BTN140391 大肠杆菌T1化学感受态细胞
产品简介
大肠杆菌T1化学感受态细胞由北京百奥莱博供货并提供相关技术服务支持,本品用于科研目的,本产品质量好,且具价格,深为用户称道,了解更多大肠杆菌T1化学感受态细胞等克隆与表达产品请联系我司咨询订购。...
产品详细介绍
特别提示:包括大肠杆菌T1化学感受态细胞在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:大肠杆菌T1化学感受态细胞
英文名称:E.coli T1 Chemical Competent Cell
产品货号:BTN140391
产品规格:0.1mL*10
本产品是采用大肠杆菌Mach1-T1 Phage Resistant菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。
产品特点:
1. 本感受态细胞是目前生长速度zuì快的感受态细胞,在氨苄青霉素平板上,8-9h可见克隆;用于蓝、白斑筛选,12 h可见蓝斑;将过夜培养的单克隆在2ml的LB培养基中培养4-5h即可进行小量质粒提取。
2.适用于的DNA克隆和质粒扩增,减少克隆DNA同源重组的发生,提高质粒DNA的产量和质量。
3. 本产品具有T1,T5噬菌体抗性。
4. 使用pUC19质粒检测,转化效率可达109cfu/μg。
菌株基因型:F- φ80(lac Z)ΔM15 ΔlacX74 hsdR(rkmk+)ΔrecA1398 endA1 tonA
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂:目的DNA、SOC或LB培养基等。
使用方法:
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL,可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μl感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μL感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA 所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。
注意事项:
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA 总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4,000rpm,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
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