JN0092 100bp DNA Ladder
产品简介
我公司致力于为客户提供高纯度、低成本的活性重组蛋白,包括100bp DNA Ladder在内的各类受体、细胞因子、生长因子、转录因子、激素、酶、毒性蛋白、病毒抗原等。...
产品详细介绍
特别提示:包括100bp DNA Ladder Plus在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:100bp DNA Ladder Plus
产品货号:JN0092
产品规格:500μl(100次)
本DNA Marker为预混1×Loading Buffer的DNA溶液,可直接电泳。100bp DNA Ladder Plus在100bp DNA Ladder基础上添加了1200bp,1500bp,2000bp三个条带。
片段组成:
100bp,200bp,300bp,400bp,500bp(加亮),600bp, 700bp,800bp,900bp,1000bp,1200bp,1500bp,2000bp,其中500bp条带浓度加倍,约为30 ng/μl,显示为亮带,使电泳结果更容易辨认,亦可用于定量。其它各条带浓度约为10 ng/μl。
储存条件:-20℃,有效期2年。
图1:DNA Marker电泳图
图2:DNA Marker条带示意图
表1:DNA Marker选择指南
目的条带分子量范围 (推荐琼脂糖%) | 标准分辨率 | 高精分辨率 |
1500bp以下 (1.0%到2.0% Agrose) | 200bp DNA Ladder | 100bp DNA Ladder |
200bp DNA Ladder Plus | 100bp DNA Ladder Plus | |
100bp DNA Ladder ODD | DNA Ladder 2000 Plus | |
100bp DNA Ladder ODD Plus | DIY DNA Marker(条带任选) | |
DNA Ladder 2000 | ||
1500bp以上 (0.7% Agrose) | DNA Ladder 3000 | 1kb DNA Ladder I |
DNA Ladder 5000 | 1kb DNA Ladder II | |
DNA Ladder 9000 | 1kb DNA Ladder Plus I | |
DNA Ladder 10000 | 1kb DNA Ladder Plus II | |
λ/Hind III DNA Marker | DIY DNA Marker(条带任选) |
表2:DNA Marker系列一览表
DNA Marker | 条带组成(bp) | 琼脂糖(%) |
100bp DNA Ladder | 100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000 | 1.5% |
100bp DNA Ladder Plus | 100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1200、1500、2000 | 1.0% |
100bp DNA Ladder ODD | 100、300、500、700、900、1100、1500 | 1.5% |
100bp DNA Ladder ODD Plus | 100、300、500、700、900、1100、1500、2000、3000 | 1.0% |
200bp DNA Ladder | 200、400、600、800、1000、1200、2000 | 1.5% |
200bp DNA Ladder Plus | 200、400、600、800、1000、1200、2000、3000、5000 | 1.0% |
DNA Ladder 2000 | 100、250、500、750、1000、2000 | 1.0% |
DNA Ladder 2000 Plus | 100、250、500、750、1000、2000、3000、4000、5000 | 1.0% |
DNA Ladder 3000 | 100、250、500、750、1000、1500、2000、3000 | 0.7% |
DNA Ladder 5000 | 100、250、500、750、1000、1500、2000、3000、5000 | 0.7% |
DNA Ladder 9000 | 500、1000、2000、3000、5000、9000 | 0.7% |
DNA Ladder 10000 | 500、1000、2000、4000、7000、10000 | 0.7% |
1kb DNA Ladder I | 500、1000、 2000、3000、4000、5000、6000、8000 | 0.7% |
1kb DNA Ladder Plus I | 100、250、500、750、1000、1500、 2000、3000、4000、5000、6000、8000 | 0.7% |
1kb DNA Ladder II | 500、1000、 2000、3000、4000、5000、6000、7000、8000、9000、10000 | 0.7% |
1kb DNA Ladder Plus II | 100、250、500、750、1000、1500、 2000、3000、4000、5000、6000、7000、8000、9000、10000 | 0.7% |
