当前位置:仪器交易网 » 供应 » 实验室常用设备 » 生物试剂 » 北京百奥莱博科技有限公司 » 探针标记及检测

产品详情

KFS162 罗丹明 123

  • 产品/服务:KFS162 罗丹明 123
  • 型 号:KFS162
  • 品 牌:百奥莱博
  • 单 价:面议 
  • 更新日期:2023-05-31
  • 有效期至:长期有效
  • 浏览次数:900
产品简介

罗丹明 123是高品质的探针标记及检测产品,由北京百奥莱博供应,本产品仅用于生物化学研究方面,本产品质量好,且具价格,深为用户称道,了解更多罗丹明 123等探针标记及检测产品请联系我司咨询订购。...

产品详细介绍

特别提示:包括罗丹明 123在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


产品名称:罗丹明 123
英文名称:Rhodamine 123
产品货号:KFS162
产品规格:5mg



根据您的关注的罗丹明 123,您可能还对以下产品有需求:



名称:生物素标记UTP溶液(Biotin-16-UTP )
货号:BTN151203
规格:25μL

名称:随机引物法DNA探针标记试剂盒
货号:BTN90603A
规格:5次
本试剂盒是基于Feinberg和Vogelstein发明的随机引物标记法而开发出来的即用型DNA探针标记试剂盒,标记过程由双链DNA热变性、随机引物与单链DNA结合、在Klenow DNA聚合酶催化下,引物的延伸合成DNA探针并掺入标记的核苷酸三步组成,可用下面的示意图表示:
随机引物法DNA探针标记试剂盒
本产品对Feinberg和Vogelstein经典方法进行了改良。

产品特点:
1. 提供的标记反应液整合了除酶和模板外的所有成分,简化了反应加样步骤,提高了标记反应的可重复性。
2. 使用无外切活性的Klenow exo- DNA聚合酶,已标记DNA探针不会被酶降解。
3.快速,zuì快1小时即可完成标记反应。
4. 得到的DNA探针比活性高(如果是同位素,可以达到109cpm/μg DNA),检测灵敏度高。
5. 所需模版DNA量少(只需要10ng以上即可),DNA可以是各种形状(线状和环状)的、也可以是单链或双链的,长度在100bp以上均可。
6. 得到的探针长度在200-400nt之间,可以用于Southern杂交、Northern杂交、原位杂交、菌落和斑点印迹杂交等。
7. 提供三种标记选择,其中BTN90603A可用于各种同位素标记和其他任何非同位素标记,但需自备标记底物;BTN90603B和BTN90603C可分别用于生物素和地高xīn标记,不需自备标记底物。

试剂盒组成:
成分 规格
2×A型标记反应液(自备标记物型) 50μl(仅A型有)
2×B型标记反应液(生物素型) 50μl(仅B型有)
2×C型标记反应液(DIG型) 50μl(仅C型有)
dATP,2mM 10μL(仅A型有)
dTTP,2mM 10μL(仅A型有)
dGTP,2mM 10μL(仅A型有)
dCTP,2mM 10μL(仅A型有)
Klenow exo-聚合酶(2U/μL) 5μl
超纯水 1ml
说明书 1份


储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

使用方法:
1.在一干净的硅化的塑料离心管中加入下列成分:
成分 用量
模板DNA 50-150ng
2×标记反应液(ABC三种之一) 10μl
超纯水 补水到15μl

注意:非同位素标记物由于疏水性强,容易与常用的塑料离心管表面非特异性结合,所以一定要使用硅化的塑料离心管。模板DNA并非越多越好,因为模板会在杂交反应中跟标记的探针杂交,竞争性地抑制探针跟靶分子的杂交。
2. 沸水浴5-10分钟,或在PCR仪上100℃加热5-10分钟使DNA模版充分变性,立即放冰上待用。注意:如果PCR仪器不能设置到100℃,99℃加热5分钟也可。
3.高速离心数秒使所有液体集中在管底,根据试剂盒类型加入下列成份:
试剂盒类型 成分及用量
BTN90603A型 dATP、dGTP、dCTP各1μl(共3μL,浓度均为2mM)
自备的2mM dTTP/标记dUTP混合物(见注)1μL
1μl Klenow exo聚合酶
BTN90603B型 1μl Klenow exo聚合酶
4μl超纯水
BTN90603C型 1μl Klenow exo聚合酶
4μl超纯水

