HR0509 酵母活性检测试剂盒-Alamar

酵母活性检测试剂盒-Alamar的品牌是百奥莱博，是优质的细胞凋亡与增殖产品，本制品用于生化实验研究等领域，酵母活性检测试剂盒-Alamar是我司众多优质细胞凋亡与增殖之一，质量堪比同类进口产品，价格非常优惠，目前正热烈促销中，恭候您的咨询订购。...

特别提示：包括酵母活性检测试剂盒-AlamarBlue在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：酵母活性检测试剂盒-AlamarBlue
产品货号：HR0509
产品规格：250T|500T|1000T

AlamarBlue 酵母活性检测试剂盒是应用的氧化还原指示剂阿尔玛蓝快速高灵敏度检测酵母活性的比色检测产品。
AlamarBlue 是一种氧化还原指示剂，能根据酵母的代谢活性产生吸光度变化和荧光信号。这种测定是基于具有代谢活性的细胞将试剂转换成荧光和比色指示剂的能力。受损和无活性细胞具有较低的天然代谢活性，因此对应的信号较低。
AlamarBlue 在氧化状态下呈现紫蓝色无荧光性，而在还原状态下，转变为呈粉红或红色荧光的还原产物，其吸收峰为530-560nm，而散射峰为590nm。在酵母细胞增殖过程中，细胞内处于还原环境。进入酵母细胞内的活性检测染料被代谢中间体及细胞色素类还原后释放到酵母细胞外并溶于培养基中，使培养基从无荧光的靛青蓝变成有荧光的粉红色。zuì后用普通分光光度计或荧光光度计进行检测，吸光度和荧光强度与活性酵母细胞数成正比。染料经过验证安全，可以用于酵母细胞活性和酵母细胞增殖的定量分析细胞毒性研究。
AlamarBlue 的特性使酵母细胞可长期暴露于这种染料，因此可随时间进行测量或进行终点测量。
AlamarBlue 法采用单一试剂，可以连续、快速地检测酵母细胞的增生状态。由于AlamarBlue对酵母细胞、无害，不影响细胞的蛋白质合成与分泌等活性，因此可以对同一批酵母细胞的增生状态进行连续观察和进一步的实验观察，因此有操作简便和几乎不干扰酵母细胞正常代谢的特点。

储存条件：检测液2-8℃避光保存；
【注】
●长期不用可以-20℃保存。需要长期保存可以分装后-20℃保存，避免反复冻融。
● 冻存后融解时注意重新混匀。
有效期：一年。

※ ※ ※ 使用前请仔细阅读产品说明书 ※ ※ ※
使用限制：本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
产品更新：我公司会更新或升级产品，以优化和增强其使用性能，产品说明书会进行相应的版本更新。使用产品时，请参照随产品附带的说明书，不要参照网上下载的说明书，可能是不同的版本。需要zuì新电子版说明书时可以在收到产品后发邮件索取。
使用安全：使用时需要合适的实验室外套，一次性手套。避免皮肤或粘膜与试剂接触。如果试剂不小心接触皮肤或眼睛，应立即用水冲洗。

注意事项：
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
● zuì好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。

产品特点：
● 使用方便：仅使用单一试剂；
● 灵敏度高，数据可靠，重现性好，线性范围更宽；
● 结果稳定：试剂本身稳定性高，实验结果稳定可靠；
● 无需放射性同位素和有机溶剂，对微生物毒性低；
● 适合于高通量药物筛选。
试剂盒以外自备仪器和试剂耗材：
仪器：
●酶标仪/分光光度计 ●培养箱 ● 离心机 ● 移液器 ● 冰箱 ● 冰盒
试剂：
● PBS缓冲液(pH7.4，实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液(1×)) ●或者HBSS
耗材：
● 离心管 ● 吸头 ● 96孔培养板

使用方法：

使用注意事项：
● 正式实验前，建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入Alamar Blue试剂后的培养时间。
● 整个过程均应为无菌操作，因为微生物污染物同样可以还原检测试剂而影响实验结果。
● 注意接种细胞浓度和加入检测试剂后孵育时间。细胞浓度过高或孵育时间过长，会导致继发性还原反应，产生无色和荧光消失。
● 孵育时，须避光。
●本产品可以使用荧光或分光光度检测，但荧光的灵敏度高，实验误差小，推荐使用荧光检测。

