MQ0008 XL1-Blue化学感受态细胞
产品简介
北京百奥莱博供应的XL1-Blue化学感受态细胞用于科研目的,我公司的XL1-Blue化学感受态细胞品质上佳,经过多年的开发生产,已然非常成熟,欢迎广大新老客户订购。...
产品详细介绍
特别提示:包括XL1-Blue化学感受态细胞在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:XL1-Blue化学感受态细胞
英文名称:XL1-Blue Chemically Competent Cell
产品货号:MQ0008
产品规格:10×100μl/50×100μl
XL1-Blue菌株能保证高拷贝质粒稳定复制,recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。
hsdR17突变导致EcoK核酸内切酶系统缺失,增强了外源DNA的稳定性和提取质量。lacIqZΔM15的存在使XL2-Blue菌株可用于蓝、白斑筛选。此菌株具有四环素抗性。
XL1-Blue感受态细胞经特殊工艺制作,经pUC19质粒检测转化效率>1×109cfu/μg。
保存条件:-80℃
基因型:
recA1 endA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 supE44(rk-,mk+),relA1 lac [F" proAB lacIqZ∆M15:Tn10(tetr)]
操作说明:
1.XL1-Blue感受态细胞放置冰中融化(或放手心或室温片刻,待菌体处于冰水混合状态时迅速插入冰中),加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀,冰上静置25分钟。
2.42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB),混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。
4.5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
注意事项:
1.感受态细胞zuì好在冰上融化。
2.混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒或率的连接产物可相应减少zuì终用于涂板的菌量。
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储存条件:低温运输,-20℃避光保存,有效期6个月。
名称:N端YFP标签融合蛋白质粒(黄色荧光蛋白)
货号:YT478
规格:1μg
本质粒是哺乳动物细胞表达质粒,用于表达N端含YFP(Yellow Fluorescent Protein, 黄色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子,可以启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的前面有一个YFP的完整编码序列,因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达N端含有YFP标签的融合蛋白。利用YFP的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位,也可以利用YFP抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。YFP与GFP高度相似,可以尝试用GFP抗体检测YFP。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
本质粒质粒的主要信息如下:
Feature Nucleotide | Position |
CMV promoter | 1-602 |
T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
YFP | 677-1393 |
Multiple clo | 1394-1483 |
T7 promoter and T7 primer binding site | 1503-1524 |
SV40 polyA signal | 1536-1919 |
f1 origin of ss-DNA replication | 2057-2363 |
bla promoter | 2388-2512 |
SV40 promoter | 2532-2870 |
Neomycin/kanamycin resistance ORF | 2905-3696 |
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3697-4155 |
pUC origin | 4284-4951 |
本质粒(5003bp)的图谱如下:
使用说明:
1. 次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
储存条件:-20℃。
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