HR0243 组织胞浆/胞核分离试剂盒
组织样本细胞核/胞浆分离试剂盒可以从各种动物实体组织如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等组织样本中分离细胞核和胞浆组分。此试剂盒提供了一个系统,维持核和胞浆组分是分开和完整的。优化的试剂配方和程序可以快速分离胞核和胞浆,而几乎没有交叉污染。...
组织胞浆/胞核分离试剂盒
产品编号:HR0243
产品组成:
组份 |
50T |
100T |
组分A:核提取液A |
25mL |
50mL |
组分B:核保存液B |
10mL |
20mL |
组分C:蛋白酶抑制剂混合物 |
100μL |
200μL |
组织胞浆/胞核分离试剂盒储存条件:
试剂A和B 2-8℃保存;蛋白酶抑制剂-20℃保存,有效期1年。
【注】:
● 蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。
● 蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态,从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
产品简介:
组织样本细胞核/胞浆分离试剂盒可以从各种动物实体组织如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等组织样本中分离细胞核和胞浆组分。此试剂盒提供了一个系统,维持核和胞浆组分是分开和完整的。优化的试剂配方和程序可以快速分离胞核和胞浆,而几乎没有交叉污染。
本试剂盒提取的胞核和胞浆组分仍保持其生化功能,适合下游分析如转录活性,RNA拼接,gel-shift分析,报告分析,酶活性分析和WB等。
本试剂盒提取得到的为完整结构的细胞核,需要提取得到核蛋白请选择其他货号的试剂盒。
试剂盒以外自备试剂和仪器:
● 匀浆机/匀浆器 ● 移液器 ● 离心机 ● 涡旋混匀器 ● 振荡器 ● PBS ● 蛋白定量试剂盒
组织胞浆/胞核分离试剂盒注意事项:
● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
● 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
● 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
● 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
使用方法:
1、取50mg-100mg组织样本,用PBS洗干净,用手术剪刀尽可能剪碎,加入500μL冷的试剂A,用组织匀浆机/匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体。
【注】:
● 也可以用液氮研磨后加入500μL试剂A。
2、将匀浆液置2-8℃条件下振荡20-30分钟。
【注】:
● 用振荡器/摇床的较低转速,保持液体有轻微晃动即可。
● 没有振荡条件的话,也可冰上静置,稍微延长处理时间,中间每隔5分钟涡旋振荡或移液器吹打混匀。
● 组织样本量根据实验情况调整,每次的提取液用量并不是一定的,大约为组织体积的5-10倍即可,请根据实际情况调整。
● 可以根据自己实验需要在每500μL提取液A中加入2μL蛋白酶抑制剂。
3、在4℃,1200×g条件下离心5分钟。
4、将上清吸入另一预冷的干净离心管,即得到胞浆组分,请置冰箱保存备用或直接用于下游实验。
5、沉淀用PBS洗涤一次,在4℃,2000×g条件下离心15分钟,弃上清。
6、沉淀为细胞核组分,将沉淀直接用于下游实验或用200μL保存液B重悬后保存备用。
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