ALH353 DNA快速连接试剂盒
产品简介
DNA快速连接试剂盒是高品质的克隆与表达产品,由北京百奥莱博供应,本产品用于科研试验,DNA快速连接试剂盒是我司众多优质克隆与表达之一,质量堪比同类进口产品,价格非常优惠,目前正热烈促销中,恭候您的咨询订购。...
产品详细介绍
特别提示:包括DNA快速连接试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:DNA快速连接试剂盒
英文名称:DNA Quick Ligation Kit
产品货号:ALH353
产品规格:20次|60次
本试剂盒可在室温(22℃)10分钟条件下,快速、简单完成DNA片段粘端或平端连接反应。连接产物可直接转化。可用于DNA 片段克隆,文库构建,TA克隆,l
试剂盒组分(60次):
2×Quick Ligation Buffer-——————300μl
T4 DNA ligase(5 U/ml)————————300U
注意事项:
1.转化前不要热灭活T4 DNA ligase,否则将降低转化效率。
2.DNA片段体积大于4 ml的,可增加2 xQuick Ligation Buffer,总反应体积相应可以增至20 ml,这样在连接体系中可加入更大体积的DNA片段。
储存条件:-20℃。
本制品别名:DNA连接试剂盒
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货号 | 名称 | 规格 |
BTN60603 | pression/BTN60603.html" target="_blank">即用型蓝白T载体A型(T7-SP6,有MCS) | 20次 |
BTN81221 | pression/BTN81221.html" target="_blank">大肠杆菌HB101化学感受态细胞 | 0.1mL*10 |
BTN80910 | pression/BTN80910.html" target="_blank">X-gal溶液 | 10mL |
BTN60208 | pression/BTN60208.html" target="_blank">硫酸卡那霉素溶液 | 10mL |
RFT108 | pression/RFT108.html" target="_blank">2×ligation solution MasterMix | 150μl |
SY0013 | pression/SY0013.html" target="_blank">XL10化学感受态细胞 | 100μl×10管 |
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名称:DNA粘转平试剂盒
货号:BTN60107
规格:20次
本产品利用Pfu DNA polymerase所具有3′到5′的聚合酶活性和5′到3′外切酶活性,将3′或5′突出的DNA片段转化成平末端,用于克隆工作。
产品特点:
1. 简单,精心优化过的2×Polishing Buffer中含有所需要的所有成分,不需要单独准备。
2.适用于任何平末端的DNA载体。
产品组成:
成分 | 规格 |
Pfu DNA Polymerase(3U/μL) | 20μl |
2×Polishing Buffer | 0.5ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。
使用方法:
1. DNA片段的准备:
无论是来源Taq,Tth,T7,Klenow和Vent等DNA聚合酶合成的DNA片段,还是用限制性内切酶制备的DNA片段,粘转平之前均需要将DNA沉淀以便去除反应液中的无关成份。沉淀DNA的方法包括经典的盐/纯沉淀法,离心柱DNA 吸附法和百奥莱博的一管式非醇超快DNA沉淀法。
2. 设置粘转平(Polishing)反应:
在一个干净的离心管中,分别加入 | |
3′或5′突出的DNA片段 | 10-500ng |
2×Polishing Buffer | 25μL |
Pfu DNA polymerase | 1μL |
补水到 | 50μL |
72℃保温2小时。 |
注意:如果不使用热盖式PCR 仪器加热,则需要在反应管中再加入适量液体石蜡以防反应过程中水份蒸发。
3.反应后处理
粘转平反应后,样品可以放-20℃长期保存,也可以直接用于T4 DNA连接酶催化的连接反应。对10μL的连接反应体系,一般需要加入1-2μL粘转平反应液。由于Pfu DNA polymerase在连接反应的温度条件下几乎没有活性,所以不必去除。但文献报道,去除后连接效率更高。
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