QN2660 WB蛋白Marker
产品简介
北京百奥莱博供应的WB蛋白Marker用于科学研究,我公司的WB蛋白Marker品质上佳,经过多年的开发生产,已然非常成熟,欢迎广大新老客户订购。...
产品详细介绍
特别提示:包括WB蛋白Marker(19~110kDa)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:WB蛋白Marker(19~110kDa)
英文名称:Western Blotting Marker
产品货号:QN2660
产品规格:10T|20T
Western Blot Marker是专门为Western Blot试验设计的分子量标准。传统的Western Blot试验需要使用预染蛋白Marker来跟踪检测阳性抗原信号和转膜效率。但预染蛋白Marker用在Western Blot试验中有三大缺点:
(1)预染蛋白Marker无法在胶片上曝光,曝光信号需要根据膜上的预染蛋白Marker来判断,因此后续的图片需要拼接才能两者合而为一;
(2)预染蛋白Marker都经过化学修饰,经过化学修饰的蛋白在SDS-PAGE电泳过程中迁移率发生改变,分子量信息不再准确,往往导致Western Blot结果判断出现较大偏差;
(3)预染蛋白Marker无法检测作为杂交过程的阳性对照。
Western Blot Marker由7种不同分子量的蛋白组成(19、20、35、45、60、65、110KDa),其中19、45、65KDa条带为蓝色预染marker,其它四个条带都可与人、小鼠、大鼠、山羊、绵羊、兔的IgG恒定区结合。Western Blot Marker可以直接结合二抗,或通过结合一抗间接结合二抗,因此蛋白Marker就能与抗原在同一张胶片上曝出信号,阳性信号可以直接通过Western Blot Marker的位置来判断。另外,预染发光Western BlotMarker还可作为Western Blot试验的阳性对照。
使用说明:
1.取出后于室温放置融化;
2.温和地充分混匀,取5μl该Western Blot Marker至上样孔中,进行SDS-PAGE电泳。
3.电泳完毕后转至PVDF膜或NC膜,与一抗二抗孵育。
4.孵育完毕,将Western Blot Marker与抗原一起通过ECL曝光至胶片。
注意事项:
1.本产品可直接使用,不需要加热。
2.及时更换电泳缓冲液并使用新配制的凝胶,以免影响电泳结果。
3.该产品与抗血清或高浓度多克隆抗体一起孵育时可能会出现非特异性条带,此时可降低该预染发光Western Blot Marker的上样量至1~2µl。
储存条件:-20℃可保存至少六个月。避免反复冻融,建议分装保存。
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货号:BTN100867
规格:250mL
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储存条件:常温运输、4℃保存,有效期一年。
名称:增强型DAB显色试剂盒
货号:BTN81223
规格:100mL
增强型DAB显色试剂盒中含有检测辣根过氧化物酶(HRP)的所有试剂,适合于检测各种印迹膜上标记的HRP。其反应原理是HRP可以催化底物DAB在目的蛋白所在的位置转变为深褐色的化合物,可根据颜色的有无和深浅来检测HRP的存在与否或存在量,进而推测HPR标记物识别的靶分子的位置及含量。该反应的示意图如下:
产品特点:
1.即开即用,不需要用户准备任何材料。
2.DAB以干粉提供,方便运输。
3.可用于各种印迹膜(包括Southern、Northern、Western印迹膜)和免疫组化中的组织切片。免疫组织显色后还可用Nuclear fast red复染。
4.跟PVDF膜、尼龙膜兼容。
5.显色过程中需要避光,在显色后可拍照或扫描。
试剂盒组成:
成分 | 规格 |
DAB干粉 | 100mg |
10mL棕色塑料瓶 | 1个 |
DAB溶解液 | 100ml |
增强剂 | 1ml |
H2O2 | 1ml |
说明书 | 1份 |
注意:本产品可以配制100mL增强型DAB显色液,但其具体使用次数根据跟印迹膜的大小密切相关。
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期1年
自备试剂:超纯水、HRP标记物(抗体或探针)处理过的印迹膜。
使用方法:
1.从DAB溶解液中取5mL到一个10mL的棕色塑料瓶中(本试剂盒提供),将100mg DAB干粉全部加入,充分振荡混匀,所得溶液即是20×DAB浓缩液。此溶液如果一次不能用完,可以分装成小管在-20℃避光放置6个月。
2.按每cm2印迹膜需要0.1mL DAB显色液的比例计算所需显色液的量,并按下表配制DAB显色液(此处以配制10mL为例,用户如需要配制其他体积,可按比例增减各成分用量):
成分 | 用量 |
DAB溶解液 | 9.4ml |
20×DAB浓缩液 | 0.5ml |
增强剂 | 0.1ml |
H2O2 | 10μl |
注意:此溶液必须立即使用。
3.如果是印迹膜,则迅速将印迹膜转移到上步得到的DAB显色液中,室温避光静置。待印迹膜上出现满意的条带时(一般需要2-3分钟,zuì长不超过10分钟,具体跟靶分子浓度密切相关),迅速将印迹膜转移到盛有超纯水的托盘中摇晃,终止显色反应。数分钟后需要换水,共三次。用吸水纸吸干印迹膜上的水分,照相处理后避光干燥保存印迹膜。
4.如果是组织切片,则直接将DAB染色液滴加在切片上,室温避光放置10分钟,然后浸在超纯水中数次,空气中干燥后显微镜下检测或照相。
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