BTN9060 TdT加尾法DNA探针标记试剂盒
产品简介
北京百奥莱博供应的TdT加尾法DNA探针标记试剂盒用于科研目的,本品质量稳定,价位合理,需要TdT加尾法DNA探针标记试剂盒等探针标记及检测产品的客户,请到我公司官网联系我们。...
产品详细介绍
特别提示:包括TdT加尾法DNA探针标记试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:TdT加尾法DNA探针标记试剂盒
英文名称:TdT-Tailing DNA Labeling Kit
产品货号:BTN9060
产品规格:5次
本试剂盒是基于TdT末端转移酶能够在DNA的3′端添加dNTP尾巴的原理而设计,该反应的示意图如下:
产品特点:
1.快速,15分钟即可完成标记反应。
2. 不但可用于单链DNA和DNA Oligo标记,还可用于3′突出的双链DNA标记,但后者标记效率稍低。
3.可用同位素底物和非同位素底物(生物素和dì高辛标记的核苷酸等)。
4. 提供不带标记核苷酸、带生物素标记核苷酸和带dì高辛标记核苷酸三种选择。
5. 同时提供非标记的dATP,用户可以用其调节加尾长短和标记核苷酸掺入比例。
6. 标记的探针可用于电泳迁移率实验(EMSA)、原位杂交(ISH)、Northern Blot(不推荐用于低丰度RNA检测)、小RNA Northern、Southern Blot(不推荐用于单拷贝基因检测)、菌落杂交、斑点印迹杂交分析等。
试剂盒组成:
成分 | 规格 |
TdT缓冲液,5× | 20μl |
TdT(末端转移酶,10U/μL) | 10μl |
dATP,2mM | 5μl |
标记核苷酸 | (A、B、C不同,见注) |
超纯水 | 1ml |
说明书 | 1份 |
注:A型用于自选标记,用户需自备标记核苷酸,本产品不提供标记核苷酸;B型提供5μl Biotin-11-dUTP;C型提供含5μl DIG-11-dUTP。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.在0.2mL微量离心管中按下表设置一个20μl体系的标记反应(如果需要标记更多探针,请增加标记体积而不要增加探针DNA的浓度):
成份 | 用量 |
探针DNA | 100-200 pmol |
TdT Buffer,5× | 4μl |
标记核苷酸,1mM (A型需自备标记核苷酸) | 1μl |
dATP,2mM | (见下注) |
TdT末端转移酶(10U/μL) | 2μl |
超纯水 | 补到20μl |
注:dATP可以不加,但这样得到的加尾全部是标记核苷酸,由于空间阻碍,灵敏度不一定zuì佳。如果杂交效果不好,掺入一定比例的dATP到标记核苷酸中,以控制标记的密度,提高比活。具体比例如何可以自己优化。
2. 37℃反应15分钟,延长到30分钟也可以。如果没有非标记核苷酸存在,一般可以加尾3-5个Biotin或DIG标记的核苷酸(标记物空间阻碍抑制延长);如果有在加尾反应中加入一定比例的非标记核苷酸dATP(其他dNTP也可,只是本试剂盒只提供dATP而已),每条探针上可加上约100个核苷酸,平均含5个标记核苷酸
3. 70℃ 10分钟灭活TdT酶。
4. 如果需要,可以PAGE电泳+银染(相关试剂需要另购)检测标记效率,带标记的探针泳动速度将低于没标记的探针。
5. 如果是非同位素标记,探针不需纯化可以直接用于杂交。如果需要纯化非同位素标记的探针,请不要酚/lǜ仿抽提,因为非同位素标记物一般会使探针DNA进入有机相而丢失。
6. 使用时需将探针以1-8 ng/μL的终浓度加入到杂交液中(如果探针是双链DNA,加入前还需热变性)。如果不立即使用,非同位素标记的探针DNA可-20℃长期放置一年,同位素标记的探针DNA不能放置。
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货号:BTN120653C
规格:5次
本试剂盒是基于Klenow DNA聚合酶填平DNA片段能力的填入法标记试剂盒,该反应的示意图如下:
产品特点:
1.快速,15分钟即可完成标记反应。
2.可用于标记5′突出的双链DNA。
3.可用同位素底物和非同位素底物(生物素和dì高辛标记的核苷酸等)。
4. 标记的探针可用于电泳迁移率实验(EMSA)、原位杂交(ISH)、Northern Blot(不推荐用于低丰度RNA检测)、小RNA Northern、Southern Blot(不推荐用于单拷贝基因检测)、菌落杂交、斑点印迹杂交分析等。
试剂盒组成:
组份 | BTN120653A | BTN120653B | BTN120653C |
填入法标记缓冲液,5× | 50μl | 50μl | 50μl |
Klenow DN聚合酶(1U/μL) | 5μl | 5μl | 5μl |
dNTP(2mM) | 25μl | - | - |
含Biotin-dUTP的dNTP | - | 25μl | - |
含DIG-dUTP的dNTP | - | - | 25μl |
超纯水 | 1ml | 1ml | 1ml |
说明书 | 一份 | 一份 | 一份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
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