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产品详情

BTN3060 非冻型组织RNA保存液

  • 产品/服务:BTN3060 非冻型组织RNA保存液
  • 型 号:BTN3060
  • 品 牌:百奥莱博
  • 单 价:面议 
  • 更新日期:2023-05-06
  • 有效期至:长期有效
  • 浏览次数:797
产品简介

非冻型组织RNA保存液由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于科研目的,非冻型组织RNA保存液是我司众多优质RNA提取纯化之一,质量堪比同类进口产品,价格非常优惠,目前正热烈促销中,恭候您的咨询订购。...

产品详细介绍

特别提示:包括非冻型组织RNA保存液在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


产品名称:非冻型组织RNA保存液
英文名称:RNAhold Tissue RNA non-freezing preservation solution
产品货号:BTN3060
产品规格:250mL

本RNA保存液是一种在较高温度下保存RNA样品的非冻型溶液,它能迅速渗入细胞内,通过抑制 RNase的活性而保存RNA的完整性。

产品特点:
1. 操作简单,将组织剪薄浸没在RNA保存液中即可使其RNA不被降解。
2. 替代液氮,使样品的保存不需液氮,干冰或-80℃冰箱,尤其适用于临床和野外样品的快速和大规模采集。
3. RNA完整,因本产品能迅速抑制组织中RNA酶的活性,故从中提取的RNA的质量跟液氮保存的样品相比不相上下。
4. 方便运输,处理过的样品能在 25℃保存一周,使样品邮寄和运输变得容易和,有利学术合作和交流。
5. 反复冻融,经本产品处理的样品可反复冻融20次,其间可对样品进行各种处理而不影响zuì终提取的RNA的质量。
6. 结果准确,本产品进入细胞十分快速,基因表达在发生应急改变前就得以锁定,故RNA分析更能反映取样时的真实情况。
7.可比性强,本产品能减少大规模样品处理中的误差,增加各次实验数据间的可比性,对大规模基因表达谱的分析尤其有用。
8. 兼容性广,虽然处理过的样品可以使用动物RNA提取试剂盒和TRIzol等试剂提取其RNA,样品还可直接用于组织切片,免疫学和流式细胞分析而不影响RNA提取的质量。

储存条件:常温运输及保存,有效期二年。

使用方法:

一:用本产品保存新鲜组织样品
1. 估计完全浸没样品所需要本产品的体积(1g组织需10mL)。
2. 标记收集管并加入估计所需量的本产品。
3.以zuì快速度将样品剪切成厚度小于0.5cm的碎块。
注: 鼠肝、肾和脾等小器官样品和没有蜡质保护层的植物样品可不需剪切而直接放入本产品中保存,有蜡质保护层的植物样品需要先将蜡表皮破坏。
4. 将组织碎块完全浸没于收集管的本产品中。
5. 将收集管存放于温度适当的地方,存放时间不能超过该温度下的zuì长存放时间,如果要存放在-20℃或-80℃,需先将样品在 4℃放置过夜后再转移到zuì后的温度。注:将样品转移到-20℃或-80℃前,需要倒弃保护液。常见存放温度与其zuì长存放时间关系为如下:
保存温度 时间及效果
37℃ 一天(保存三天的样品 RNA有部分降解)
18-25℃ 一周(保存两周的样品 RNA有轻微降解)
2-8℃ 一个月
-20℃和-80℃ 长期

6.从存放处取出样品(-20℃或-80℃保存的样品需先在室温下融化),用消过毒的镊子将组织碎块从保护液中取出。
7. 立即开始RNA提取或进行其他处理(如将样品分割成更小的碎块再重新保存等)。注:样品可以反复冻融二十次而其 RNA 质量不会受到影响。

二:本产品保存培养细胞、悬浮细胞、细菌和RNA 病毒
1. 标记收集管。
2. 将待样品转移到离心管中,离心收集细胞,弃上清。注:处理含病毒的样品(如血浆)可直接从步骤第4 步开始。
3. 用冰浴的缓冲液洗一次。
4. 将细胞悬浮在少量缓冲液中。
5. 加入五到十倍体积的本产品,混均; 对病毒样品,加入两到三倍体积的本产品,混均。
6. 将收集管存放于温度适当的地方,存放时间不能超该温度下的zuì长存放时间。
如果要存放在-20℃或-80℃,需先在4℃放置过夜后再转移到zuì后温度条件(将样品转移到-20℃或-80℃前,需要倒弃保护液)。注:样品存放温度与其zuì长存放时间关系为如下:
保存温度 时间及效果
37℃ 一天(保存三天的样品 RNA 有部分降解)
18-25℃ 一周(保存两周的样品 RNA 有轻微降解)
2-8℃ 一个月
-20℃和-80℃ 长期

7. 取出样品,室温下融化(-20℃或-80℃保存的样品需先在室温下融化)。
8. 加入一倍体积的预冷的缓冲液(如PBS),用常规离心法收集细胞并用缓冲液洗一次。病毒样品可免去此步骤。
9.细胞直接用于RNA的提取或其他处理。

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名称:非冻型血液RNA保存液
货号:BTN111202
规格:100mL
由于血液富含RNase,因此血液RNA非常容易降解,是临床分子生物学研究中的一个棘手的问题。为解决此问题,本公司在非冻型组织RNA保存液的基础上,开发了本产品。