λ/Hind III DNA Marker | 125、564、2027、2322、4361、6557、9416、23130 | 0.6% |
DIY DNA Marker(条带任选) | 100、200、250、300、400、500、600、700、750、800、900、1000、1100、1200、1500、 2000、3000、4000、5000、6000、7000、8000、9000、10000等24个fregment任选 | 详情请参考说明书 |
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货号:BTN90317
规格:30次
本品是专门用于DNA 尿素-PAGE电泳的一站式试剂盒。
产品特点:
1.一站式,即开即用,用户不需单独准备各种成分,十分方便。用户不需要单独准备各种成分。
2.可用于DNA 测序、AFLP、DDRT、TGGE和RNase 保护实验等。
3. 安全,免去了实验人员接触粉末状的剧毒物品丙烯酰胺。
4.电泳后可直接用于银染、EB染色等实验。
产品组成:
成分 | 规格 | 保存 |
电泳级尿素 | 210g | 常温 |
电泳级丙烯酰胺 | 77.34g | 常温 |
电泳级甲叉双丙烯酰胺 | 2.67g | 常温 |
10×TBE电泳液 | 250ml | 常温 |
电泳级TEMED | 1.5ml | 4℃,避光 |
电泳级过硫酸铵 | 1g | 常温 |
2×尿素-PAGE上样液 | 1ml | -20℃ |
说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,保存条件见上表,有效期一年。
使用方法:
一、PAGE浓度和交联度的选择指南
尿素-PAGE一般推荐用29:1(丙烯酰胺:甲叉双丙烯酰胺)的交联度,
在此条件下,DNA片段和zuì适PAGE浓度对应关系如下:
单链DNA长度 | zuì佳PAGE浓度 |
二甲苯青FF迁移率 对应的长度 |
溴酚蓝的迁移率 对应的长度 |
50-400nt | 8% | 160nt | 45nt |
200-1000nt | 5% | 260nt | 65nt |
750-2000nt | 3.5% | 460nt | 100nt |
二、制备尿素-PAGE胶
1. 配制尿素-PAGE胶(这是配制100mL胶的用量,配制更大体积的胶则需以此用量为基础按比例增加)
A:新鲜配制10%的APS(过硫酸铵):按每0.1 克过硫酸铵干粉加1mL超纯水的比例将水加到装有硫酸铵干粉的1.5mL EP 管中,摇晃到粉末全部溶解。配制好的10%的APS溶液可以在4℃存放一周。
B:新鲜交联度为29:1的40%的丙烯酰胺-甲叉双丙烯酰胺溶液(AB溶液,下同):在装有77.34 g电泳级丙烯酰胺干粉的瓶中加入约120mL自备的去离子水,然后将全部甲叉双丙烯酰胺加入到同一塑料瓶中(可以加少量丙烯酰胺溶液冲洗出来以避免粉末有毒粉末飘出。甲叉双丙烯酰胺溶解度低,不会溶解在这少量溶液中)。充分摇晃混匀后所得溶液即40%的AB溶液。配制40%而非30%的原因是这样可以在下步留出足够空间加尿素。
C:配尿素-PAGE胶:在一个250mL的三角瓶中,先按下表的用量加入去离子水、40%AB溶液和10×TBE缓冲液。丙烯酰胺单体溶液具有神经毒性,一定要戴手套操作。
PAGE胶浓度 | 各成分用量(尿素为克,其余单位是mL) | 补水到(mL) | ||
尿素 | 40%AB溶液 | 10×TBE缓冲液 | ||
5% | 42 | 12.5 | 5.0 | 100 |
6% | 42 | 15.0 | 5.0 | 100 |
7% | 42 | 17.5 | 5.0 | 100 |
8% | 42 | 20.0 | 5.0 | 100 |
9% | 42 | 22.5 | 5.0 | 100 |
10% | 42 | 25.0 | 5.0 | 100 |
11% | 42 | 27.5 | 5.0 | 100 |
12% | 42 | 30.0 | 5.0 | 100 |
D:搅拌溶解,然后用滤纸过滤。zuì好能抽真空10-15分钟以去除溶液中的氧气(氧气能抑制丙烯酰胺聚合反应),无条件也可以不脱氧。
E:加入500μL 10%APS和100μL TEMED,迅速摇匀后倒胶。
F:在胶的液面距离达到顶部时停止灌胶,插入梳子。
G:室温聚合30-60分钟(低温抑制聚合反应)。
H: 拔出梳子,用0.5×TEB液冲洗加样孔。
三、样品准备
2. 对一般样品、测序样品、微卫星DNA、AFLP样品、DDRT样品、RPA样品:将样品跟上样液1:1 混合,95℃ 3分钟变性,然后放冰上待用。
3. 对TGGE样品:可以直接上样。
四:电泳
4. 将凝胶板固定在电泳装置上,往上槽和下槽中加入足够0.5×TEB电泳液。
5.预电泳5-30分钟将冰上放置的样品上样。
6.连接电源线,打开电源开关。根据胶的大小选择功率(固定功率可以固定产热,这样不容易发生过热而使胶板破裂的现象。如果固定电流或电压,产热都将随电泳时间而变化,不好控制)。对小胶一般用5-6W 固定功率,大胶用15-25W 固定功率。
7. 终止电泳,取出凝胶进行后续的处理(如银染)。注意:如果银染,必须延长固定时间以便让洗出尿素,否则残留尿素会干扰后面的银染。
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