SY0578 碱性磷酸酶染色试剂盒

碱性磷酸酶染色试剂盒由北京百奥莱博供货并提供相关技术服务支持，本品仅用于生物化学研究方面，我公司的碱性磷酸酶染色试剂盒品质上佳，经过多年的开发生产，已然非常成熟，欢迎广大新老客户订购。...

特别提示：包括碱性磷酸酶染色试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：碱性磷酸酶染色试剂盒
英文名称：Alkaline Phosphatase Stain Kit
产品货号：SY0578
产品规格：50T|100T

碱性磷酸酶，即Alkaline Phosphatase，缩写AP，该酶在大多数细胞类型中均有表达，但是在胚胎干细胞（ES）和诱导多能干细胞（iPS）内的表达水平明显升高；经固定的ES和iPS被碱性磷酸酶试剂盒染色后，未分化的细胞可呈现蓝/紫色，分化的细胞呈现无色。百奥莱博提供的该试剂盒特异性强、灵敏度高，可对ES和iPS细胞分化状况进行较好的评估。

产品组份：
染色液A————1.25ml×2
染色液B————0.65ml
染色液C————25ml

注意事项
1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2）使用前请自备：PBS 缓冲液、PBST或TBST、4%多聚甲醛。
3）本试剂盒染色液A、B瓶口若出现少量液体凝固属正常现象，融化混匀后正常使用即可。

储存条件：4℃，有效期6个月。

根据您的关注的碱性磷酸酶染色试剂盒，您可能还对以下产品有需求：



名称：生物素标记dUTP溶液(Biotin-11-dUTP)
货号：BTN100920
规格：50μL
本产品是浓度为1mM的Biotin-11-dUTP。分子式：C28H41N6O17P3SNa3，分子量：927.6。分子结构式图如下：

Biotin-11-dUTP常用于PCR、缺口平移、cDNA合成、随机引物标记和引物延伸等方法标记DNA。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期两年。

名称：生物素标记UTP溶液(Biotin-16-UTP )
货号：BTN151203
规格：25μL

名称：随机引物法DNA探针标记试剂盒
货号：BTN90603A
规格：5次
本试剂盒是基于Feinberg和Vogelstein发明的随机引物标记法而开发出来的即用型DNA探针标记试剂盒，标记过程由双链DNA热变性、随机引物与单链DNA结合、在Klenow DNA聚合酶催化下，引物的延伸合成DNA探针并掺入标记的核苷酸三步组成，可用下面的示意图表示：

本产品对Feinberg和Vogelstein经典方法进行了改良。

产品特点：
1. 提供的标记反应液整合了除酶和模板外的所有成分，简化了反应加样步骤，提高了标记反应的可重复性。
2. 使用无外切活性的Klenow exo- DNA聚合酶，已标记DNA探针不会被酶降解。
3.快速，zuì快1小时即可完成标记反应。
4. 得到的DNA探针比活性高(如果是同位素，可以达到109cpm/μg DNA)，检测灵敏度高。
5. 所需模版DNA量少(只需要10ng以上即可)，DNA可以是各种形状(线状和环状)的、也可以是单链或双链的，长度在100bp以上均可。
6. 得到的探针长度在200-400nt之间，可以用于Southern杂交、Northern杂交、原位杂交、菌落和斑点印迹杂交等。
7. 提供三种标记选择，其中BTN90603A可用于各种同位素标记和其他任何非同位素标记，但需自备标记底物；BTN90603B和BTN90603C可分别用于生物素和地高xīn标记，不需自备标记底物。

试剂盒组成：

成分	规格
2×A型标记反应液(自备标记物型)	50μl(仅A型有)
2×B型标记反应液(生物素型)	50μl(仅B型有)
2×C型标记反应液(DIG型)	50μl(仅C型有)
dATP,2mM	10μL(仅A型有)
dTTP,2mM	10μL(仅A型有)
dGTP,2mM	10μL(仅A型有)
dCTP,2mM	10μL(仅A型有)
Klenow exo-聚合酶(2U/μL)	5μl
超纯水	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.在一干净的硅化的塑料离心管中加入下列成分：

