JN0042 2×Ultra Taq Plus

我公司致力于为客户提供高纯度、低成本的活性重组蛋白，包括2×Ultra Taq Plus在内的各类受体、细胞因子、生长因子、转录因子、激素、酶、毒性蛋白、病毒抗原等。...

特别提示：包括2×Ultra Taq Plus PCR MasterMix在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：2×Ultra Taq Plus PCR MasterMix
产品货号：JN0042
产品规格：0.5ml×5

  本制品是将PCR反应所需的UltraTaq Plus DNA聚合酶、dNTP、MgCl2、反应缓冲液以及优化剂以及稳定剂，预先配制成2倍浓度的混合物。使用时只需在加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应，使用非常方便，并减少了产生污染的机会。
  2×UltraTaq Plus PCR MasterMix专为基因组DNA等复杂模板快速PCR扩增检测设计优化，具有扩增快速、高灵敏度、抗干扰能力强等，并具有一定的保真特性，能部分纠正DNA扩增过程中所出现的错误。与2×UltraTaq DNA PCR MasterMix相比，具有扩增长度增加（简单模板 扩增长度可达30kb,复杂模板可有效扩增10kb), 保真度好的特点；与 2×Fast Pfu DNA PCR MasterMix相比，具有扩增速度更快，扩增灵敏度更高的优点。
  使用本制品扩增得到的PCR产物具有3′端"A"突出，可直接克隆于 T-vector中。

产品用途：
1、可替代大部分UltraTaq DNA聚合酶的用途；
2、需高灵敏度的PCR扩增；
3、大片段PCR扩增反应 (可达30kb)。

常用反应体系(50μl)：

组分	体积
2×PCR MasterMix*	25μl
上游引物	0.2-1.0μM(终浓度)
下游引物	0.2-1.0μM(终浓度)
dNTP(各10mM)	1.0μl
模板	1-50ng（质粒）
	10ng-1μg(基因组)
ddH2O	至50μl
*Mg2+终浓度为2mM

常用PCR循环：

当扩增片段＜3K：
94℃	1分钟30秒
30次循环	94℃，30秒 57℃，30秒 72℃ 根据产物长度调整，15秒/kb
72℃	3分钟
4℃	保温
当扩增片段≥3K（推荐引物长度≥30bp）：
94℃	1分钟30秒
30次循环	94℃，5秒 68℃ 根据产物长度调整，15秒/kb
72℃	3分钟
4℃	保温

PCR MasterMix选购指南：

编号	产品名称	特点
适用于菌落鉴定、菌液鉴定及常规PCR鉴定实验的Mix系列
JN0030	2×Taq PCR MasterMix	高PCR Mix，使用简便，扩增灵敏度高
JN0034	2×Complex Taq PCR MasterMix	JN0030改进版，性能更均衡，适用面更广
JN0040	2×Fast Taq PCR MasterMix	zuì快速的PCR试剂，常规PCR鉴定45分钟内知道结果
JN0035	2×RoomTop Taq PCR MasterMix	可放在手边的PCR试剂，室温稳定存放60天
JN0036	2×RoomTop Fast Taq PCR MasterMix	室温稳定存放60天，高速PCR试剂，常规PCR鉴定45分钟内知道结果
适用于一些较难扩增的PCR条带的鉴定及短片段克隆
JN0032	2×Taq Plus PCR MasterMix	扩增效率更高及较好的保真度
JN0038	2×Hot Start Taq PCR MasterMix	采用热启动Taq，可获得很好的特异性
JN0041	2×Ultra Taq PCR MasterMix	高速扩增酶，优化配方，解决PCR扩增难题的，灵敏度高
高保真酶试剂，适用于长片段基因克隆
JN0031	2×Pfu PCR MasterMix	采用高保真酶，适用于基因克隆
JN0043	2×Fast Pfu PCR MasterMix	采用改良型高保真酶，更好的扩增效果，4倍扩增速度；扩增迅速
防止PCR产物二次污染、高检测灵敏度的PCR试剂
JN0047	2×PCR MasterMix(防污染)	采用dUTP/UDG酶系统，从根本上杜PCR产物二次污染
JN0033	2×Genotyping PCR Kit（nomal）	高检测灵敏度，可达到普通PCR试剂102至104倍扩增灵敏度

