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产品详情

KFS212 细胞凋亡线粒体膜电位检测试剂盒

  • 产品/服务:KFS212 细胞凋亡线粒体膜电位检测试剂盒
  • 型 号:KFS212
  • 品 牌:百奥莱博
  • 单 价:面议 
  • 更新日期:2023-06-29
  • 有效期至:长期有效
  • 浏览次数:778
产品简介

细胞凋亡线粒体膜电位检测试剂盒是高品质的细胞凋亡与增殖产品,由北京百奥莱博供应,本产品仅用于生物化学研究方面,本产品质量好,且具价格,深为用户称道,了解更多细胞凋亡线粒体膜电位检测试剂盒等细胞凋亡与增殖产品请联系我司咨询订购。...

产品详细介绍

特别提示:包括细胞凋亡线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


产品名称:细胞凋亡线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)
英文名称:JC-1 Apoptosis Detection Kit
产品货号:KFS212
产品规格:10T|20T|50T|100T

本试剂盒可应用于细胞、组织或纯化的线粒体膜电位检测。大量的研究表明线粒体与细胞凋亡密切相关,其中线粒体跨膜电位(△)的破坏,被认为是细胞凋亡级联反应过程中zuì早发生的事件之一,它发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA断裂)出现之前,一旦线粒体跨膜电位崩溃,则细胞凋亡不可逆转。

本试剂盒采用JC-1(5,5’,6,6’-tetrachloro-1,1’,3,3’-tetraethylbenzimidazolcarbocyanine iodide)一种阳离子脂质荧光染料作为检测线粒体跨膜电位指示剂。JC-1有单体和多聚体两种存在状态,在低浓度时以单体的形式存在,高浓度时以多聚体形式存在,两者的发射光谱不同,但均可在流式细胞仪绿色(FL-1)通道检测出绿色荧光,JC-1可透过正常细胞膜以单体状态聚集胞内,正常健康线粒体的膜电位(△)具有性,JC-1依赖于△的性被迅速摄入线粒体内,并因浓度增高而在线粒体内形成多聚体,多聚体发射光为红色荧光;可被流式细胞仪的红色(FL-2)通道检测到,而细胞发生凋亡时,线粒体跨膜电位被去化,JC-1从线粒体内释放,红光强度减弱,以单体的形式存在于胞质内发绿色荧光。根椐这一特征检测线粒体膜电位的变化。

注意事项
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. JC-1 避光保存及使用。
3. 细胞培养至汇合度80-90%,收集细胞量在1×106/Test。
4. 对PH 变化过于敏感的细胞建议用胎牛血清取代Buffer 孵育染色及洗涤,或延长观测时间。
5. 流式细胞仪检测线粒体膜电位变化受到多种因素的影响,因诱导剂、细胞株类型,作用时间的不同而荧光强度比例都有不同,因此没有通用标准的补偿设门指南,因此每个试验需设阴性及阳性对照组进行荧光补偿及设门。
6. 组织需先制备单细胞悬液或提取纯化线粒体后方可进行检测,可选用我司细胞悬液制备试剂盒或线粒体提取试剂盒。

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名称:CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒
货号:YT157
规格:2000次
本试剂盒是基于一种荧光探针CFDA SE的用于细胞增殖检测和细胞荧光示踪的检测试剂盒。CFDA SE目前被广泛用于替代MTT法或[3H]-thymidine掺入等其它细胞增殖检测方法。基于CFDA SE荧光标记的细胞增殖检测和[3H]-thymidine掺入、BrdU标记获得的检测结果完全一致,但同时可以提供更多的细胞增殖信息。使用CFDA SE检测可以提供整个细胞群中有多少比例的细胞分裂了1次、2次或更多次数,同时如果和其它荧光探针联用,可以获取不同分裂次数细胞的其它相关信息。

CFDA-SE的全称为Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester,分子式为C29H19NO11,分子量为557.47,CAS number为150347-59-4。CFDA SE可以通透细胞膜,进入细胞后可以被细胞内的酯酶(esterase)催化分解成CFSE,CFSE可以偶发性地(spontaneously)并不可逆地和细胞内蛋白的Lysine残基或其它氨基发生结合反应,并标记这些蛋白。在加入荧光探针CFDA SE后大约24小时,即可充分标记细胞。被CFDA SE标记的非分裂细胞的荧光非常稳定,稳定标记的时间可达数个月。CFDA SE标记细胞的荧光非常均一,比以前使用的其它细胞示踪荧光探针例如PKH26的荧光更加均一,并且分裂后的子代细胞的荧光分配也更均匀。

由于CFDA SE标记细胞的荧光非常均匀和稳定,每分裂一次子代细胞的荧光会减弱一半,这样通过流式细胞仪检测就可以检测出没有分裂的细胞,分裂一次的细胞(1/2的荧光强度),分离两次的细胞(1/4的荧光强度),分裂三次的细胞(1/8的荧光强度)以及类似的其它分裂次数的细胞。采用CFDA SE通过流式细胞仪检测获得的检测结果参考右图。每一个峰代表一种分裂次数的细胞,从右至左的峰通常依次为分裂0次、1次、2次、3次等次数的细胞。分裂次数较多后,分裂0次或1次等没有分裂或分裂次数较少的细胞会逐渐减少直至检测不到。

使用CFDA SE可以检测分裂多达8次或更多次数的细胞增殖。目前CFDA SE标记细胞后通常用流式细胞仪进行细胞增殖检测。zuì常用于淋巴细胞的增殖检测,也可以用于成纤维细胞、NK细胞等其它细胞的增殖检测,甚至还可以用于细菌增殖的检测。

CFDA SE标记细胞呈绿色荧光,检测时的激发波长可以选择488nm,此时的发射波长为518nm,使用流式细胞仪检测时可以采用FL1 detection channel。CFDA SE标记的细胞也可以用荧光显微镜进行观察。CFDA SE标记的细胞无论在体外还是体内都不会使邻近细胞染色。即CFDA SE荧光探针完成标记后不会从一个细胞转移到邻近细胞。CFDA SE标记细胞仅需5-15分钟即可完成。对于不同细胞,zuì佳标记时间需自行摸索。

本试剂盒提供了配制CFDA SE所需的溶液以及CFDA SE进行细胞标记时所需的配套试剂。如果每个检测样品的荧光探针标记体积为1ml,本试剂盒共可以检测2000个样品。



试剂盒组份:
CFDA SE——————————————1管
CFDA SE溶剂————————————1ml/管,共两管
CFDA SE细胞标记液(10X) ——————100ml/瓶,共两瓶

注意事项:
1. CFDA SE配制成储存液后宜在一个月内使用完毕,zuì长不宜超过2个月。CFDA SE易被水解,在水溶液中会很快变质。请在使用过程中避免接触水。在标记细胞的过程中和水接触是在许可的范围内的。
2. CFDA SE溶剂在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
3. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

储存条件:-20℃,有效期6个月。

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