1漂洗前,直接在吸附柱上进行DNase I柱上消化处理。购买DNA酶柱上消化试剂盒前可先索取具体操作说明书。
6. 仔细阅读补充说明2,如果裂解液CLB效果好,可以联系我们单独订购裂解液CLB,或者购买试剂盒的时候,指明将裂解液RLT换成裂解液CLB。
储存条件:室温,有效期6个月。
本制品别名:植物RNA抽提试剂盒|植物RNA纯化试剂盒
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货号:BTN71202
规格:50次
本试剂盒是在血液RNA提取试剂盒(BTN3071)基础上开发的柱式升级产品,专门从动物全血样品中快速提取总RNA。
试剂盒特点:
1. 比BTN3071更加简单快捷,直接使用新鲜的或冷冻的抗凝全血样品,不需裂解红细胞等任何预处理步骤,整个提取过程只需要十分钟左右,可以全在室温下进行。
2.产量和纯度更高,OD260/280 均在2.0左右,产率一般为2-5μg/mL人血。
3. 每次微量提取的zuì大样品处理量可以达到1.5mL,高于进口的同类产品。
4.与常用的抗凝剂(包括肝素,EDTA,柠檬酸钠,草酸钠)兼容,得到的RNA可以直接用于RT-PCR和Northern杂交等研究。
试剂盒组成:
成分 | 50T |
溶液A | 50ml |
溶液B | 15ml |
溶液C | 50ml |
离心吸附柱 | 50套 |
通用洗柱液 | 50ml |
RNA洗脱液 | 10ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 将0.2-1.5mL 新鲜或解冻后的抗凝全血加入到1.5mL塑料离心管中。
2. 12000~15000g室温离心3分钟,弃上清(血浆)。如果此时血液细胞沉淀体积大于0.2mL,则需要减少血液的使用量,具体减少量需根据具体情况决定,因为各个个体(尤其是患者)血液中白细胞数目差别很大。
3. 将1mL溶液A加入到血液细胞沉淀中,用移液枪吹打沉淀使细胞裂解。
4. 将0.3mL的溶液B加入到离心管中,剧烈震荡30秒。
5.和0.2mL 氯fǎng加入到离心管中,剧烈震荡30秒。
6. 12000~15000g室温离心3~5分钟,将上清液(为无色或浅红色,约0.5-0.9mL)转移到另一干净离心管中。注意:转移的液体不要超过0.7mL,否则下一步不能加入等体积的溶液C。为防止污染,zuì好留100μL左右的上清液。下层有机相一般呈深红色,中间层为白色,含有DNA,蛋白质和其他细胞破碎物,避免触及或吸取。
7. 加入等体积的溶液C,充分颠倒混匀。
8. 分两次将溶液转移到离心吸附柱中,每次转移后12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
9. 加0.7mL 通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。
10. 如果有必要,可以再加0.3mL 通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。注意:增加此步可以进一步提高RNA的纯度。
11.室温12000~15000g离心半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响RNA的后续反应。
12. 将离心吸附柱转移到一个RNase-free的收集管中,加入50-100μL RNA洗脱液,室温放置1-2分钟。
13. 12000~15000g室温离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
14. RNA 完整性的电泳检测:如果需要做Northern杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳,因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。
15. RNA产量产率测定:将5-10μL RNA溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度X体积)和产率(RNA产量/组织用量)。人血RNA产率一般为2-5μg/mL。
16. RNA 纯度测定:无污染的总RNA的OD260/OD280一般在2.0左右(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响RT-PCR等反应。
疑难解答:
Q:如何去除RNA样品中的DNA污染?
A:可以使用百奥莱博的非酶DNA 清除剂DNA ERASOL-2。
Q:为何有的样品在第6 步离心后有很厚的中间层,上清很少。
A:这是因为蛋白质变性不充分,可以适当减少血液的用量。白细胞多的血液容易产生这种情况。
Q:离心吸附柱的RNA zuì大吸附量是多少?
A:是40μg。
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