BTN120503 藻类RNA柱式提取试剂盒
产品简介
藻类RNA柱式提取试剂盒由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于科研目的,藻类RNA柱式提取试剂盒是我司众多优质RNA提取纯化之一,质量堪比同类进口产品,价格非常优惠,目前正热烈促销中,恭候您的咨询订购。...
产品详细介绍
特别提示:包括藻类RNA柱式提取试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:藻类RNA柱式提取试剂盒
英文名称:Algae RNA Column extraction kit
产品货号:BTN120503
产品规格:50次
本试剂盒是专门用于各种藻类样品RNA提取的产品。
试剂盒特点:
1. 操作简单快捷,整个过程只需要约30分钟。
2. RNA纯度高,OD260/280一般都在2.0左右,可直接用于RT-PCR、Northern杂交、microarray hybridization、cDNA合成等。
3. RNA产量高,一般在20-70μg/mL液体藻类培养物(约2.0 ×107个细胞)。
4. 非酶细胞破裂法,适用于各种形态的藻类和各个种属的藻类。
试剂盒组成:
成分 | 规格 |
溶液A | 50ml |
溶液B | 50ml |
溶液C | 100ml |
溶液D | 30ml |
离心吸附柱 | 50套 |
通用洗柱液 | 100ml |
RNA洗脱液 | 10ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 将1-5mL液体藻类培养物在1.5mL塑料离心管中5000-7,000rpm 4℃离心 1分钟,并弃尽液体培养基(可以分多次离心)。
2. 加入0.5mL溶液A并充分吹打混匀。注意:溶液A存放时容易产生沉淀,如果有沉淀,用前请置于65℃融化并充分摇晃均匀。
3. 加入0.5mL溶液B,剧烈振荡30秒。
4. 65℃保温5分钟。注意:不要超过5分钟,否则RNA容易降解。
5. 5000-7,000rpm 4℃离心3~5分钟,转移上清到一自备的、干净的1.5mL塑料离心管中。
6.在上清液中加入0.2mL自备的lǜ仿,充分振荡30秒混匀。
7. 4℃ 5000-7,000rpm离心3~5分钟,转移上清液到一自备的、干净的5-10mL塑料离心管中。
8. 加入相当于上清液(约1mL左右)3倍体积的溶液C和1倍体积的溶液D,充分混匀。如果上清为1mL,则加入3mL溶液C和1mL溶液D。
9. 将混合液分多次转移到离心吸附柱中,每次转移0.7mL混合液到离心吸附柱中,室温放置2-3分钟以让RNA跟吸附膜充分结合,然后5000-7,000rpm室温离心30-60秒,弃收集管中的穿透液,然后再加入0.7mL混合液,重复上面的操作,直到混合液全部挂柱。
10. 次洗涤:将0.7mL通用洗柱液加到离心吸附柱中,室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。
11. 第二次洗涤:一次洗涤一般足够去除杂质,但如果样品OD260/280比值不高,可以再用0.3mL通用洗柱液重复上步洗涤一次。
12.室温离心空柱子(带收集管)半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响RNA的使用。
13. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 1.5mL塑料离心管中,加入30-100μL RNA洗脱液。具体加多少根据RNA浓度决定,建议先使用小体积洗脱液,这样浓度过高还可以稀释。
14.室温离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
15. RNA完整性的电泳检测:
注意:普通DNA上样液不含变性剂,更没经过去RNase处理,所以zuì好不要用于RNA电泳。
16. RNA产量和纯度产率测定:
将5-10μL RNA溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/细菌用量)。注意不要将RNA稀释在DEPC水中检测OD260和OD280,否则光吸收比在TE(pH7.5-8.2之间)中测得的低10%-15%;也不要稀释过度,使OD读数在仪器的有效范围之外,这样得到的OD比值没有意义。
根据您的关注的藻类RNA柱式提取试剂盒,您可能还对以下产品有需求:
名称:病毒沉淀剂
货号:BTN110810
规格:100mL
生物医学实验中,常常需要从液体样品(如血浆,培养基)中纯化病毒,但由于病毒颗粒十分细小,传统的分离方法是使用长时间超速离心才能将其从液体样品中分离出来,此操作非常繁琐,并且病毒在此过程中容易变性。为了克服传统方法的缺点,本公司开发了本产品。
产品特点:
1. 能浓缩病毒100倍以上,适合各种病毒。
2. 比超速离心法、密度梯度离心分离法和过滤法更温和,回收率更高,并且大部分病毒能保持活性,适合各种后续实验,包括转染实验和核酸纯化。
3. 比超速离心法和密度梯度离心分离法简单,不需要大型离心机等设备。
4.适合水样、细胞培养基上清和其他不含细胞的样品。本产品100mL可以处理400mL含病毒的溶液,可以将病毒浓缩100倍以上。
5. 已经成功用于coro
6. 对环境水样,请不要使用本产品,而是使用水体病毒沉淀剂。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
自备试剂:PBS缓冲液或TES缓冲液(用于重悬病毒)
使用方法:
注意:需要尽量减少含病毒溶液中蛋白的浓度。收集培养细胞分泌的病毒前,zuì好换上不含血清蛋白和其他蛋白成分的培养基。
1. 将培养细胞刮下,和培养基一起全部转移到干净的离心管中,10000rpm 4℃离心20分钟。转移上清(含病毒)到新离心管中。如果培养细胞内还有病毒颗粒,并且病毒颗粒可以抵抗冻融,则可以把细胞冻融数次,释放出包浆的病毒,然后再转移到干净的离心管中,10000rpm 4℃离心20分钟。转移上清(含病毒)到新离心管中。如果病毒溶液不含细胞成分,则直接进入下一步。
2.在含病毒的上清中加入1/4 总体积的本产品(4mL 病毒溶液则加1mL 本产品),4℃冰箱中放置过夜或12小时以上。病毒在此期间将形成沉淀。
3. 10000rpm 4℃离心20分钟收集病毒沉淀,尽可能弃掉所有上清(可以暂时保留上清,等确认病毒浓缩成功后再丢弃)。
4. 将离心管放回离心机短暂离心数秒,再次小心去除残留上清。
5. 将沉淀(病毒颗粒)溶于适量预冷的自备的缓冲液(如PBS缓冲液、TES缓冲液和培养基中,取决于后续实验),立即使用或者-20℃长期保存。
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