BTN100103A 裂殖酵母化学感受态细胞制备试剂盒

裂殖酵母化学感受态细胞制备试剂盒的品牌是百奥莱博，是优质的克隆与表达产品，本制品仅用于生物化学研究方面，本产品质量好，且具价格，深为用户称道，了解更多裂殖酵母化学感受态细胞制备试剂盒等克隆与表达产品请联系我司咨询订购。...

特别提示：包括裂殖酵母化学感受态细胞制备试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：裂殖酵母化学感受态细胞制备试剂盒
英文名称：S.pombe Chemical Competent Cell Preparation Kit
产品货号：BTN100103A
产品规格：20次

本裂殖酵母化学感受态细胞制备试剂是一种通过化学处理，快速制备裂殖酵母化学感受态细胞，用于长期冻存以备后续转化的产品。

产品特点：
1.一次制备，-80℃保存，多次使用，免去每次转化都要制备裂殖酵母感受态细胞。
2. 操作简单，单溶液制备，除酵母培养的时间外，整个操作只需要30分钟。
3. 主要用于裂殖酵母S. pombe ，其他多种实验用酵母菌株zuì好选用酵母化学感受态细胞制备试剂(BTN81109)。
4. 受体酵母可以不含质粒，也可用于携带有选择性质粒的酵母(如双杂交体系中的酵母)。
5. zuì高转化效率可达到0.2-1×105个转化子/μg质粒DNA。
6. 得到的感受态细胞可以用各种线性或环状酵母穿梭质粒DNA进行转化，例如YIp，YRp，YCp，YEp和YAC等。
7.可以用于酵母双杂交、定点突变、基因破坏、等位突变基因修复等实验。
8. 本产品可以制备20只裂殖酵母感受态细胞(需要100mL裂殖酵母培养液)，其中A型只用于制备感受态细胞，B型还带转化液。

试剂盒组成：

组分	BTN100103A	BTN100103B
溶液A	1ml	1ml
裂殖酵母转化液	-	一套(20次)
使用说明书	1份	1份

储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

使用效果：
将一个酵母菌落接种到SLD培养基中，30℃摇晃培养直到OD600达到0.6-1.0，冰浴15分钟后离心弃上清，用自备无菌水洗涤三次，然后用相当于菌液zuì初体积百分之一的溶液A重悬，按每管50μl分装，放-80℃保存。

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货号	名称	规格
BTN130806	pression/BTN130806.html" target="_blank">胚胎裂解液	1mL
BTN120513	pression/BTN120513.html" target="_blank">即用型蓝白T载体C型(T7-T3，无MCS)	20次
BTN90505	pression/BTN90505.html" target="_blank">大肠杆菌BL21(DE3)化学感受态细胞	0.1mL*10
BTN121004	pression/BTN121004.html" target="_blank">大肠杆菌Rosetta(DE3)化学感受态细胞	0.1mL*10
BTN160688	pression/BTN160688.html" target="_blank">大肠杆菌TKB1化学感受态细胞	0.1mL*10
BTN80909	pression/BTN80909.html" target="_blank">IPTG溶液	1.5mL

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名称：大肠杆菌BL21-CondonPlus(DE3)-RIPL化学感受态细胞
货号：BTN140378
规格：10*100μl
本产品来源于Stratagene公司的BL21-Gold菌株，缺少Lon蛋白酶和OmpT蛋白酶，从而减少对重组蛋白的降解，补充大肠杆菌缺乏的4 种稀有密码子(AGA、AUA、CCC、CUA)对应的tRNA(argU、ileY、proL、leuW)，提高外源基因，尤其是富含AT-或GC-的真核基因在原核系统中的表达水平。该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3 区(DE3 区含有T7 噬菌体RNA聚合酶)，可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，可用于pET系列，pGEX，pMAL等质粒的蛋白表达，同时具有四环素，氯霉素，链霉素，壮观霉素抗性。本产品由特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率高达108cfu/μg。
菌株基因型为：F- ompT hsdS(rB-mB-)dcm+ Tetr galλ(DE3)endA Hte [argU proLCamr] [argU ileY leuW Strep/Specr]。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以100μl感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击90秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含有相应抗生素的LB 固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。

注意事项：
1、涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA 总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4,000rpm ，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2、新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3、涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
4. 诱导时，IPTG浓度可选(0.1-2mM 均可)。
5. 为获得需要量的蛋白，zuì佳诱导时间，温度，IPTG浓度需实验者优化。

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