ALH601 血清miRNA提取试剂盒
产品简介
血清miRNA提取试剂盒的品牌是百奥莱博,是优质的RNA提取纯化产品,本制品用于生化实验研究等领域,血清miRNA提取试剂盒是我司众多优质RNA提取纯化之一,质量堪比同类进口产品,价格非常优惠,目前正热烈促销中,恭候您的咨询订购。...
产品详细介绍
特别提示:包括血清miRNA提取试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:血清miRNA提取试剂盒
英文名称:Serum microRNA Extraction Kit
产品货号:ALH601
产品规格:50次
本试剂盒采用独特的裂解液迅速直接裂解血清血浆RNA酶,强烈有机抽提去除蛋白和DNA,RNA包括微小分子RNA在高浓度乙醇下吸附于离心柱内特殊硅基质膜, 再通过一系列特殊漂洗液快速的漂洗-离心的步骤,漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质进一步去除, zuì后低盐的洗脱液将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
近年来对RNA干扰和调节性小RNA的广泛研究迫切需要一种能有效提取15~30核苷酸左右大小RNA(包括siRNA和miRNA)的试剂盒。但是传统的RNA提取方法如硅胶膜不能有效吸附回收,酚/胍抽提和异丙醇或者乙醇沉淀并不能有效沉淀回收微小分子RNA,对于血清、血浆样本更是由于其自身特点更难提取。本试剂盒的出现很好的解决了这一问题
产品组分:
Lysis buffer————避光50 ml
Wash Solution 1————12 ml(次使用前加入28ml 无水乙醇)
Wash Solution 2/3————10 ml(次使用前加入42ml 无水乙醇)
RNase-free H2O————10 ml
吸附柱和收集管————50 套
产品特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.也不需要乙醇沉淀等容易丧失微小分子RNA的步骤。
3.特殊的裂解液配方,可以处理更多的血清/血浆样品。
4.多次柱漂洗确保高纯度,可用于RNAi,RT-PCR,Northern-blot和各种实验。
注意事项
1. 次使用前请先在Wash Solution 1 瓶和Wash Solution 2/3 瓶中加入量乙醇,加入后请及时打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
2. 除说明外,所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm 的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
3. 需要自备乙醇,氯fǎng。
4. Lysis buffer 和Wash Solution 1 含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. RNA 纯度及浓度检测:
一般情况下通过测量OD260 值可以知道RNA 产量,测量OD260/OD280 比值可以是衡量蛋白质污染程度的指标之一,但是由于血清/血浆的RNA 含量特别低,已经低于分光光度计测量的下限,无法测量准确,因此一般无法通过测量OD 值或者比值的方法来判断纯度或者浓度,只能通过下游做荧光定量RT-PCR 来判断产量。同时无细胞的血清/血浆中的RNA 主要是小于100 nt 的小RNA,因此传统的电泳检测RNA 完整性并不适用于血清/血浆RNA。
储存条件:室温,有效期6个月。(lysis buffer需4℃避光保存)
本制品别名:血清miRNA分离试剂盒|血清miRNA纯化试剂盒|血清microRNA分离试剂盒|血清microRNA纯化试剂盒|血清microRNA提取试剂盒|血清总RNA提取试剂盒
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名称:粪便RNA柱式提取试剂盒
货号:BTN101109
规格:50次
由于粪便中有机质含量丰富,对RT-PCR等后续反应有大的抑制作用,所以从粪便中提取高纯度的RNA一直是十分棘手的问题。本产品是在粪便RNA提取试剂盒基础上开发的柱式粪便RNA提取产品。
试剂盒特点:
1. 操作比非柱式法更加简单快速,处理一个样品只需要约十几分钟。
2. 去污染效果好,RNA 纯度更高,平均OD260/280一般都在2.0左右。
3. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA 合成等实验。
4. 高于进口的柱式粪便RNA提取产品。
5. 试剂无害,环保。
试剂盒组成:
成分 | 规格 |
溶液A | 50ml |
酸洗玻璃珠,400μm | 25g |
溶液B | 15ml |
溶液C | 50ml |
离心吸附柱 | 50套 |
通用洗柱液 | 50ml |
RNA洗脱液 | 10ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,有效期两年。
使用方法:
1.在自备的3-5mL离心管中称取0.5-1 g 粪便,加入0.5g 玻璃珠和1mL溶液A,盖紧离心盖后震荡器上剧烈震荡5-10分钟。注意:如果放置在低温,溶液A可能会产生沉淀,使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
2. 稍微静置后将上清液(一般呈棕色)转移至一个干净的1.5mL塑料离心管中。所取上清液不要超过1mL,否则后续操作没有足够空间。
3.在离心管中加入0.3mL的溶液B和0.2mL自备氯fǎng,在振荡器上振荡30秒混匀。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
4.室温12000rpm离心3~5分钟。
5. 将上清液(约0.6mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中,下层有机相和中间层含有DNA、蛋白质和其他杂质,避免触及或吸取。zuì好留下100μl上清液不取。
6.在上清液中加入等体积的溶液C,用手上下颠倒或振荡器振荡30秒混匀,此时溶液呈均匀的乳浊状。
7.室温12000rpm离心3分钟,两相间将有白色膜状物(蛋白质)形成。
8. 将一半的溶液转移到离心吸附柱中,套入收集管中厚12000rpm室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。
9. 将剩下的一半溶液转移到同一离心吸附柱中,套入收集管中后12000rpm室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。
10. 加0.7mL 通用洗柱液,套入收集管中后室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。
11. 加0.3mL 通用洗柱液,套入收集管中后室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。此步可以省略。
12. 将离心吸附柱套入收集管中后室温离心半分钟,弃含穿透液的收集管。此步干甩十分重要,否则残留的乙醇会影响RNA的使用。
13. 将离心吸附柱套入到一个自备的RNase-free 收集管中,加入30-100μL RNA洗脱液,室温放置1-2分钟。
14. 12000rpm室温离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
15. RNA 完整性的电泳检测:如果需要做Northern杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳,因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。
16. RNA产量产率测定:将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度X 体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
17. RNA 纯度测定:无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响RT-PCR等反应。
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