HR8786-200T ROS活性氧检测试剂盒(cellRox Green)

本产品中的CellROX Green本身荧光较弱，可自由透过活细胞膜进入细胞内，并被细胞内的ROS氧化，氧化产物可掺入染色体DNA中，荧光强度增大，产生明亮的绿色荧光。根据活细胞中绿色荧光的产生，可以判断细胞ROS含量的多少和变化。...

产品特点：

● 使用方便：可用激光共聚焦显微镜直接观察、荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式细胞仪检测；

● 背景低，灵敏度高；

● 线性范围宽，使用方便。

检测方法：

● 流式细胞仪 ● 荧光显微镜 ● 激光共聚焦 ● 荧光酶标仪 ● 荧光光度计

样本类型：

● 悬浮细胞 ● 贴壁细胞

使用方法：

CellROX Green探针配制：

根据需要用量，用新鲜无酚红无血清培养基或HBSS稀释CellROX Green探针后充分混匀，避光保存备用。

2、探针使用终浓度200-1000倍稀释。一般预实验起始浓度按500倍即可。

【注】：

● 不能用含有血清的培养基稀释探针。

● 也可以用HBSS缓冲液或PBS稀释探针。

● 如果荧光太强，超过仪器的检测范围，可以按照1:1000-5000稀释探针。

CellROX Green探针标记：

1、CellROX Green溶液可在新鲜无血清培养基、HBSS缓冲液或组织灌流液中稀释到所需浓度，终浓度200-1000倍稀释，以此染色液更换细胞培养基或灌流液；也可直接向无血清细胞孵育液体或灌流液中加入CellROX Green探针溶液至所需浓度。

【注】：

● 检测贴壁细胞时，荧光显微镜检测可以原位染色也可以消化下来后染色，流式检测消化下来后染色。

2、依据细胞ROS含量的不同，CellROX Green终浓度可选择在200-1000倍稀释的范围，孵育时间可选择30分钟-4小时，在37℃或室温进行避光孵育。

【注】：

● 如果荧光太强，超过仪器的检测范围，可以按照1:1000-5000稀释探针。

3、孵育结束后，用PBS等新鲜缓冲液清洗细胞或组织。漂洗时间要短。

【注】：

● 也可以用HBSS/PBS洗涤细胞。

荧光显微镜观察：

1、对贴壁生长细胞或活组织，可直接在荧光显微镜下观察；对悬浮生长细胞，取25-50μL细胞悬液滴到一张显微载玻片上，再盖上一张盖玻片。

2、荧光显微镜下观察。

流式细胞仪分析：

1、染色并洗涤细胞后用0.5～1 mL冷PBS重悬细胞（5～10万）。

2、采用488nm波长激发，发射波长520 nm，测定待测细胞平均荧光强度。

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