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产品详情

HR8623 细胞膜染色试剂DiO

  • 产品/服务:HR8623 细胞膜染色试剂DiO
  • 型 号:HR8623
  • 品 牌:百奥莱博
  • 单 价:面议 
  • 更新日期:2023-06-01
  • 有效期至:长期有效
  • 浏览次数:715
产品简介

本探针通常不会明显影响细胞的活力,因此被广泛用于正向或逆向的,活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂。除了最简单的细胞膜荧光标记外,还可以用于检测细胞的融合和粘附,检测发育或移植过程中细胞迁移,通过FRAP检测脂在细胞膜上的扩散,检测细胞毒性和标记脂蛋白等。...

产品详细介绍

使用注意事项:

● 螺旋盖微量管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体洒落。

● DIOC16(3) PERCHLORATE染色液为DMSO溶液,冬季气温较低时在室温时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解,吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。

使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。

细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。

● 标记的条件因细胞种类而异,根据不同样本的实际染色结果做相应调整,在每次实验前,请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化,确定最佳条件。以下方法仅供参考。

● 染色后立即进行分析。

● 本染色液可用于细胞涂片、细胞的检测。

使用方法:

一、染色工作液的配制:

1、根据样本数量,用37℃培养箱预热的HBSS将DIOC16(3) PERCHLORATE荧光染料400-2000倍稀释,配制成染色工作液。

【注】:

也可以直接用相应的无血清培养基或其他缓冲液稀释DIOC16(3) PERCHLORATE染料至所需浓度。

开始实验前,使用无血清培养基或HBSS缓冲液稀释染料储存液到需要的工作浓度。工作浓度应根据不同细胞的预实验结果确定的最佳工作浓度,建议至少在超过10倍范围的浓度下进行测试。一般染色终浓度400-2000倍稀释,1000-2000倍适合大多数细胞样本。

建议收到产品后,根据单次使用量,对母液进行小量分装,每次使用一管,试剂-20℃避光冻存,一年稳定。

● 工作液现配现用。

● 为了降低探针加载过度可能引起的假阳性,建议在不影响染色效果的情况下尽量使用低浓度。

● 若细胞在染色后于不含染料的培养基中孵育,荧光信号会衰减。

二、细胞染色

A:悬浮细胞染色

1、PBS洗涤细胞2次。

2、加入适量体积的染色工作液重悬细胞,使其密度大约为1×106/mL。

3、37℃孵育细胞5~20钟,不同的细胞最佳培养时间不同。可以用20分钟作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记结果。

【注】:

● 若染色不够充分,建议增加染料浓度或延长染色时间。

4、孵育结束,500×g离心5分钟。

5、倾倒上清液,再次缓慢加入37℃预热的培养液重悬细胞。

6、重复(4),(5)步骤两次以上

B:贴壁细胞染色

1、PBS洗涤细胞2次。

2、细胞培养板中或细胞爬片上加入适量体积的染色工作液。

【注】:

● 96孔细胞培养板每孔加入100μL染色液即可。

3、37℃孵育细胞5~20分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。可以用20分钟作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记结果。

【注】:

● 若染色不够充分,建议增加染料浓度或延长染色时间。

4、吸干染色工作液,用培养液洗培养板或盖玻片2~3,每次用预热的培养基覆盖所有细胞,孵育5~10分钟,然后吸干培养基。

三、用荧光显微镜或流式细胞仪检测

最大激发波长为488nm,最大发射波长为500nm。


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