QN0927 总RNA提取试剂
产品简介
北京百奥莱博供应的总RNA提取试剂用于科学研究,我公司专注于RNA提取纯化产品的研发、生产和供应,为您提供的总RNA提取试剂质量可靠,批间差小,且价格公道,热切盼望您选购我们的产品。...
产品详细介绍
特别提示:包括总RNA提取试剂在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:总RNA提取试剂
英文名称:Resgent (Trizol Substitute)
产品货号:QN0927
产品规格:100mL|500mL
本试剂是一种通用的总RNA提取试剂,适用于动植物细胞或组织及细菌的总RNA抽提,可有效防止RNA在提取过程中的降解。获得的RNA可直接用于Northern杂交,纯化mRNA,体外翻译,RNase保护实验,RT-PCR以及cDNA克隆等一系列操作。该试剂可用于100次总RNA提取(10平方厘米细胞或100mg组织)。
使用方法
自备新开封或专用氯fǎng,异丙醇,75%乙醇,DEPC处理水。
1. 细胞裂解或组织匀浆:
1)贴壁细胞:吸尽培养液,每10平方厘米(6孔板孔或35 mm平皿)细胞加入1ml本试剂,使其覆盖培养细胞,再用吸管或加样器吹打2~3次,细胞应完全裂解,然后转移至离心管中。
2)悬浮细胞:离心收集细胞,吸尽液体,每五百万至一千万(5×106~1×107)动植物或酵母细胞,或一千万 (1×107)细菌,加入1ml本试剂 。用吸管或加样器吹打,使其完全裂解。某些酵母和细菌如裂解不充分,可用匀浆器匀浆,以确保其完全裂解。转移至离心管中。
3)组织:先将组织剪切成小块,放入玻璃匀浆器内。冷冻组织可在研钵中研磨匀浆。每50~100mg组织加入1ml本试剂 ,匀浆至完全裂解。转移至离心管中。
裂解产物应呈澄清的透明粘稠液体。室温放置5分钟。对于多糖、蛋白等杂质丰富的组织样品,匀浆后仍会存留有不溶物质,可12000g 4℃离心10分钟,然后吸取上清至一新的离心管中。
2. 分离:在装有裂解物的离心管中加入0.2倍体积的氯fǎng(1ml本试剂加入0.2ml氯fǎng),振荡器上充分振荡混匀30秒,室温放置2-3分钟。12000g 4℃离心10分钟,然后吸取含总RNA的上层水相至一新的离心管中,每毫升本试剂 约可吸取0.5-0.6ml。有机相和中间层含有DNA和蛋白质,应避免触及。
3. 沉淀:按每ml本试剂加入0.5ml异丙醇,颠倒数次混匀,室温沉淀10分钟。12000g 4℃离心10分钟,在管底可见RNA沉淀。弃上清,按每毫升本试剂加入1ml 75%乙醇,轻轻颠倒混匀,以清洗RNA沉淀。12000g 4℃离心2分钟,弃去液体,小心勿丢弃RNA沉淀。室温倒置晾干5~10分钟。
4. 溶解:加入适量DEPC处理水使RNA沉淀溶解。存放于-80℃。
注意事项:
1,RNA提取过程中所用器皿、离心管、吸头等应保证无污染无RNA酶。操作中应小心,防止外源性RNA酶污染样品导致RNA样品降解。
2,试剂中含有酚等有害物质,注意个人防护。
储存条件:4℃避光,有效期12个月
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