MT0046 组织细胞基因组DNA提取试剂盒

北京百奥莱博供应的组织细胞基因组DNA提取试剂盒用于科研试验，本产品质量好，且具价格，深为用户称道，了解更多组织细胞基因组DNA提取试剂盒等DNA提取纯化产品请联系我司咨询订购。...

特别提示：包括组织细胞基因组DNA提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：组织细胞基因组DNA提取试剂盒
英文名称：Tissue cell genomic DNA Extraction Kit
产品货号：MT0046
产品规格：50T

本试剂盒采用独特的裂解液，可快速可靠从组织和细胞样本中纯化出高纯度的基因组DNA。应用本试剂盒提取的DNA可直接用于限制性酶切反应、PCR、文库构建、Southern杂交等多种分子生物学实验。

产品组成：

组分	规格
gDNA LB1	3ml
gDNA BB2	30ml
Washing Buffer（已含乙醇）	55ml
蛋白酶K（20mg/ml）	1ml
Nuclease Free H2O	10ml
吸附柱	50套
2mL Nuclease Free收集管	50个

保存条件：室温避光保存，有效期1年。

应用实例：

图：应用百奥莱博组织DNA提取试剂盒提取小鼠肌肉组织DNA。

操作方法：

1．样本处理（1.5ml EP管中处理）
  培养贴壁细胞（10⁵～10⁷个）：胰酶消化完毕后，离心收集细胞沉淀，加入170μl水重悬细胞沉淀。通常获得1～10μg基因组DNA。
  悬浮细胞（10⁵～10⁷个）：离心收集细胞沉淀，加入170μl水重悬细胞沉淀。
  全血分离的白膜层细胞：直接吸取白膜层细胞 170μl，不足情况下用水补足到 170μl。通常获得 1～10μg 基因组DNA。
  组织样品(1～10mg)：用液氮研磨粉碎，加入到 170μl 水中，漩涡混合均匀。其它研磨粉碎法制备的样品，可直接取170μl 匀浆物。通常获得 5～40μg 基因组DNA。
  块状组织(1～10mg)：挑取一块置于 1.5ml EP管中，加入170μl 水，可用剪刀尽可能剪碎或匀浆研磨。通常获得5～40μg 基因组DNA。
2．向上述准备好的样品溶液中加入50μl gDNA LB1 和10μl RNase A 漩涡混合均匀，56℃水浴锅中消化 5 min。
3．消化完毕后，向上述裂解中加入20μl 蛋白酶漩涡混合均匀，继续放置到 56℃水浴锅中消化 30分钟（细胞）、6h或过夜（组织样品）。
4．消化完毕后，13000rpm离心15s，去未消化的细胞组织残渣。
5．吸取上清 200～250μl 到新的1.5ml EP管中。 加入500μl gDNA BB2上下颠倒混合 1分钟 后。直接倒入到吸附柱中，13000rpm离心1分钟。倒掉废液。
6．向吸附柱中加入500μl Washing Buffer，13000rpm离心15s。重复此步骤一次。
7．将吸附柱重新放回离心机，13000rpm 空离心2分钟，将残留的乙醇彻底甩干。
8．将吸附柱芯放入到 2ml Nuclease-Free 收集管中，向吸附柱芯中加入50~150μl Nuclease Free H2O，室温放置2分钟，13000rpm离心1分钟，洗脱液即为基因组DNA，冷冻保存。

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名称：海洋动物DNA提取试剂盒(柱式提取)
货号：BTN130401
规格：50次
本试剂盒是在柱式动物DNA提取试剂盒(BTN71206)试剂盒基础上优化改良而得，专门针对海洋动物的基因组DNA提取的试剂盒，可用于鱼类、虾类、贝类、蟹类等海洋动物和水产动物的荃因组DNA提取，可以有效去除海洋动物组织中的蛋白、脂肪及其他有机化合物等杂质。

产品特点：
1. 使用本试剂盒提取的基因组DNA可适用于各种常规分子生物学操作，如:酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等试验。
2. 操作简单安全，1小时内即可获得超纯的基因组DNA，纯化过程中不需要使用苯酚氯fǎng等有机试剂。
3. 应用广泛，适用于多种动物细胞和动物组织等。
4. 高，质量和国外同类试剂盒相当，价格更低。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	50ml
蛋白酶K溶液(20mg/mL)	1ml
溶液B	15ml
溶液C	13ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	15ml
通用洗脱液	15ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存(蛋白酶K溶液需要低温运输，-20℃保存)，有效期一年。

使用方法：
使用前请先在溶液C和通用洗柱液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。

1. 切取不多于30mg的组织材料，放入装有200μL溶液A的离心管中，涡旋振荡15秒。注意：根据提取的组织不同，起始量也稍有不同，腮的细胞量较大，一般建议提取量不超过20mg。如果需要去除RNA，可加入40μL RNase A(10mg/mL)溶液(客户自备，BTN3160)，振荡15秒，室温放置5分钟。
2. 加入20μL蛋白酶 K溶液(20mg/mL)，涡旋混匀，简短离心以去除管盖内壁的水珠。在56℃下放置，直至组织完全溶解，简短离心以去除管盖内壁的水珠，再进行下一步骤。注意：不同组织裂解时间不同，通常需0.5-2小时即可完成。扇贝组织0.5小时基本可裂解完全，虾和鱼类组织1小时。每小时振荡混合样品2-3次，每次振荡混匀15秒。
3. 加入200μl溶液B，充分颠倒混匀，70℃放置10分钟，溶液应变清亮，简短离心以去除管盖内壁的水珠。注意：加入溶液B时可能会产生白色沉淀，一般70℃放置时会消失，不会影响后续实验。如溶液未变清亮，说明细胞裂解不彻底，可能导致提取DNA 量少和提取出的DNA 不纯。
4. 加入200μl 无水乙醇，充分颠倒混匀，此时可能会出现絮状沉淀，简短离心以去除管盖内壁的水珠。
5. 将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个离心吸附柱中(吸附柱放入收集管中)，12000rpm(～13,400×g)离心30秒，倒掉废液，将吸附柱放回收集管中。
6. 向离心吸附柱中加入500μl溶液C(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm(～13,400×g)离心30秒，倒掉废液，将吸附柱放入收集管中。
7. 向吸附柱中加入600μl 通用洗柱液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm(～13,400×g)离心30秒，倒掉废液，将吸附柱放入收集管中。
8. 重复操作步骤7。
9. 将吸附柱放回收集管中，12000rpm(～13,400×g)离心2分钟，倒掉废液。将吸附柱置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。
10. 将吸附柱转入一个干净的离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50-200μl 通用洗脱液，室温放置2-5分钟，12000rpm(～13,400×g)离心2分钟，将溶液收集到离心管中。注意：通用洗脱液的体积不应少于50μl，体积过小影响回收效率。为增加基因组DNA的得率，可将离心得到的溶液再加入吸附柱中，室温放置2分钟，12000rpm(～13,400×g)离心2分钟。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用超纯水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5 范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率；且DNA产物应保存在-20℃，以防DNA 降解。

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