HR0241 细胞浆/胞核分离试剂盒

细胞核/胞浆分离试剂盒可以从哺乳动物细胞中分离细胞核和胞浆组分。此试剂盒提供了一个系统，维持核和胞浆组分是分开和完整的。优化的试剂配方和程序可以快速分离胞核和胞浆，而几乎没有交叉污染。本试剂盒提取的胞核和胞浆组分仍保持其生化功能，适合下游分析如转录活性，RNA拼接，gel－shift分析，报告分析，酶活性分析和...

细胞浆/胞核分离试剂盒

 

产品编号：HR0241

产品组成：

细胞浆/胞核分离试剂盒保存条件：

提取液、核保存液2-8℃保存；蛋白酶抑制剂-20℃保存。有效期1年。

【注】：

● 蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。

● 蛋白酶抑制剂在2-8℃时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。

● 试剂拆封后请尽快使用完。

产品说明：

细胞核/胞浆分离试剂盒可以从哺乳动物细胞中分离细胞核和胞浆组分。此试剂盒提供了一个系统，维持核和胞浆组分是分开和完整的。优化的试剂配方和程序可以快速分离胞核和胞浆，而几乎没有交叉污染。

本试剂盒提取的胞核和胞浆组分仍保持其生化功能，适合下游分析如转录活性，RNA拼接，gel－shift分析，报告分析，酶活性分析和WB等。

试剂盒以外自备试剂和仪器：

● 离心机 ● 振荡器 ● 涡旋混匀器 ● PBS ● 蛋白定量试剂盒

使用注意事项：

● 预实验很重要。必须要做预实验，在正式实验之前取少量样本优化实验条件，并像正式样本一样认真进行，看实验结果是否可行，实验条件是否适合自己的样本。由于生物样本的多样性，不同赝本的实验条件通常差异较大，同种细胞的不同模型下需要的实验条件也可能不同，为了避免浪费正式样本和试剂，一定要提前预实验优化实验条件。

● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。

● 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

● 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。

● 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

细胞浆/胞核分离试剂盒使用方法：

1、取5-10×10⁶个细胞，在4℃，500×g条件下离心3分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。

2、用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。

【注】：

● 在4℃，500×g条件下离心5分钟。

3、在细胞沉淀中加入400μL冷的提取液A，涡旋振荡混匀或吹打混匀，置冰上振荡20-30分钟。

● 使用振荡器/摇床的较低转速，提取液能轻微晃动即可。

● 如果没有振荡条件，也可冰上静置，稍微延长处理时间，中间每隔5分钟涡旋振荡或移液器吹打混匀。

● 细胞数量根据实验情况调整，每次的提取液用量并不是一定的，大约为细胞体积的5-10倍即可，请根据实际情况调整。

● 可以根据自己实验需要在每400μL提取液A中加入2μL蛋白酶抑制剂。

4、在4℃，1200×g条件下离心5分钟。

5、将上清吸入另一预冷的干净离心管，即得到胞浆组分，请置冰箱保存备用或直接用于下游实验。

6、沉淀用PBS重悬，然后在4℃，2000×g 条件下离心5分钟，弃上清。

7、沉淀为细胞核组分，将沉淀用200μL保存液B 重悬后保存备用或直接用于下游实验。

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