HR8433-1000T 细胞膜染色试剂盒(绿色荧光)-M01
荧光探针M01通常不会明显影响细胞的活力,因此被广泛用于正向或逆向的,活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂(long-term tracer)。除了最简单的细胞膜荧光标记外,还可以用于检测细胞的融合和粘附,检测发育或移植过程中细胞迁移,通过FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)检测脂在细胞膜上...
检测方法:
● 流式细胞仪 ● 荧光显微镜 ● 激光共聚焦
样本类型:
● 悬浮细胞 ● 贴壁细胞
试剂盒以外自备试剂和仪器:
● 荧光显微镜/激光共聚焦 ● 离心机 ● 移液器 ● PBS ● HBSS(无酚红)
使用注意事项:
● 螺旋盖微量管装试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体洒落。
● 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
● 标记的条件因细胞种类而异,根据不同样本的实际染色结果做相应调整,在每次实验前,请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化,确定最佳条件。以下方法及供参考。
● 染色后立即进行分析。
● 本染色液可用于细胞涂片、细胞的检测。
使用方法:
一、染色工作液的配制:
根据样本数量,用37℃培养箱预热染料稀释液试剂B将M01荧光染料10倍稀释。再用相应的无血清培养基或其他缓冲液(如HBSS、PBS等)将探针M01进行40-200倍稀释,配制成染色工作液。
【注】:
● 也可不用本盒中的试剂B,直接用相应的无血清培养基或HBSS等缓冲液稀释M01染料至所需浓度。
● 开始实验前,使用无血清培养基或HBSS缓冲液稀释染料储存液到需要的工作浓度。工作浓度应根据不同细胞的预实验结果确定的最佳工作浓度,建议至少在超过10倍范围的浓度下进行测试。一般染色终浓度400-2000倍稀释,1000-2000倍适合大多数细胞样本。
● 建议收到产品后,根据使用量,对母液进行小量分装,每次使用一管,试剂-20℃避光冻存,一年稳定。
● 工作液现配现用。
● 为了降低探针加载过度可能引起的假阳性,建议在不影响染色效果的情况下尽量使用低浓度。
● 若细胞在染色后于不含染料的培养基中孵育,荧光信号会衰减。
二、细胞染色
A:悬浮细胞染色
1、用PBS洗涤细胞2次。
【注】:
● 500×g离心5分钟。
2、加入适量体积的染色工作液重悬细胞,使其密度大约为1×106/mL。
3、在37℃孵育细胞5~20分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。可以用20分钟作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记结果。
【注】:
● 若染色不够充分,建议增加染料浓度或延长染色时间。
4、孵育结束,500×g离心5分钟。
5、倾倒上清液,再次缓慢加入37℃预热的培养液重悬细胞。
6、重复(4),(5)步骤两次以上
B:贴壁细胞染色
1、用PBS洗涤细胞2次。
2、细胞培养板中或细胞爬片上加入适量体积的染色工作液。
【注】:
● 96孔细胞培养板每孔加入100μL染色液即可。
3、37℃孵育细胞5~20分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。可以用20分钟作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记结果。
【注】:
● 若染色不够充分,建议增加染料浓度或延长染色时间。
4、吸干染色工作液,用培养液洗培养板或盖玻片2~3次,每次用预热的培养基覆盖所有细胞,孵育5~10分钟,然后吸干培养基。
三、用荧光显微镜或流式细胞仪检测
最大激发波长为488nm,最大发射波长为500nm。
如果您觉得“HR8433-1000T 细胞膜染色试剂盒(绿色荧光)-M01”描述资料不够齐全,请联系我们获取详细资料。(联系时请告诉我从仪器交易网看到的,我们将给您最大优惠!)
本页链接:http://www.yi7.com/com_bjbiolab01/sell/itemid-9425280.html
已经有772位访客查看了本页.