HR9079-100T 组织活性氧检测试剂盒(DCFHDA)

活性氧(Reactive oxygen species, ROS) 包括超氧自由基、过氧化氢、及其下游产物过氧化物和羟化物等，参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程。组织活性氧检测试剂盒是一种利用荧光探针DCFHDA进行组织活性氧检测的试剂盒。本试剂盒中的DCFHDA ROS探针为绿色荧光的活性氧探针，具有488/520nm的最大激...

产品特点：

● 使用方便：可用荧光分光光度计、荧光酶标仪检测；

● 背景低，灵敏度高；

● 线性范围宽，使用方便。

检测方法：

● 荧光分光光度计 ● 荧光酶标仪

样本类型：

● 新鲜组织 ● 冻存组织

使用方法：

试剂准备：

根据样本数量，用纯水将DCFHDA探针10倍稀释。充分混匀，备用。

【注】：

● 不可以一次性将探针全部稀释。

● 现配现用。

样本处理：

1、刚取得的新鲜组织样本用PBS洗净。

2、准确称取50-100mg组织，加入1mL匀浆缓冲液A，用匀浆器/匀浆机充分匀浆。

3、在100×g，4℃离心3分钟，弃沉淀，取上清。

样本检测：

1、在96孔板中加入190μL匀浆上清液、10μL DCFHDA探针，用移液器吹打，使之充分混匀。

2、在37℃避光孵育30分钟。

3、置于荧光酶标仪中，后于激发波长为488nm、发射波长530nm检测荧光强度。

【注】：

● 或使用荧光分光光度计等其他荧光检测设备。

● 必须使用荧光检测专用的黑色96孔板。

● 如荧光强度太强，超过了仪器的检测范围，可将孵育后的匀浆上清液稀释后再检测。一般稀释5-50倍。

蛋白定量：

1、另取50μL上清匀浆液，用PBS大约稀释30倍。

2、取100μL进行蛋白定量。

结果处理：

以荧光强度（RFU）/蛋白浓度（毫克蛋白）表示组织活性氧强度。

【注】：

● 数据与蛋白浓度的单位无关。

● 此处以蛋白浓度数据作为校正系数，对不同样品进行均一化处理。

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