YT012 哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒
产品简介
北京百奥莱博供应的哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒用于科研目的,哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒是我司众多优质DNA提取纯化之一,质量堪比同类进口产品,价格非常优惠,目前正热烈促销中,恭候您的咨询订购。...
产品详细介绍
特别提示:包括哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒
英文名称:Mammalian genomic DNA extraction kit
产品货号:YT012
产品规格:50次
本试剂盒采用了经典的蛋白酶K处理法,可以抽提到100-150kb以上的基因组DNA。用本试剂盒抽提到的基因组DNA适用于Southern杂交、基因组DNA的PCR扩增及基因组DNA文库的构建等。
通常使用本试剂盒,从20毫克组织可以抽提到约40微克基因组DNA,从106-107Hela细胞可以抽提到约5-50微克基因组DNA。本试剂盒足够抽提50个常规量的样品。
产品组份:
样品裂解液————30ml
蛋白酶K————130μl
10M 醋酸铵————6ml
Nuclease Free Water————6ml
储存条件:-20℃,有效期一年。
注意事项:
1.需自备Tris平衡苯酚、氯fǎng和无水乙醇。
2.如果打算抽提到大片段的基因组DNA,则要尽量避免基因组DNA的物理性剪切。例如避免剧烈振荡含有基因组DNA的样品,可以用剪掉枪头尖的枪头吸取含有基因组DNA的样品。
3.不可过分干燥基因组DNA沉淀,否则会难溶解。
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名称:柱式粪便DNA提取试剂盒
货号:BTN80102
规格:50次
本试剂盒是动物粪便DNA提取试剂盒(BTN70601)的柱式升级产品,专门用于从各种动物粪便中快速提取高质量的DNA。
产品特点:
1. 操作更加简单快速,一个样品只需要十多分钟的时间。
2. DNA 更加纯净,OD260/280一般都在1.8以上,得到的DNA样品原液或稀释液可以直接用于PCR扩增。
3. 每次微量提取可以处理100-300mg左右的样品,能得到5μg左右DNA,片段长度在30 Kb左右。
4.可以同时提取到肠道上皮细胞和可能的肠道病原菌的DNA。
5. 试剂无害,环保。
试剂盒组成:
成分 | 规格 |
溶液A | 25ml |
溶液B | 25ml |
溶液C | 50ml |
离心吸附柱 | 50套 |
通用洗柱液 | 50ml |
DNA洗脱液2.0 | 10ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
使用方法:
1. 65℃预热溶液A,待其沉淀溶化后充分混匀,取0.5mL加入到1.5mL塑料离心管中并放置于65℃待用。
2. 称取 0.1-0.3 g的粪便,加入到含预热溶液A的离心管中,震荡器上剧烈震荡5-10分钟。如果是扩量操作,可以使用更多粪便和较大离心管。也可以将同一种粪便在较大离心管中震荡处理,然后再分到1.5mL离心管中。注意:不论使用大的还是小的离心管,一定要让管底的粪便震荡起来。
3. 将离心管置于65℃水浴中保温至少5分钟。
4. 12000~15000g室温离心3分钟,将上清转移到一新离心管中(上清液一般呈淡黄色或深棕色,实际颜色随样品而异,上清液的体积一般为300-400μL)。
5.在上清液中加入等体积的溶液B,上下颠倒30秒充分混匀,溶液将呈白色或淡黄色混浊状。
6. 将离心管冰浴至少5分钟。
7. 12000~15000g室温离心3分钟,转移上清到新的1.5mL离心管中,上清液颜色将比第4 步得到的上清的颜色稍淡,体积在0.7mL左右。
注意:下面第8-第9 步的氯fǎng抽提操作可以省略,直接进入第10 步,但DNA的产量会低50%左右,OD260/280在1.7-1.8。如果直接进入第10 步,则转移的溶液体积不要超过0.6mL,否则没有空间加溶液C。
8. 加入0.2mL的氯fǎng(自备),震荡器上充分振荡30秒混匀。注意:一定要让管底的溶液震荡起来。
9. 12000~15000g室温离心3分钟,小心转移上清到新离心管中。说明:离心后两相交界面将有白色膜状物,其中有机相部分颜色较深,一般呈淡棕色。将上清转移到新的1.5mL离心管时,不要超过0.6mL,否则没有空间加溶液C。如果有多余的可以弃之不用。
10. 加入1.5倍体积的溶液C,上下颠倒30秒混匀。
11. 分两次上柱(即先转移一半的混合液到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液,然后再将剩下的混合液到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液)。
12. 加 0.7mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
13. 如果有必要,可以再加0.3mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。增加一步洗涤能使zuì后得到的DNA的纯度稍有提高,但产量稍微有所降低。
14. 12000~15000g室温再离心半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会污染DNA。
15. 将离心吸附柱转移到一新的1.5mL塑料离心管中,加入50-100μl DNA洗脱液2.0。
16.室温放置离心吸附柱1-2分钟。
17. 12000~15000g室温离心半分钟,离心管中溶液即为DNA样品,可以立即使用或存放于冰箱待用。
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