HQF30 TEV protease
产品简介
TEV protease由北京百奥莱博供货并提供相关技术服务支持,本品仅用于生物化学研究方面,本产品质量好,且具价格,深为用户称道,了解更多TEV protease等蛋白质研究产品请联系我司咨询订购。...
产品详细介绍
特别提示:包括TEV protease在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:TEV protease
产品货号:HQF30
产品规格:1000U/5000U
TEV Protease (烟草蚀纹病毒蛋白酶;Tobacco etch virus protease) 是来源于烟草蚀纹病毒(TEV) Nla的重组蛋白酶,此蛋白酶被用来切除纯化后融合蛋白的亲和标签。TEV蛋白酶具有很强的位点特异性,能够识别EXXYXQ(G/S)的七氨基酸序列(Glu-Asn-Leu- Tyr-Phe- Gln-Gly),zuì普通的是ENLYFQG,其切割位点在谷氨酰胺和甘氨酸或丝氨酸之间。该酶在PH 5.5-8.5和4-30℃的广泛范围内皆有活性,使得反应条件的选择可根据目的蛋白的情况而修改。该酶带有His-sumo Tag经6×His标签纯化,剪切反应完毕后可通过Ni-NTA His Bind Resin去除。本蛋白酶来源于大肠杆菌重组表达。
酶活性单位定义:在1X TEV Buffer (50 mM Tris-HCl, pH8.0, 0.5 mMEDTA, 1mM DTT) 中,30℃条件下反应 1 小时,能够切割 3 µg 的反应底物达 85%以上所需的酶量定义为一个活性单位。
保存条件:-80°保存2年,或小量分装后保存于-20°,可保存6个月,避免反复冻融。
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储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
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储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
自备试剂:0.9% NaCl溶液或PBS缓冲液、BCA工作液。
使用方法:
本产品可应用于蛋白分析定量(BCA蛋白分析、考马斯-Bradford分析等)、抗体脱盐回收或其他层析操作的对照、SDS-PAGE电泳和分光光度计紫外灯的常规校准(吸收峰在280nm)等实验。由于蛋白操作彼此差别太大,本手册只列出此产品用于BCA蛋白分析的实验流程,其他流程不在此详述。
1.标准品溶液的稀释方法见下表。此标准品溶液的稀释可使用去离子水、0.9% NaCl或PBS。
2mg/mL本品(μL) | 稀释液(μL) | 稀释后产品终浓度(μg/mL) |
120 | 0 | 2000 |
90 | 30 | 1500 |
60 | 60 | 1000 |
45 | 75 | 750 |
30 | 90 | 500 |
15 | 105 | 250 |
10 | 110 | 125 |
0 | 120 | 0(空白对照) |
2.本产品标准曲线的制备
1)分别取50μL稀释后的本标准品溶液加入到1.5mL离心管中,每个浓度取2个平行样。
2)在每管中各加入1mL工作液后,立即混匀。
3)37℃水浴槽中反应30分钟后,冷却至室温。
4)使用分光光度计测定562nm处的吸光度值。测定时,使用1mL比色皿,用水校零。尽可能在20分钟内检测完毕所有样品。
5)各浓度本标准品溶液的吸光度值减去空白对照的平均值,绘制本标准品溶液的标准曲线。
3.检测样品的测定
检测样品建议与本标准品溶液同时进行测定,测定方法同上,与本标准品的测定方法一致。如果必要也可选择与本标准品溶液相同的稀释方法稀释检测样品后测定。
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