SY0424 HA Tag多肽
产品简介
HA Tag多肽由北京百奥莱博供货并提供相关技术服务支持,本品用于科研目的,我公司专注于蛋白质研究产品的研发、生产和供应,为您提供的HA Tag多肽质量可靠,批间差小,且价格公道,热切盼望您选购我们的产品。...
产品详细介绍
特别提示:包括HA Tag多肽在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:HA Tag多肽
英文名称:HA Tag Peptide
产品货号:SY0424
产品规格:5mg|25mg
HA Tag多肽(HA Tag Peptide)是合成的多肽,氨基酸序列H-Tyr-Pro-Tyr-Asp-Val-Pro-Asp-Tyr-Ala-OH (YPYDVPDYA),源于流感病毒的红细胞凝集素表面抗原决定簇,与HA-tag融合蛋白中HA氨基酸序列相同,易于用Anti-HA抗体检测和ELISA检测。
在免疫分析实验中,HA Tag多肽与HA融合蛋白竞争性结合anti-HA抗体,HA Tag多肽与抗体的结合是特异性的,因此,HA Tag多肽是一种温和的、理想试剂可用于洗脱HA-tag融合蛋白。
Cas No.(Cas No.):92000-76-5
多肽序列(Amino acid sequence):H-Tyr-Pro-Tyr-Asp-Val-Pro-Asp-Tyr-Ala-OH
分子式:C53H67N9O17
分子量:1102.15
外观:白色粉末
纯度:>99%
溶解性:溶于水或1%醋酸
储存条件:-20℃,有效期1年
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货号 | 名称 | 规格 |
BTN80810 | 一站式SDS-PAGE蛋白电泳套装 | 30次 |
BTN100810 | 超快蛋白银染试剂盒 | 1000mL |
YT625 | 过硫酸铵(APS) | 10g |
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名称:强RIPA裂解液
货号:BTN131006
规格:250mL
RIPA裂解液是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等实验。本产品裂解强度较强,对膜蛋白、胞浆蛋白、核蛋白、胞浆磷酸化蛋白和各种转录因子均有很好的效果,本产品含有各种蛋白酶和磷酸蛋白酶抑制剂,能有效防止各种蛋白酶对目的蛋白的降解。我公司各种RIPA裂解液产品特点见下表:
产品名称 | RIPA裂解液(强) | RIPA裂解液(中) | RIPA裂解液(弱) |
有效裂解成分 | 1% Triton X-100,1% deoxycholate,0.1% SDS | 1% NP-40,0.5% deoxycholate,0.1% SDS | 1% NP-40,0.25% deoxycholate |
裂解强度 | 强 | 中 | 温和 |
对膜蛋白的提取 | 很好 | 较好 | 一般 |
对胞浆蛋白的提取 | 很好 | 很好 | 很好 |
对核蛋白的提取 | 很好 | 较好 | 较好 |
胞浆磷酸化蛋白提取 | 很好 | 很好 | 很好 |
细胞核转录因子提取 | 很好 | 很好 | 很好 |
含蛋白酶抑制剂 | 是 | 是 | 是 |
含磷酸酯酶抑制剂 | 是 | 是 | 是 |
主要用途 | WB,IP | WB,IP | WB,IP,co-IP |
储存条件:低温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
对于培养细胞样品:
1. 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的zuì终浓度为1mM。
2. 裂解细胞
2.1 对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。
2.2 对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g离心3~5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
注意:通常6孔板每孔细胞加入150微升裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200微升或250微升。
对于组织样品:
1. 把组织剪切成细小的碎片。
2. 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的zuì终浓度为1mM。
3. 按照每20毫克组织加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)
4. 用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g离心3~5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6. 如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
注意:RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物,随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,例如NF-kappaB、p53等时,通常不必进行超声处理,就可以检测到这些转录因子。
备注:
1.为取得zuì佳的使用效果,尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
2.裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3.用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品,建议使用BCA蛋白浓度测定试剂盒,不建议使用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
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