GL2510 苹果酸脱氢酶(MDH)提取液
产品简介
苹果酸脱氢酶(MDH)提取液由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于科研试验,我公司专注于蛋白质研究产品的研发、生产和供应,为您提供的苹果酸脱氢酶(MDH)提取液质量可靠,批间差小,且价格公道,热切盼望您选购我们的产品。...
产品详细介绍
特别提示:包括苹果酸脱氢酶(MDH)提取液在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:苹果酸脱氢酶(MDH)提取液
产品货号:GL2510
产品规格:500ml
用途:
主要用于裂解植物组织,提取样品中的苹果酸脱氢酶
注意事项:
苹果酸脱氢酶(Malate Dehydrogenase, MDH)是合成苹果酸的关键酶之一,催化苹果酸和草酰乙酸(OAA)的相互转化,参与众多生理代谢途径如TCA循环C4循环脂肪酸的氧化呼吸作用氮同化等,因此MDH在植物的生长发育中发挥着重要作用,广泛存在于线粒体、细菌细胞膜上,为三羧酸循环中的一种酶,由于酶的来源不同,其某些性质也不尽相同。MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色,包括线粒体的能量代谢、苹果酸
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名称:一步式胞浆蛋白微量制备试剂盒
货号:BTN91203
规格:30次
本产品是专门用于小量真核培养细胞中制备胞浆蛋白.细胞质是真核细胞活动的重要场所,很多与新陈代谢和信号传递的蛋白质都存在于细胞质中,这些蛋白就叫胞浆蛋白。
产品特点:
1.一步式操作,整个提取制备过程简便,只需要半小时。
2. 实验重复性好,尤其适合同时处理多个样品。
3.可用于培养的动物细胞,也可以用于新鲜动物组织细胞。
4. 温和裂解法,制备的胞浆蛋白能保持天然活性,可以直接用于活性检测、蛋白浓度测定、各种蛋白质电泳等后续研究。
储存条件:低温运输,4℃保存、有效期一年。
使用方法:
将培养到55%-65%覆盖率的体外培养的真核细胞用胰酶法处理后转移到离心管中,离心30秒,在细胞沉淀中加入0.5mL溶液A,悬浮后冰浴10分钟,振荡10分钟,混匀后室温离心10秒,上清即为细胞浆提取物,可以直接放-70℃保存或直接使用。
名称:考马斯亮蓝G250
货号:YT626
规格:5g
本品是常用的蛋白染色剂。
分子式:C47H48N3O7S2Na
分子量:854.02
储存条件:室温。
名称:低背景ECL化学发光检测试剂盒
货号:WE0307
规格:50ml|250ml
低背景化学发光检测试剂盒是免疫印迹实验中与辣根过氧化物酶(HRP)配套使用的的低背景底物检测试剂盒。本产品能够在HRP的催化下发生化学反应而发光,可用于检测固定在膜上的蛋白质等生物大分子。其高灵敏度能够检测ng级别的抗原,发光信号强
烈持久,可以使用照相技术(X-光胶片曝光)或者其他成像方法(如荧光或化学发光成像仪)进行检测。
试剂盒组成:
组成 | 50ml | 250ml |
cwECL-A(Luminol) | 25ml | 125ml |
cwECL-B(Peroxide) | 25ml | 125ml |
注意事项:
1、在与膜发生接触过程中,请佩戴手套且使用干净镊子等洁净器材,避免蛋白污染及高背景。
2、避光条件下,配制好的化学发光检测底物工作液可在室温下稳定保存8小时。阳光或其他强光会影响工作液,故应避免强光长时间的照射。正常实验室灯光短时间照射不影响工作液的使用。
3、百奥莱博提供多种蛋白转移用膜、封闭液、一抗、酶标二抗、缓冲液等,详情请查询公司网站。
操作步骤:
1、二抗孵育完毕后,将印迹膜充分洗涤。
2、根据需要量,将cwECL-A和cwECL-B按照1:1的比例等体积混合,配制为发光检测底物工作液(一张8 cm×6 cm的膜大约使用1ml工作液)。
3、弃去洗涤缓冲液,将发光底物工作液滴加在印迹膜上,确保工作液覆盖整张膜,室温孵育3-5分钟。
4、用移液器吸去多余发光底物工作液,将印迹膜置于两层干净的塑料薄膜之间,此过程应小心完成,避免膜与膜之间产生气泡。
5、在暗室内进行X-光胶片曝光,或将膜放置到化学发光成像仪内,按照仪器说明书进行检测。
问题 | 可能原因 | 解决方法 |
胶片反相(白色条带,黑色背景) | 系统中HRP过量 | 稀释HRP标记物至少10倍以上 |
膜上出现棕色或黄色条带 | ||
暗室中看到强烈发光 | ||
发光信号持续时间过短 | ||
信号较弱或者无信号 |
发光反应系统中HRP 过多,消 耗底物过快,引起信号迅速降低 | 稀释HRP标记物至少10倍以上 |
抗原/抗体量不够 | 增加抗原/抗体使用量 | |
蛋白转移率低 | 优化转移系统 | |
高背景 | 系统中HRP 过量 | 稀释HRP标记物至少10倍以上 |
封闭不足 | 优化封闭程序 | |
封闭试剂选择不当 | 选择另一种封闭试剂 | |
冲洗不充分 | 增加冲洗时间,次数 | |
曝光过度 | 减少曝光时间 | |
抗原/抗体浓度过高 | 降低抗原/抗体使用浓度 | |
蛋白条带为点状 | 蛋白转移失败 | 优化转移过程 |
膜未平衡 | 按照说明书处理膜 | |
胶片与膜之间有气泡 | 曝光前去除所有气泡 | |
出现非特异条带 (高背景、信号维持时间较短) | 系统中HRP过多 | 稀释HRP标记物 |
出现非特异条带 (背景干净信号维持时间正常) | 一抗用量过多 | 进一步稀释一抗 |
SDS 导致非特异结合 | 在实验过程中避免使用SDS |
储存条件:2~8℃,避光保存
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