成分	用量
模板DNA	50-150ng
2×标记反应液(ABC三种之一)	10μl
超纯水	补水到15μl

注意：非同位素标记物由于疏水性强，容易与常用的塑料离心管表面非特异性结合，所以一定要使用硅化的塑料离心管。模板DNA并非越多越好，因为模板会在杂交反应中跟标记的探针杂交，竞争性地抑制探针跟靶分子的杂交。
2. 沸水浴5-10分钟，或在PCR仪上100℃加热5-10分钟使DNA模版充分变性，立即放冰上待用。注意：如果PCR仪器不能设置到100℃，99℃加热5分钟也可。
3.高速离心数秒使所有液体集中在管底，根据试剂盒类型加入下列成份：

试剂盒类型	成分及用量
BTN90603A型	dATP、dGTP、dCTP各1μl(共3μL，浓度均为2mM) 自备的2mM dTTP/标记dUTP混合物(见注)1μL 1μl Klenow exo聚合酶
BTN90603B型	1μl Klenow exo聚合酶 4μl超纯水
BTN90603C型	1μl Klenow exo聚合酶 4μl超纯水

注：上表中的dTTP/标记dUTP混合物中dTTP和标记的dUTP的总浓度为2mM(在20μL体系中混合液的终浓度为0.1mM，dTTP与生物素或DIG标记的dUTP的比例zuì好为65:35)。由于空间阻碍，并非标记生物素或DIG标记的dUTP越多灵敏度越高，一般dTTP与标记dUTP的比例在65：35为zuì佳。但如果使用自备的其他标记核苷酸，如fluorescein、hydroxycoumarin、resorufin和aminoallyl标记的dUTP，则用户需要自己摸索其与dTTP之间的zuì佳比例，如果使用32P标记的dUTP，则比活zuì好为3000Ci/mmol，浓度为好为10uCi/μL，并且不需要加入dTTP。
4. 轻柔吹打混匀。如有液滴沾在管壁上，高速离心数秒使所有液体集中在管底。
5. 37℃保温1-20小时。标记效率跟模版量和保温时间相关，具体见下表：

模版DNA用量	1小时后探针合成量	20小时后探针合成量
10ng	80ng	900ng
30ng	150ng	1.35μg
100ng	350ng	1.65μg
300ng	750ng	2.2μg
1μg	1.3μg	2.6μg
3μg	1.6μng	2.6μg

6. 加1μl自备的0.5M EDTA(pH8.0)终止反应，立即放冰上待用或放-20℃保存一年。用前需要加热100℃ 5分钟使DNA探针变性成单链，然后直接加入到杂交反应液中即可。如果电泳检测，标记产物将是弥散状态。
 注意：本方法标记核苷酸掺入率高，因此可以不经纯化直接使用。如果需要纯化，注意不要用酚抽提法纯化非同位素(生物素、DIG和其他等)标记的DNA探针，因为这些标记分子疏水性强，能使标记的DNA进入疏水的有机相而丢失，但可以用乙醇沉淀和Sephadex G50回收(可另购非同位素探针柱式纯化试剂盒)。对比活高的同位素探针，由于其其不稳定，因此应该立即使用，不要长久放置。

关注碱性磷酸酶染色试剂盒，的同时，为您推荐更多您可能感兴趣的产品：

货号	名称	规格
BTN90604A	PCR法DNA探针标记试剂盒	5次
BTN100921	地高xīn标记dUTP溶液(Digoxin-11-dUTP)	25μL
BTN100809	SSPE溶液，20×	250mL
BTN130906	超级杂交液(原位杂交)	10mL
BTN100604	鲑鱼精DNA溶液	1mL
YT358	细胞内钙离子荧光探针(Fura-2 AM)	50微升
KFS157	线粒体绿色荧光探针(tracker Green)	50μg

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