WE0202 植物RNA提取试剂盒
产品简介
北京百奥莱博供应的植物RNA提取试剂盒用于科研目的,我公司的植物RNA提取试剂盒品质上佳,经过多年的开发生产,已然非常成熟,欢迎广大新老客户订购。...
产品详细介绍
特别提示:包括植物RNA提取试剂盒(含DNase I)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:植物RNA提取试剂盒(含DNase I)
英文名称:RNAnt RNA Extraction Kit(DNase I)
产品货号:WE0202
产品规格:50次
本试剂盒适用于从多种植物中提取RNA,即便是从多糖多酚含量丰富的植物中也能成功提取高质量的RNA,如水稻叶片、小麦叶片、玉米叶片、烟草叶、松针、银杏叶、杨树叶、石榴叶、冬青叶、苹果、桃、梨、西红柿、樱桃、杏、香蕉、葡萄、枇杷、桂圆果皮、桂圆果肉、荔枝果皮、荔枝果肉、大豆、花生、玉米、马铃薯块茎、月季花瓣、石榴花瓣,香菇、平菇等样本。独特的裂解液配方,可使细胞中的RNA酶迅速灭活,有效去除多糖多酚对RNA提取的影响,无需苯酚、氯fǎng等试剂,同时采用硅基质膜吸附RNA进行纯化,提取的总RNA纯度高,无基因组、蛋白质和其它杂质的污染,可用于Real Time RT-PCR、RT-PCR 、Northern Blot、Dot Blot、和体外翻译等多种下游实验。
试剂盒组成:
组份 | 50次 |
DNase I | 1000 U |
10×Reaction Buffer | 1000μl |
Buffer RLS | 40ml |
Buffer RW1 | 40ml |
Buffer RW2(浓缩液) | 11ml |
RNase-Free Water | 10ml |
过滤柱FS及收集管 | 50套 |
吸附柱RM及收集管 | 50套 |
RNase-Free离心管(1.5ml) | 50个 |
保存条件:DNase I及10×Reaction Buffer -20℃保存,其它组分室温(15~30℃)。
自备试剂:β-巯基乙醇、无水乙醇(新开封或提取RNA专用)
产品特点:
1、适用范围广:可从各种植物中提取总RNA,即便是多糖多酚含量丰富的植物也能成功提取。
2、纯度高:彻底去除污染物及下游反应抑制物,提取的RNA适合于多种下游应用。
3、成功提取的样本:水稻叶片、小麦叶片、苹果、桃、梨、西红柿、樱桃、杏、香蕉、葡萄、桂圆果皮、桂圆果肉、荔枝果皮、荔枝果肉、黄豆、花生、马铃薯块茎、松针、银杏叶、杨树叶、冬青叶、月季等样本。
RNA得率:
植物样本(100mg) | 总RNA量(μg) |
拟南芥荚果 | ~50 |
大豆 | ~55 |
玉米叶片 | ~55 |
实验前准备及重要注意事项:
1、预防RNase污染,应注意以下几方面:
① 使用无RNase的塑料制品和枪头。
② 操作人员戴一次性口罩和手套,实验过程中要勤换手套。
2、提取的样品避免反复冻融,否则影响RNA提取得率和质量。
3、Buffer RLS如果产生沉淀,请加热使其溶解后室温放置。
4、Buffer RLS在使用前请加入β-巯基乙醇,1ml Buffer RLS加20μl β-巯基乙醇。加入β-巯基乙醇的Buffer RLS室温可保存1个月。
5、次使用Buffer RW2前应按照试剂瓶标签的说明加入无水乙醇。
操作步骤:
1、匀浆处理:取50-100mg植物组织在液氮中迅速研磨成粉末,加入500μl Buffer RLS(使用前请先检查是否加入β-巯基乙醇),立即涡旋剧烈震荡混匀。
注意:对于含水量其丰富的材料,如西瓜果肉,西红柿,梨果肉等,可以适当多加入些材料,zuì多可增加至200mg;对于富含淀粉的样本或成熟叶片,可适当增加Buffer RLS的用量,zuì多可增加至700μl。
2、4℃ 12000rpm(~~13400×g)离心2分钟。
3、将上清液转入已装入收集管的过滤柱中,4℃ 12000rpm离心1分钟,小心吸取收集管中的上清并转移至新的RNase-Free 离心管(自备)中,枪头尽量避免接触收集管中的细胞碎片沉淀。
4、缓慢加入0.5倍上清体积的无水乙醇,混匀(此时可能会出现沉淀),将得到的溶液和沉淀一起转入已装入收集管的吸附柱中,若一次不能将全部溶液加入吸附柱中,请分两次转入。4℃ 12000rpm离心1分钟,弃废液,将吸附柱重新放回收集管中。
5、向吸附柱RM中加入350μl Buffer RW1,4℃ 12000rpm离心1分钟,弃废液,将吸附柱重新放回收集管中。
6、配制DNase I 混合液:取52μl RNase-Free Water,向其中加入8μl 10×Reaction Buffer和20μl DNase I(1 U/μl),混匀, 配制成终体积为80μl的反应液。
7、向吸附柱中直接加入80μl DNase I 混合液,20-30℃孵育15分钟。
8、向吸附柱RM中加入350μl Buffer RW1,4℃ 12000rpm离心1分钟,弃废液,将吸附柱重新放回收集管中。
9、向吸附柱RM中加入500μl Buffer RW2(使用前检查是否加入无水乙醇), 4℃ 12000rpm离心1 分钟,弃废液,将吸附柱重新放回收集管中。
10、重复步骤9。
11、4℃ 12000rpm离心2分钟。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余乙醇去除,乙醇残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
12、将吸附柱RM装入新的RNase-Free Centrifuge Tubes(1.5ml)中,向吸附膜的中间部位悬空滴加30-50μl RNase-Free Water,室温放置2分钟,4℃ 12000rpm离心1分钟,得到的RNA溶液保存在-70℃,防止降解。
注意:
① RNase-Free Water体积不应小于30μl,体积过小影响回收率。
② 如果要提高RNA的产量,可用30-50μl新的RNase-Free Water重复步骤12。
③ 如果要提高RNA浓度,可将得到的溶液重新加入到吸附柱中,重复步骤12。
储存条件:2~8℃。
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