QN2054 磁珠法动物基因组DNA提取试剂盒

磁珠法动物基因组DNA提取试剂盒由北京百奥莱博供货并提供相关技术服务支持，本品用于科研目的，本品质量稳定，价位合理，需要磁珠法动物基因组DNA提取试剂盒等DNA提取纯化产品的客户，请到我公司官网联系我们。...

特别提示：包括磁珠法动物基因组DNA提取试剂盒(肺、肾、脾)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：磁珠法动物基因组DNA提取试剂盒(肺、肾、脾)
英文名称：Magnetic Animal Tissue Genomic DNA Kit
产品货号：QN2054
产品规格：50T

本试剂盒采用具有独特分离作用的磁珠和缓冲液系统，可从样品中分离纯化高质量基因组DNA。特殊包被的磁珠在一定条件下对目的DNA具有很强的亲和力，而当条件改变时，磁珠释放吸附的DNA，能够达到快速分离纯化DNA的目的。整个过程安全、便捷，提取的DNA纯度高。使用本试剂盒纯化的基因组DNA的OD260/OD280均在1.7-1.9之间，可以应用于各类下游分子生物学实验。

试剂盒组成：

组分	DM1701-50T
裂解液S1	27ml
裂解液S2	8.3ml
漂洗液	1（空瓶）
洗脱液	5.5ml
磁珠	1.4ml×2
蛋白酶K(20 mg/mL)	1.1ml
说明书	1份

储存条件：磁珠可以在室温下(15～25℃)运输，但请在4℃冰箱中保存，禁止冻存。蛋白酶K需-20℃保存，以保证其活性。其余试剂可以室温保存，更长时间的保存可置于2～8℃。复检期1年。

操作步骤：
使用前请先在漂洗液中配置 70%乙醇。若裂解液产生沉淀，使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间，必要时可在 37℃水浴中预热 10min 溶解沉淀，摇匀后使用。

1．裂解
取适量的动物组织样本（脾脏≤20mg；肺脏≤20mg；肾脏≤20mg）用液氮研磨成粉末，并迅速转移到已加入480μl 裂解液S1、150μl裂解液S2以及20μL蛋白酶K（20mg/mL）的EP管中，吹打或震荡混合均匀。将EP管置于65℃水浴25～30min。待冷却到室温，12000rpm 4℃离心5～10min。
2．结合
尽量取净上清于新的1.5mL EP管中，加入等体积的异丙醇以及振荡混匀的50μL磁珠，颠倒混匀1min，静置3min。将EP管置于磁铁上进行磁分离，吸弃废液（吸净管盖及管底残液）。
3．洗涤
加入600μL漂洗液（使用前请预先配置70%乙醇），轻柔混匀1～2min，将EP管置于磁力架上进行磁分离，吸净管盖及管底的残液；重复本步骤一次。
4．洗脱
室温晾干5～10min至乙醇挥发完全，加入50～100μL洗脱液，缓慢抽吸混匀，65℃水浴10min。（每隔1～2min轻摇EP管几下混匀）。将EP管置于磁力架上进行磁分离，小心吸取上清液至新的EP管中，进行下游实验。（判断磁珠晾干的标准：侧面观察磁珠无反光，正面观察磁珠边缘龟裂）。

注意事项：
1．动物组织（脾、肺、肾）要用液氮充分研磨。
2．整个裂解过程操作尽量温和，并在要求时间内完成。
3．如果组织液浓度较高，则建议磁珠量可适当增加，以获取高浓度 DNA。
4．客户自备试剂：异丙醇、无水乙醇、蛋白酶 K。
5．使用前请在漂洗液瓶中预先配制 70%乙醇。
6．磁珠在使用前一定要充分混匀。