PCR MasterMix性能对比表：

名称	编号	扩增时间	扩增长度	是否有3"-A	基因组扩增
2×Taq PCR MasterMix	JN0030	1min/kb	≤8kb	√	+
2×RoomTop Taq PCR MasterMix	JN0035	1min/kb	≤8kb	√	++
2×Complex Taq PCR MasterMix	JN0034	1min/kb	≤8kb	√	+
2×Fast Taq PCR MasterMix	JN0040	15s/kb	≤8kb	√	+
2×RoomTop Fast Taq PCR MasterMix	JN0036	15s/kb	≤8kb	√	++
2×Ultra Taq PCR MasterMix	JN0041	15s/kb	≤8kb	√	+++
2×Taq Plus PCR MasterMix	JN0032	1min/kb	≤20kb	√	++++
2×Ultra Taq Plus PCR MasterMix	JN0042	15s/kb	≤30kb	√	++++
2×Hot Start Taq PCR MasterMix	JN0038	1min/kb	≤8kb	√	++++
2×Hot Start Taq Plus PCR MasterMix	JN0039	1min/kb	≤20kb	√	++++
2×Pfu PCR MasterMix	JN0031	1min/kb	≤6kb	×	+
2×Fast Pfu PCR MasterMix	JN0043	30min/kb	≤12kb	×	+
2×SYBR Green Realtime PCR MasterMix	JN0049	1min/kb	≤8kb	√	++
2×Genotyping PCR Kit（Normal）	JN0033	1min/kb	≤8kb	√	+++++
2×Genotyping PCR Kit（Fast）	JN0044	15s/kb	≤8kb	√	+++++
2×PCR MasterMix(防污染)	JN0047	1min/kb	≤8kb	√	+

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名称：6nt随机引物(0.5 ug/uL)
货号：BTN100409
规格：5μg
本产品为长度为6nt的随机引物，序列为5′-(NNNNNN)-3′，主要用于以任何RNA为模板合成cDNA，也可以用于DNA探针的随机引物标计。

储存条件：低温运输和-20℃保存，有效期一年。

疑难解答：
Q：在合成cDNA时，使用Oligo dT12-18和用随机引物有何区别？
A：只有当以带polyA尾巴的RNA作为模板才能使用Oligo dT作为引物，而任何RNA模板都可以使用随机引物。使用后者的序列覆盖率比使用Oligo dT更高。

名称：核酸稀释液，测OD专用
货号：BTN131179
规格：250mL
测定核酸的OD需要一定的pH和盐浓度，本产品就是根据这一特点开发的、专门用于溶解和稀释核酸样品的溶液。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

名称：PCR试剂盒(含Taq酶，Buffer，dNTP，上样液)
货号：YT379
规格：400次|2000次
本PCR试剂盒带有Taq DNA Polymerase（YT371）、PCR buffer、dNTP和上样缓冲液，自备模板和引物即可进行PCR反应，适合用于普通的PCR或RT-PCR定性或定量检测，也可以用于不太长的的DNA片段的克隆。本试剂盒用于50微升的PCR反应体系，足够用于160个反应，用于20微升的PCR反应体系，足够用于400个反应。

产品组份：
Taq DNA Polymerase(5U/μl)————200U
10×PCR Buffer(with Mg2+)————1ml
dNTP(2.5mM each)—————————0.7ml
6×DNA Loading Buffer——————1ml

储存条件：-20℃。

名称：Bes Taq DNA Polymerase
货号：WE0103
规格：500U|2500U
  Bes Taq DNA Polymerase具有5"→3"DNA聚合酶活性和5"→3"外切核酸酶活性。在普通的PCR条件下，与Taq DNA Polymerase相比，具有扩增效率高、错配率低的优良性能，兼具有Taq DNA Polymerase的高扩增效率和Pfu DNA Polymerase的高保真性。使用本品扩增得到的PCR产物3"端附有一个“A”碱基，因此可直接用于T/A克隆。本产品适用于常规的PCR反应和对保真性有要求的基因克隆等反应。

产品组成：

组份	500 U	2500U
Bes Taq DNA Polymerase, 5 U/μl	100μl	5×100μl
10×PCR Buffer	1.8ml	5×1.8ml

活性定义：
用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在74℃，30分钟内，将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为1个活性单位(U)。

质量控制：
1、经过多次柱纯化，SDS-PAGE检测其纯度大于99%；
2、经检测无外源核酸酶活性；
3、PCR方法检测无宿主残余DNA；
4、能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因；
5、室温存放一个月，无明显活性改变。

使用方法：
以下举例为以人基因组DNA为模板，扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	50μl反应体系	终浓度
10×PCR Buffer	5μl	1×
dNTP Mix，10 mM each	1μl	200μM each
Forward Primer，10μM	2μl	0.4μM
Reverse Primer，10μM	2μl	0.4μM
Template DNA	<0.5μg	<0.5μg/50μl
Bes Taq DNA Polymerase，5 U/μl	0.25-0.5μl	1.25-2.5U/50μl
ddH2O	up to 50μl

注意：引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。

2、PCR反应条件

步骤	温度	时间	循环数
预变性	94℃	2min
变性	94℃	30s	25-35个循环
退火	55-65℃	30s
延伸	72℃	30s
终延伸	72℃	2min

注意：
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定，本产品Bes Taq DNA Polymerase的扩增效率为2 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。

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