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产品详情

BTN3190 水饱和酚

  • 产品/服务:BTN3190 水饱和酚
  • 型 号:BTN3190
  • 品 牌:百奥莱博
  • 单 价:面议 
  • 更新日期:2023-05-25
  • 有效期至:长期有效
  • 浏览次数:876
产品简介

水饱和酚由北京百奥莱博供货并提供相关技术服务支持,本品用于科研目的,本品质量稳定,价位合理,需要水饱和酚等RNA提取纯化产品的客户,请到我公司官网联系我们。...

产品详细介绍

特别提示:包括水饱和酚在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


产品名称:水饱和酚
英文名称:Water-Saturated Phenol
产品货号:BTN3190
产品规格:100mL

本品是将重蒸馏酚用水充分饱和而得,pH在7左右。水饱和酚不会再吸收样品的水分。本产品可以用于配制TRIzol,也直接用于RNA提取。

储存条件:常温运输和保存、避光。有效期一年。

疑难解答:
Q:分子生物学实验为何需要使用饱和酚?
A: 酚跟水有一定程度的互溶,酚水混合液中水相中一般有8-10%的酚,酚相中一般有12%的水,互溶的比例还跟温度、盐离子等相关(比如,65℃时,水和酚彻底互溶,不再分相)。如果使用未饱和的酚处理样品,则分相后样品的体积将减少,所以为了避免样品的丢失,需要使用没有吸水能力的各种饱和酚。

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名称:柱式白色念球菌RNA提取试剂盒
货号:BTN130847
规格:50次

名称:一管式病毒RNA提取试剂盒
货号:BTN3073
规格:100次
本试剂盒是专用于血清(血浆)等液体样品中提取病毒RNA的纯化试剂。本产品回收率高,尤其适合于整合到临床RT-PCR检测试剂盒中。且能用于提取其他液体样品和微量样品。

产品特点:
1. 回收率达到90%以上,高于大部分基于离心柱的提取方法。
2. 灵敏度高,RT-PCR检测到的zuì终灵敏度可以达到50-100拷贝/mL(对HIV和HCV)。
3.一管式操作,不使用离心柱,整个操作过程均在室温下完成。
4. 环保,不需要使用苯酚和氯fǎng等有毒的有机溶液。
5.可放量,如果加上病毒离心富集步骤,每管zuì多可以处理样品1.5mL。

试剂盒组成:
成分 规格
溶液A 30ml
说明书 1份


储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。

使用方法:

一:准备工作
1. 血浆的抗凝剂必须是EDTA或ACD,不能是肝素。使用ACD时由于所加入ACD会增加体积,样品会被稀释,得到的病毒滴度会比使用EDTA低15%左右。
2. 用于制备血浆的全血在2-25℃放置的时间不能超过6小时,在此时间内,可以室温800-1600g离心20分钟,上清即为血浆。
3. 血浆可以在2-8℃或更低温度下运输,可以在室温放置一天,2-8℃放置5天,-20℃以下长期保存。
4. 血浆zuì好按0.6mL/管的量分装保存,以避免反复冻融。
5. 实验前所有试都必须放置在室温。
6. 实验当天新鲜配制70%的乙醇。

二:病毒提取操作
1. 标记1.5-2mL螺旋盖塑料离心管(如Sarstedt CAT#:782.694.006),为避免污染,建议不要使用压盖式塑料离心管。注意设置阳性和阴性对照。
2. 每管(包括正负对照管)中加入0.6mL病毒RNA提取试剂盒溶液(需提前融化)。
3.快速震荡样品几秒,再短暂离心,取0.2mL液体样品加入到已经装有0.6mL病毒RNA提取试剂盒溶液的管中。如果病毒需要富集,可以将1.5mL液体样品在4℃ 24,000 g冷冻离心60分钟,移弃1.3mL上清后在取用样品。
4.在正负对照样品管中分别加正负对照样品。
5.室温放置10分钟。此间可以在每个管上做个标记,以在下步区别向心面和离心面。
6. 振荡数秒后加入0.7mL室温异丙醇,旋紧盖后振荡30秒混匀,把离心管的向心面对向转头的中央,13,000-15000g室温离心至少15分钟。
7.小心移弃上清,注意不要触及管底和管壁离心面的RNA沉淀(此时可能看不见)。
8. 加入1.0mL室温70%乙醇,振荡数秒后 15000g室温离心5分钟。注意:在离心机中放置离心管时将其向心面对向转头的中央。
9.小心移弃上清,注意不要触及管底和管壁离心面的RNA沉淀(此时呈膜状沉淀)。
10. 再短暂离心数秒,用移液器移弃残留液体(70%乙醇),否则它会影响后续反应。
11. 加入200μl RNase-free水或百奥莱博的1×液相RNase Scavenger(能灭活残留的RNase,而RNase-free水无此功能),用移液枪仔细吹打离心管管底和管壁离心面的膜状RNA沉淀,溶液将呈混浊状,含少量不溶物。由于不溶沉淀物中含有RNA,所以不要离心后取上清使用,必须取混合液使用,哪怕很浑浊。
12. 直接取适量用于RT-PCR,如果溶于200μl水,同时样品使用量不超过RT-PCR体系的1/2,不溶物一般不会影响RT-PCR。剩余样品可以室温放置2小时,也可保存于-80℃保存一个月。

疑难解答:
Q:提取液体样品/病毒核酸(RNA或DNA)为何很难?
A:原因一是量少。病毒颗粒中的RNA或DNA是作为遗传物质保存,每个病毒zuì多只携带几个拷贝(而一个细胞中有上万个RNA分子),同时其长度也十分有限(是细胞基因组的万分之一以下),样品中病毒数往往也不是很多,使得样品中核酸的量几乎是微乎其微,十分容易丢失。另外,由于得到的核酸量少,不能使用电泳和测OD检测,只能通过PCR或RT-PCR检测,而病毒RNA往往具有稳定的二级结构,进一步增加了鉴定的难度(即不知道是RNA提取的问题还是RT-PCR的问题)。
Q:如何判断是病毒RNA没提取出来还是提取出来了但没有RT-PCR成功?
A:在RT-PCR反应中加阳性和阴性对照。

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