产品特点:
1. 能快速渗透到新鲜血液细胞内,抑制RNA分子的降解。保存的血液RNA常温可放置3天,4℃可放置5天,-20℃可放置3个月。
2. 操作简单,直接将本产品和新鲜血液细胞沉淀按比例混合即可。
3.适用于人新鲜血和哺乳动物新鲜血液,不适用于陈旧血液和冻凝血液,也不适用于禽类血液和其他动物血液。
4. 重复性好,效果跟进口同类产品相当。
5. 保存的样品可直接用本公司血液RNA提取试剂盒提取RNA。

储存条件:室温运输及保存,有效期两年。

使用方法:
注意:RNase污染无处不在,zuì好用本公司的固相RNase清除剂处理RNA工作区域,千万不要使用烷基化试剂DEPC(相当于芥子气)。

一:以白细胞为材料的保存方法(此法效果好于全血保存法)
1.室温1500-2000 g离心新鲜抗凝血液10-15分钟,zuì上层为血浆,zuì下层为红细胞,中间层为膜状的、含白细胞的Buffy Coat(含白细胞多的血液此层可能很厚)。
2. 吸出血浆后,小心将中间的白细胞层吸出(允许污染部分红细胞)到新的离心管中,加入5-10倍体积的本产品,混匀后放常温(不超过30℃)保存不超过3天或者放-20℃保存3月(放-20℃前需要现在4℃放置过夜,然后再离心去除保存液,zuì后再把细胞沉淀放到-20℃。如果直接放入-20℃,冰晶会刺破白细胞,释放出其中的RNA,在后续实验去掉上清时会丢失)。

二:以EDTA抗凝全血为材料的保存方法
3. 将血液取到EDTA抗凝管中后,迅速将0.5mL血液与1.5mL本产品混合,充分颠倒混匀,然后放常温(不超过30℃)保存不超过3天或者放-20℃保存3月(放-20℃前需要现在4℃放置过夜,然后再离心去除保存液,zuì后再把细胞沉淀放到-20℃。如果直接放入-20℃,冰晶会刺破白细胞,释放出其中的RNA,在后续实验去掉上清时会丢失)。

三:血液RNA的提取(本产品不含RNA提取试剂。此处以本公司的跟Trizol相当的动物RNA提取试剂盒操作步骤为参考。用户也可以使用其他RNA纯化试剂)
4. 提取RNA时,如果保存的白细胞在-20℃,则需要先室温化冻,如果保存在常温或4℃,则直接使用。
5. 取1.8mL混合液到新的2mL离心管中,5000g室温离心1分钟。
6.小心吸弃上清液(本产品),细胞将形成沉淀(如果样品时全血,沉淀中将含有大量血液蛋白)。注意:上清一般会很浑浊,一定要尽可能弃尽。有时沉淀上面有白色晶体出现,属于正常现象。
7.在细胞沉淀中加入动物RNA提取试剂盒 1mL溶液A,剧烈震荡30秒(不能感觉到震荡即可,一定要看见管底液体旋转起来,否则只是液体表面的震动,下同)。震荡后颠倒几次看溶液是否均匀,如果有颗粒状物体说明还需要震荡裂解。
8.室温放置5分钟以使细胞充分裂解。
9. 将0.2mL自备的氯fǎng加入到离心管中,剧烈震荡30秒。
10. 12000~15000g4℃离心3分钟。一般上清为无色的水相(含RNA,约0.5-0.9mL);中间层为白色,含有DNA、蛋白质和其他细胞破碎物,不要触及;下层为有机相,一般呈深红色。注意:有时水相比重大于有机相,出现反相现象,此时应该取下面的水相。
11.小心将水相转移到另一自备的1.5mL塑料离心管中。如果水相超过0.75mL,则需要分成2管,否则在下步没法加入等体积的异丙醇。
12. 加入等体积的异丙醇到水相中,充分颠倒混匀。
13. 12000~15000g4℃离心10分钟沉淀RNA。
14. 吸弃上清。注意:如果离心后出现两个相,则需要吸弃上面的一相,然后在下相(含RNA)中加入一倍体积的超纯水和一倍体积的异丙醇,混匀后12000~15000g4℃离心10分钟沉淀RNA,吸弃上清。
15. 将75% RNase-free乙醇加入到RNA沉淀中,震荡几秒后12000~15000g4℃离心1分钟。
16. 弃上清
17. 12000~15000g4℃离心半分钟,用移液枪去除残留的液体。
18. 将20-50μL DEPC处理的水加入到沉淀中并吹打溶解,立即用于下述完整性、产率和纯度的检测,也可直接用于后续RT-PCR等试验或存放于-80℃待用。

四: RNA的检测(列出步骤仅供参考,本产品不提供相关产品)
19. RNA完整性的电泳检测:强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳,因为非变性胶中单链RNA分子会自生折叠成各种形状,尤其不能使用DNA上样液,因为没有经过去RNase处理。
20. RNA产量产率测定:将5-10μl RNA用TE缓冲液(pH8.2)稀释10倍后检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度X体积)和产率(RNA产量/组织用量)。人血RNA产率一般为2-5μg/mL。
21. RNA纯度测定:无污染的总RNA的OD260/OD280一般在2.0左右(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响RT-PCR等反应。


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