HR8834 冰冻切片活性氮(RNS)检测试剂盒

冰冻切片活性氮检测试剂盒是一种利用荧光探针O52进行活性氮检测的试剂盒。O52是一种细胞膜通透性的荧光探针，被活性氮特异性氧化生成绿色荧光物质，绿色荧光强度与活性氮水平成正比，检测绿色荧光就可以知道组织内活性氮的水平。在激发波长490nm，发射波长516nm附近，使用荧光显微镜/激光共聚焦检测绿色荧光，从而测定样本...

产品特点：

● 使用方便：可用荧光显微镜直接观察；

● 背景低，灵敏度高；

● 线性范围宽，使用方便。

检测方法：

● 荧光显微镜 ● 激光共聚焦显微镜

样本类型：

● 新鲜冰冻切片

试剂盒以外自备仪器和试剂耗材：

● 荧光显微镜/激光共聚焦显微镜 ● 离心机 ● 移液器 ● PBS ● HBSS（不含酚红）

使用注意事项：

● 螺旋盖微量管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。

● 尽量缩短探针标记后到测定所用的时间，以减少各种可能的误差。

● 对于某些样本，如果荧光太强，可以按照1：200-1：1000稀释探针。探针标记的时间也可以根据情况在20-60分钟内适当进行调整。

● 以下操作步骤仅供参考，请根据实际样本情况调整。

使用方法：

一、 试剂配制

1. 根据样本数，用纯水将O52活性氮荧光探针100-200倍稀释，配成染色工作液。

2. 用纯水将10×清洗液10倍稀释，配成1×清洗液工作液。

二、 探针标记

1. 准备待测的厚为10 μm 的未经固定处理的冰冻切片。

【注】:

● 必须使用新鲜组织（手术切除后1小时内）制成的冰冻切片。否则不新鲜样本可能检测不到活性氮。

2. 室温下，小心加上200μL清洗液工作液，铺满整个切片表面，静置3-5分钟。

3. 小心吸除清洗液。

4. 滴加100μL染色工作液，在37℃培养箱避光孵育20-60分钟。

【注】:

● 最好在湿盒中孵育，避免液体蒸发。

5. 移除染色液。

6. 用PBS洗涤切片2-3次。

7. 加盖玻片或甘油封片。

8. 荧光显微镜检测。

【注】:

● 染色完成后，立即进行荧光定性分析。

● 激发波长488nm，发射波长516nm。

● 荧光强，表明活性氮（RNS）含量高。

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