1．收集待检测的酵母细胞。
2．用PBS或生理盐水洗涤酵母细胞2次。
3．将酵母细胞用PBS重悬，调整细胞悬液浓度为1×107/ml。
4．96孔板中每孔加入200μl细胞悬液。将AlamarBlue 活性检测试剂于洁净工作台内按10μl/孔加入微孔板中，在细胞培养箱内继续孵育2－12小时，液体颜色部分出现由蓝变为粉红为止(如采用荧光分光光度法，只需孵育0.5－6小时)；
【注】
● 根据不同酵母种类和不同的活性状况差异，需要的孵育时间差异较大，具体以预实验的结果为准。
5．在570nm测定吸光度，参考波长600nm。如无此滤光片，可用565nm和610nm的滤光片替代。
6．也可用荧光分光光度法检测荧光强度，激发光波长在530-560nm之间，发射光波长为590nm。

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名称：CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒
货号：YT157
规格：2000次
本试剂盒是基于一种荧光探针CFDA SE的用于细胞增殖检测和细胞荧光示踪的检测试剂盒。CFDA SE目前被广泛用于替代MTT法或[3H]-thymidine掺入等其它细胞增殖检测方法。基于CFDA SE荧光标记的细胞增殖检测和[3H]-thymidine掺入、BrdU标记获得的检测结果完全一致，但同时可以提供更多的细胞增殖信息。使用CFDA SE检测可以提供整个细胞群中有多少比例的细胞分裂了1次、2次或更多次数，同时如果和其它荧光探针联用，可以获取不同分裂次数细胞的其它相关信息。

CFDA-SE的全称为Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester，分子式为C29H19NO11，分子量为557.47，CAS number为150347-59-4。CFDA SE可以通透细胞膜，进入细胞后可以被细胞内的酯酶(esterase)催化分解成CFSE，CFSE可以偶发性地(spontaneously)并不可逆地和细胞内蛋白的Lysine残基或其它氨基发生结合反应，并标记这些蛋白。在加入荧光探针CFDA SE后大约24小时，即可充分标记细胞。被CFDA SE标记的非分裂细胞的荧光非常稳定，稳定标记的时间可达数个月。CFDA SE标记细胞的荧光非常均一，比以前使用的其它细胞示踪荧光探针例如PKH26的荧光更加均一，并且分裂后的子代细胞的荧光分配也更均匀。

由于CFDA SE标记细胞的荧光非常均匀和稳定，每分裂一次子代细胞的荧光会减弱一半，这样通过流式细胞仪检测就可以检测出没有分裂的细胞，分裂一次的细胞(1/2的荧光强度)，分离两次的细胞(1/4的荧光强度)，分裂三次的细胞(1/8的荧光强度)以及类似的其它分裂次数的细胞。采用CFDA SE通过流式细胞仪检测获得的检测结果参考右图。每一个峰代表一种分裂次数的细胞，从右至左的峰通常依次为分裂0次、1次、2次、3次等次数的细胞。分裂次数较多后，分裂0次或1次等没有分裂或分裂次数较少的细胞会逐渐减少直至检测不到。

使用CFDA SE可以检测分裂多达8次或更多次数的细胞增殖。目前CFDA SE标记细胞后通常用流式细胞仪进行细胞增殖检测。zuì常用于淋巴细胞的增殖检测，也可以用于成纤维细胞、NK细胞等其它细胞的增殖检测，甚至还可以用于细菌增殖的检测。

CFDA SE标记细胞呈绿色荧光，检测时的激发波长可以选择488nm，此时的发射波长为518nm，使用流式细胞仪检测时可以采用FL1 detection channel。CFDA SE标记的细胞也可以用荧光显微镜进行观察。CFDA SE标记的细胞无论在体外还是体内都不会使邻近细胞染色。即CFDA SE荧光探针完成标记后不会从一个细胞转移到邻近细胞。CFDA SE标记细胞仅需5-15分钟即可完成。对于不同细胞，zuì佳标记时间需自行摸索。

本试剂盒提供了配制CFDA SE所需的溶液以及CFDA SE进行细胞标记时所需的配套试剂。如果每个检测样品的荧光探针标记体积为1ml，本试剂盒共可以检测2000个样品。



试剂盒组份：
CFDA SE——————————————1管
CFDA SE溶剂————————————1ml/管，共两管
CFDA SE细胞标记液(10X) ——————100ml/瓶，共两瓶

注意事项：
1. CFDA SE配制成储存液后宜在一个月内使用完毕，zuì长不宜超过2个月。CFDA SE易被水解，在水溶液中会很快变质。请在使用过程中避免接触水。在标记细胞的过程中和水接触是在许可的范围内的。
2. CFDA SE溶剂在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
3. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

储存条件：-20℃，有效期6个月。

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