HR0251-x 植物线粒体提取试剂盒
本产品用简便快速的方法提取得到线粒体。适用于各种植物组织样本和培养细胞。本产品提取得到的线粒体为完整的具有生物活性的线粒体,可以用于线粒体功能研究、线粒体蛋白提取等各种下游应用。...
产品简介:
线粒体(mitochondria)是真核细胞中产生能量的重要细胞器。细胞中的能源物质—脂肪、糖、部分氨基酸在此进行最终的氧化,并通过偶联磷酸化生成ATP,供给细胞生理活动之需。对线粒体结构与功能的研究通常是在离体的线粒体上进行的。
本产品用简便快速的方法提取得到线粒体。适用于各种植物组织样本和培养细胞。
本产品提取得到的线粒体为完整的具有生物活性的线粒体,可以用于线粒体功能研究、线粒体蛋白提取等各种下游应用。
本产品采用非酶法的快速提取方法,可以在一小时内快速提取得到植物线粒体,但是回收率比酶法线粒体提取试剂盒稍低。需要酶法提取试剂盒可以联系我公司选择其他货号的试剂盒,酶法提取得到的线粒体回收率会有增加,但是耗时较长。请根据不同的需要选择试剂盒。
试剂盒以外自备试剂和仪器:
● 移液器 ● 离心机 ● 振荡器 ● 涡旋混匀器 ● Dounce匀浆器/匀浆机
● PBS ● 蛋白定量试剂盒 ● 细胞筛(100μm)
使用注意事项:
1、旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
2、实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
使用方法:
1、取新鲜植物样本叶片,洗净擦干后并去除叶梗和粗脉。1g植物组织样本用手术剪刀尽可能剪碎。
2、加入2mL提取液A后用匀浆机充分匀浆或者用Dounce匀浆器充分匀浆。
【注】:
● 培养细胞直接收集细胞后直接用Dounce匀浆器匀浆即可,匀浆后加提取液混匀后直接进行后续操作。
● 一般鲜嫩植物叶片样本,Dounce匀浆器匀浆40-50次。
● 每上下一个来回为一次。
3、将匀浆液用100μm细胞筛过滤。
【注】:
● 没有细胞筛过滤条件,可以将匀浆液稍微静置,将大块未匀浆组织自然沉降,弃沉淀,吸取匀浆液即可。
● 部分黏液较多的样本类型,不好吸取时,可以将吸头剪掉一点再吸取。
4、在2000×g力条件下离心10分钟,弃沉淀,吸取上清。
5、在3000×g力条件下离心10分钟,弃沉淀,吸取上清。
6、将上清在11000×g离心20分钟,弃上清,收集沉淀。
7、在沉淀中加入1mL提取液B,充分混匀。
8、在11000×g离心20分钟,弃上清,收集沉淀。
9、沉淀即为线粒体。
10、用试剂C或合适的其他缓冲液悬浮线粒体,置冰箱备用或直接用于下游实验。
【注】:
● 可以不用试剂C保存线粒体,根据下游实验需要用自己的缓冲液保存即可。
● 用试剂C保存线粒体后,需要重新回收线粒体可以在11000×g离心20分钟收集沉淀。
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