注:上表中的dTTP/标记dUTP混合物中dTTP和标记的dUTP的总浓度为2mM(在20μL体系中混合液的终浓度为0.1mM,dTTP与生物素或DIG标记的dUTP的比例zuì好为65:35)。由于空间阻碍,并非标记生物素或DIG标记的dUTP越多灵敏度越高,一般dTTP与标记dUTP的比例在65:35为zuì佳。但如果使用自备的其他标记核苷酸,如fluorescein、hydroxycoumarin、resorufin和aminoallyl标记的dUTP,则用户需要自己摸索其与dTTP之间的zuì佳比例,如果使用32P标记的dUTP,则比活zuì好为3000Ci/mmol,浓度为好为10uCi/μL,并且不需要加入dTTP。
4. 轻柔吹打混匀。如有液滴沾在管壁上,高速离心数秒使所有液体集中在管底。
5. 37℃保温1-20小时。标记效率跟模版量和保温时间相关,具体见下表:
模版DNA用量 1小时后探针合成量 20小时后探针合成量
10ng 80ng 900ng
30ng 150ng 1.35μg
100ng 350ng 1.65μg
300ng 750ng 2.2μg
1μg 1.3μg 2.6μg
3μg 1.6μng 2.6μg

6. 加1μl自备的0.5M EDTA(pH8.0)终止反应,立即放冰上待用或放-20℃保存一年。用前需要加热100℃ 5分钟使DNA探针变性成单链,然后直接加入到杂交反应液中即可。如果电泳检测,标记产物将是弥散状态。
 注意:本方法标记核苷酸掺入率高,因此可以不经纯化直接使用。如果需要纯化,注意不要用酚抽提法纯化非同位素(生物素、DIG和其他等)标记的DNA探针,因为这些标记分子疏水性强,能使标记的DNA进入疏水的有机相而丢失,但可以用乙醇沉淀和Sephadex G50回收(可另购非同位素探针柱式纯化试剂盒)。对比活高的同位素探针,由于其其不稳定,因此应该立即使用,不要长久放置。

关注罗丹明 123,的同时,为您推荐更多您可能感兴趣的产品:


BTN9060 TdT加尾法DNA探针标记试剂盒 5次
BTN120653C 填入法DNA末端标记试剂盒(地高xīn标记dUTP) 5次
BTN121122 柱式探针纯化试剂盒 10次
BTN130907 脱脂奶粉 50g
YT031 生物素标记DNA探针制备试剂盒(随机引物法) 10次
YT948 细胞内钙离子荧光探针(Fluo-4 AM) 25微升
KFS157 线粒体绿色荧光探针(tracker Green) 50μg
KFS162 罗丹明 123 5mg

如果您觉得“KFS162 罗丹明 123”描述资料不够齐全,请联系我们获取详细资料。(联系时请告诉我从仪器交易网看到的,我们将给您最大优惠!)
本页链接:http://www.yi7.com/com_bjbiolab01/sell/itemid-8536869.html
已经有900位访客查看了本页.
产品咨询
* 询价标题:   
快捷提问: (不用打字 “快捷提问”帮您忙!)
* 主要内容:
我希望在 日前回复
公司名:
*联系人:
*联系电话:
电子邮箱:
QQ :
* 验证码:  

公司名称:北京百奥莱博科技有限公司

联系人:王欣

电话:18518407031

手机:18518407031(微信同步)

地址:北京市海淀区紫雀路33号院3号楼

 
没有合适的产品?是否在线询价?
询价标题
联系人
电话
主要内容
验证码  

  • 点击这里给我发消息