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产品详情

ALH223 Pfu DNA聚合酶

  • 产品/服务:ALH223 Pfu DNA聚合酶
  • 型 号:ALH223
  • 品 牌:百奥莱博
  • 单 价:面议 
  • 更新日期:2023-06-02
  • 有效期至:长期有效
  • 浏览次数:882
产品简介

Pfu DNA聚合酶的品牌是百奥莱博,是优质的核酸扩增(PCR)产品,本制品用于生化实验研究等领域,本品质量稳定,价位合理,需要Pfu DNA聚合酶等核酸扩增(PCR)产品的客户,请到我公司官网联系我们。...

产品详细介绍

特别提示:包括Pfu DNA聚合酶在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


产品名称:Pfu DNA聚合酶
英文名称:Pfu DNA Polymerase
产品货号:ALH223
产品规格:500U|3000U

本酶用于DNA的高保真扩增,如基因表达克隆、基因定点突变、细胞内基因点突变分析(SNP)和平末端补平等。是从克隆有Pyrococcus furiosis DNA Polymerase 基因的大肠杆菌中分离纯化的, Pfu DNA Polymerase具有5′-3′DNA聚合酶活性和3′-5′外切酶活性,能纠正DNA扩增过程中产生的碱基错配。Pfu酶是目前已发现的所有耐高温DNA Polymerase中出错率zuì低的。其PCR产物为平端,可直接用平端载体克隆。 高保真PFU对于dNTP纯度要求很高,因此建议用本酶配套的超纯dNTP mix。本酶浓度为5U/μl。

本品组份(500U):
Pfu DNA Polymerase———————————————500U
10×Pfu Buffer+(with MgSO4)-——————————1ml
SuperPure dNTP mix(10 mM Each)—————————0.2ml

单位定义:一个单位Pfu DNA Polymerase活力定义为在74℃、30分钟内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板引物,将10nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。

质量控制:SDS-PAGE检测纯度大于99%,经检测无外源核酸酶活性;PCR方法检测无宿主残余DNA,能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因;室温存放一周,无明显活性改变。

酶贮存缓冲液:50mM Tris-HCl(pH 8.2),0.1mM EDTA,1mM DTT,Stabilizers,50% glycerol。

10×Pfu Buffer (含Mg2+):200 mM Tris-HCl (pH8.8),100 mM KCl,100 mM(NH4)2 SO4,20 mM MgSO4,其他成分。

注意事项:
(1) Pfu酶具有3′-5′的外切酶活性,所以Pfu酶扩增时延伸速度比Taq酶低,应根据扩增产物的长度设置相应的延伸时间,建议Pfu酶的延伸速度为每分钟1kb 如扩增片段小于4kb;延伸速度为每分钟0.5kb 如扩增片段大于4kb。同时Pfu酶的3′-5′的外切酶活性可能降解引物, 所以应先加dNTP 后,再加Pfu酶到反应体系中,并立即进行PCR 反应。
(2) 用Pfu酶扩增时,引物的纯度要求较高,引物长度大于18个碱基,Tm在55~80℃ 之间,引物浓度在0.1~0.5μM之间,比Taq酶略高。
(3) Pfu酶的热稳定性比Taq酶好,对于GC含量很高的模板,变性温度可以提高到98℃,对Pfu酶的活性无影响。
(4) 高保真PFU 对于dNTP纯度要求很高,因此建议用本酶配套的超纯dNTP mix。

储存条件:-20℃。

本制品别名:pfu酶

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