BTN91102 柱式骨骼DNA提取试剂盒

柱式骨骼DNA提取试剂盒是高品质的DNA提取纯化产品，由北京百奥莱博供应，本产品仅用于生物化学研究方面，柱式骨骼DNA提取试剂盒是我司众多优质DNA提取纯化之一，质量堪比同类进口产品，价格非常优惠，目前正热烈促销中，恭候您的咨询订购。...

特别提示：包括柱式骨骼DNA提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：柱式骨骼DNA提取试剂盒
英文名称：Bone DNA column extraction kit
产品货号：BTN91102
产品规格：50次

本试剂盒专门用于从动物骨骼(包括骨粉)样品中提取DNA的产品，20次规格足够50次微量提取。

产品特点：
1. 微量提取，一次可以处理300mg左右的骨骼(但需要先将骨粉变成骨粉)。
2. 柱式操作，方法简单，整个过程只需要40-60分钟。
3. 得到的DNA分子量不均匀，一般在20 Kb到100bp之间，具体取决于骨骼的新鲜程度，骨粉的加工方法等。
4. 得到的DNA可以直接用于PCR或荧光PCR反应。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	50mL
溶液B	15mL
溶液C	30mL
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50mL
DNA洗脱液2.0	10mL
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 骨粉的制备：用自备酒精将骨骼表面擦洗干净，以防污染物对后续PCR的影响，然后用骨钻在处理干净的骨骼区域钻取骨粉。对于已经制备好的、商品化的骨粉，可以跳过此步，直接进入下一步。
2. 用天平称取0.2克骨粉，转移到2mL塑料离心管中。
3. 加入1mL溶液A到骨粉中，充分振荡30秒混匀。(注意：溶液A在4℃放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用，且骨粉加到溶液A中后会特别黏稠，需使劲振荡混匀。)
4. 65℃水浴放置30分钟。
5. 加入0.3mL的溶液B和0.2mL的自备氯fǎng，充分振荡30秒混匀。
6. 12000rpm室温离心3分钟，小心将上清液转移到一个新的塑料离心管中。
7. 加入0.5mL溶液C，颠倒混匀。
8. 将混合液分两次转移到离心吸附柱中，每次转移后需要 12000rpm室温离心1分钟，并弃收集管中的穿透液。
9. 加入0.5mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12000rpm室温离心1分钟，弃收集管中穿透液。
10. 再加入0.5mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12000rpm室温离心1分钟，弃收集管中穿透液。
11. 12000rpm室温离心半分钟，弃含穿透液的收集管。此步干甩十分重要，否则残留的液体会抑制后续的PCR。
12. 将离心吸附柱套入到一个自备的干净的1.5mL塑料离心管中，在离心吸附柱的滤膜的中部加入30μL DNA洗脱液，然后室温放置2分钟。如果先将DNA洗脱液预热到60-80℃再使用，效果更佳。
13. 12000～15000g室温离心1分钟，离心管中收集的样品即为骨骼DNA。
14. 取少量进行电泳检测。注意：一般DNA都呈现弥散状，分布在20 Kb到100bp这一广泛的范围，其比例跟骨骼(或骨粉)的新鲜程度、加工过程(对骨粉)等因素密切相关。
15. DNA样品可以直接用于PCR，也可放-20℃长期保存。

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货号	名称	规格
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名称：红细胞裂解液B型(流式细胞分析用)
货号：BTN90309
规格：250mL
本品用于快速裂解哺乳动物全血中的红细胞而基本不破坏白细胞和其他淋巴细胞的完整性和生物学活性。由于红细胞是血液的主要细胞成份，不含DNA和RNA，其所含血红素能抑制PCR反应，所以先用本产品裂解红细胞，再提取基因组DNA或RNA 有助于提高所得样品纯度。

产品特点：
1.可以处理人全血、小鼠全血、脾细胞中的红细胞。
2.，一次处理能裂解80%以上的哺乳动物红细胞，能回收90%左右的白细胞。一般样品zuì多只需要处理两次。
3.扩容性好，可以一次处理多达几十毫升的样品，也可以处理100μL的血液。
4.基于NH4Cl 裂解法，得到的白细胞主要用于流式细胞分析。

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
用去离子水将本产品(10×)稀释为1×工作液(1mL 本产品加9mL去离子水)，待温度回到室温或37℃加热到37℃的时候再使用。工作液不能长期放置，只能现配现用。

一．裂解哺乳动物全血中的红细胞
1.离心哺乳动物抗凝血液后弃血浆部分，按每1mL 哺乳动物抗凝血液细胞沉淀加10mL 1×工作液的比例加入红细胞裂解液B型的1×工作液。
2. 轻柔吹打充分混匀。
3.室温放置 15分钟(注意：放置时间不要超过15分钟)。
4. 4℃1000rpm离心10分钟，吸弃红色的上清液。
5. 如果红细胞裂解不完全，可以重复第 1-4 步。
6. 用适当的自备缓冲液(如Hanks溶液)重悬白细胞沉淀。
7. 用于细胞计数和流式细胞分析等后续试验。

二．裂解组织细胞中的红细胞
1. 按标准方法用自备的胰酶将组织消化成单个细胞悬液，离心弃上清。
2. 按 1：10的比例向细胞沉淀中加入红细胞裂解液B型工作液，轻柔吹打均匀。
3.室温放置 15分钟(注意：放置时间不要超过15分钟)。
4. 4℃ 1000rpm离心10分钟，吸弃红色的上清液。
5. 如果红细胞裂解不完全，可以重复第 2-4 步。
6. 用适当的自备缓冲液(如 Hanks溶液)重悬白细胞沉淀。
7. 用于细胞计数和流式细胞分析等后续试验。

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