YT231 NF-κB凝胶迁移突变探针

NF-κB凝胶迁移突变探针是高品质的凝胶迁移EMSA产品，由北京百奥莱博供应，本产品用于科学研究，本产品质量好，且具价格，深为用户称道，了解更多NF-κB凝胶迁移突变探针等凝胶迁移EMSA产品请联系我司咨询订购。...

特别提示：包括NF-κB凝胶迁移突变探针(1.75μM)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：NF-κB凝胶迁移突变探针(1.75μM)
英文名称：NF-κB Mutation Probe For EMSA(1.75μM)
产品货号：YT231
产品规格：60μl

本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的NF-κB consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针－NF-κB的阴性对照，用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。一个包装的突变探针，如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应，可以进行30-60个突变探针的冷竞争反应。

NF-κB consensus oligo的序列如下：
5"-AGT TGA GGG GAC TTT CCC AGG C-3"
3"-TCA ACT CCC CTG AAA GGG TCC G-5"

EMSA突变探针－NF-κB中NF-κB的公认的结合位点发生了突变，从而使NF-κB无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中，正常的标记探针和NF-κB的结合的条带会被抑制；而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中，正常的标记探针和NF-κB的结合的条带不会被抑制。参考下图。


一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1,阴性对照反应(标记探针)；
2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针)；
3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记探针)；
4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记突变探针)；
5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋目的转录因子的特异抗体)。

注意事项：
1. 避免加热到40℃以上，温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。

储存条件：-20℃，有效期一年。

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储存条件：-20℃，有效期一年。

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本试剂盒是通过TdT把生物素标记的dUTP添加到单链DNA 3"末端，然后通过退火产生生物素标记的EMSA探针的试剂盒。通常DNA的3"末端被标记后不会干扰基于序列特异性蛋白结合的EMSA检测。Terminal Deoxynucleotidyl Transferase(TdT)可以在不依赖于模板的情况下催化在DNA的3"-OH端加上dNTP的反应。关于TdT催化双链DNA末端加dNTP的反应效率，3"端突出的双链DNA要比平端或3"端缩进的双链DNA高很多。TdT催化单链DNA末端加dNTP的反应效率要比双链DNA高很多。在适当的条件下，TdT也可以催化RNA 3"末端加NTP的反应。

本试剂盒适合标记纯化的单链DNA，如果用于标记EMSA探针，可以在单链标记后再进行退火。本试剂盒中提供了已经用生物素标记好的Biotin-Control Oligo，可以用作检测DNA标记效率的对照。如果每个标记反应的探针量为5pmol，本试剂盒可以用于20个标记反应。

试剂盒组份：
TdT Buffer(5X)———————————250μl
TdT(10U/μl)————————————20μl
Biotin-11-dUTP(5μM)————————100μl
Biotin-Control Oligo(0.4μM)————100μl
Ultrapure water———————————1ml
探针标记终止液———————————200μl
TE—————————————————15ml
退火缓冲液(10X)——————————150μl


储存条件：-20℃。

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