WE0170 DNA产物快速纯化试剂盒
产品简介
北京百奥莱博供应的DNA产物快速纯化试剂盒用于科研目的,DNA产物快速纯化试剂盒是我司众多优质DNA提取纯化之一,质量堪比同类进口产品,价格非常优惠,目前正热烈促销中,恭候您的咨询订购。...
产品详细介绍
特别提示:包括DNA产物快速纯化试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:DNA产物快速纯化试剂盒
英文名称:DNA Product Quick Clean-up Kit
产品货号:WE0170
产品规格:50次|200次
本试剂盒采用硅基质膜技术和试剂配方,通过离心吸附柱快速简单的结合-洗涤-洗脱三步即可从PCR产物或酶反应液(酶切,连接,探针标记等)中纯化回收100 bp-10 kb的DNA片段,每个吸附柱zuì高可吸附10μg的DNA,同时zuì大限度的去除引物、寡核苷酸、酶等杂质。纯化回收的DNA纯度及浓度高,完整性好,回收率高,可直接用于测序、连接和转化、标记、体外转录等分子生物学实验。
试剂盒组成:
组份 | 50次 | 200次 |
Buffer PB | 30ml | 120ml |
Buffer PS | 15ml | 60ml |
Buffer PW(浓缩) | 6ml | 25ml |
Buffer EB | 10ml | 30ml |
离心吸附柱DM及收集管 | 50套 | 200套 |
产品特点
1、快速简单:操作步骤少,15分钟完成,同时可处理多个样品,节省时间。
2、回收率高:硅基质膜技术和试剂配方保证每次zuì大量回收到纯度高的目的DNA。
3、处理量大:每个离心吸附柱每次zuì多可吸附的DNA 量为10μg。
自备试剂:无水乙醇。
实验前准备及重要注意事项:
1、所有组分可在干燥、室温(15~30℃)环境稳定保存1年,更长时间保存可置于2- 8℃。当溶液低温保存时,使用前需在室温中放置一段时间,恢复至室温后使用。
2、本试剂盒可无选择性回收溶液中所有DNA片段,如需选择性回收特定片段,同时去除其他不同大小片段,请选择我公司的胶回收试剂盒(WE0168)
3、次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer PW中加入无水乙醇。
4、使用前请检查Buffer PB是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀现象,可在37℃水浴几分钟,即可恢复澄清。
5、回收效率与初始DNA量和洗脱体积有关,初始量越少,洗脱体积越少,回收率越低。
6、所有离心步骤均可室温下进行。
操作步骤:
1、估计DNA反应液的体积,加入5倍体积的 Buffer PB,充分混匀(无需去除石蜡油或矿物油)。
注意:
1)如DNA反应体系为50μl(不包括石蜡油体积),则加入250μl Buffer PB。
2)在加入Buffer PB后检测溶液的pH值,若pH值>7.5,可向其中加入10-30μl的3 M醋酸钠(pH5.0),从而将pH值调到5-7。
2、柱平衡:向已装入收集管中的吸附柱DM中加入200μl Buffer PS,13000rpm(~~~16200×g)离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
3、将步骤1中所得溶液加入到已装入收集管的吸附柱中,室温放置1分钟,13000rpm离心30-60 s,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。
注意:吸附柱容积为750μl,若样品体积大于750μl可分批加入 。
4、向吸附柱中加入500μl Buffer PW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)13000rpm离心30-60 s,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。
注意:如果纯化的DNA用于盐敏感实验(例如平末端连接实验或直接测序),建议加入Buffer PW后静置2-5分钟再离心。
5、13000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。为确保下游实验不受残留乙醇的影响,建议将吸附柱开盖,置于室温放置数分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的乙醇。
6、将吸附柱放到一个新离心管(自备)中,向吸附膜中间位置悬空滴加30-50μl Buffer EB,室温放置1分钟。13000rpm离心1分钟,收集DNA溶液。-20℃保存DNA。
注意:
1)洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液,应保证其pH值在7.0-8.5之间(可以用NaOH将水的pH值调到此范围)。
2)为了提高DNA的回收量,可将离心得到的溶液重新加到吸附柱中,室温放置2分钟,13000rpm离心1分钟。
3)洗脱体积不应小于30μl,体积过少会影响回收效率。
4)回收>10 kb的DNA片段时,Buffer EB应在50℃水浴中预热,适当延长吸附和洗脱时间,可增加回收效率。
储存条件:室温(15~30℃)。
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