常见问题及参考意见：
1．得率低
（1）组织没有完全裂解完，裂解时间不够或没有离心直接进行下一步操作：可适当延长裂解时间，zuì长不超过60min。样品裂解后，请一定要离心后再进行下一步操作。
（2）结合不充分：结合过程中要使磁珠一直处于悬浮状态，并且充分颠倒混匀。
（3）取样量大于说明书给出量：取样量请严格按照说明书操作。
2．条带弥散
（1）样品不新鲜或反复冻融多次：尽量用新鲜样品进行实验，如果样品需要保存，可根据实验，分装保存样品，尽量避免反复冻融；
（2）环境温度太高：可以将研钵置于-20℃预冷或置于液氮保存后再进行研磨，如果所提取材料基因组DNA易降解，可用液氮研磨；
（3）裂解时间太长：裂解时间不要超过60 min；
（4）提取后模板DNA放置时间太长：提取后如有需要，请尽量及时进行凝胶电泳实验。短期内可置于4℃保存，长期请置于-20℃保存（尽量注意避免反复冻融）。
3．DNA液有颜色
（1）洗涤过程不充分：如果结合后磁珠呈团状、 丝状或颗粒状，可增加点阵力度及次数，充分吹打混匀。
（2）裂解不充分：适当增加裂解液S1和S2用量，也可以延长裂解时间。
（3）样品用量大于说明书给出量而其他试剂用量没有相应调整：严格按照说明书操作，如果需要增大样本量，可以等比例增加裂解液S1、S2以及磁珠用量，其他试剂用量不变。
4．DNA样品不纯，干扰后续实验
（1）DNA液有乙醇残留：洗涤时，请注意吸净管盖及管底的残液。此外，磁珠应完全干燥，保证无乙醇残留。
（2）磁珠洗涤不充分：加入70%乙醇溶液时，请吸打或点阵混匀。如有必要，可增加一次洗涤步骤。
（3）DNA液中吸入磁珠：如果不小心吸入磁珠，请将上清液返回原管，待磁珠完全吸附至管壁后重新吸取上清。或者将吸取的上清液10000rpm离心2 min，再取上清。
（4）DNA液中含有蛋白质等杂质：建议适当减少样品用量。或可重复一次提取过程去除杂质。
（5）DNA液中含有轻微盐离子等杂质，此为洗脱液（含有抑制核酸降解的成分）正常现象，不影响下游实验。如有特殊需要，可使用等量的经高压灭菌的去离子水作为洗脱液。为方便实验，可将获得的DNA置于-20℃环境分装保存。

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名称：土壤腐殖酸清除剂
货号：BTN70603
规格：250mL
土壤和湖海沉积物中都含有棕黑色或黑色的腐殖酸，它们对PCR等后续反应有大的抑制作用，所以有效去除土壤中腐殖酸是提取土壤微生物DNA的重要环节。但是目前市场上没有专门的产品，针对这一情况，百奥莱博开发了本产品，专门用于对提取DNA用的土壤进行预处理，以清除腐殖酸成分。

产品特点：
1. 清除效果好，一次能使腐殖酸的浓度降低50%左右。
2.适合于黄色、红色、黑色和棕黑色等各种质地的土壤和河海沉积物。
3. 操作过程简单快速，一次处理只需要10分钟。
4.扩容性好，可小规模操作，也可以大规模操作。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

使用及效果：
按每1克土壤加10mL本产的比例将样品混合，振荡3～5分钟，3000-5000g室温离心5分钟，弃上清，沉淀可直接用于DNA提取。此操作可以多次重复。

图注：比较水和本产品处理泥碳(腐殖酸含量大于60%)样品的效果，C为用水处理后离心得到的结果，1-5是同一土壤样品用本产品洗涤1-5后所得到的上清液。

图注：用我司土壤DNA提取试剂(BTN60701)提取泥碳样品所得到的DNA溶液，1号样品所用土壤预先用水洗涤过三次，2号样品预先用本产品洗涤过三次。

名称：一步离心式石蜡清除剂
货号：BTN70302
规格：100次
用石蜡包埋组织作为材料进行PCR的难题之一是如何有效去除石蜡，因为残留的石蜡不但会影响DNA提取，还会干扰PCR扩增。常规的脱蜡方法一般需要1-2小时的时间，需要多次离心，每次离心都会造成样品的丢失。本产品只需要一步离心，克服了常规方法的缺点。

产品特点：
1.快速简单，只需要离心一次，免去了反复换液和离心，减少了样品的丢失。
2. 脱蜡效果好，跟经典的二甲苯/乙醇法相当。
3. 即开即用，客户自己不需要准备额外的试剂。

产品组成：

成分	规格
溶液A	100mL
溶液B	7.5ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

使用方法：
1. 将1mL溶液A加入到1.5mL塑料离心管中。
2. 放入一片不超过25μm的石蜡包埋组织切片。
3.以zuì大速度振荡10秒。
4. 加入75μL溶液B。
5. 振荡10秒混合。
6. 7000 g离心2分钟，小心吸弃上清。
7.真空抽干机抽干离心管中残留的液体。此步骤约需要一小时。
8. 得到的石蜡包埋组织切片即可用于DNA提取。

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