HR8824-200T 冰冻切片活性氧(ROS)检测试剂盒(O12)

冰冻切片活性氧检测试剂盒是一种利用荧光探针O12进行活性氧检测的试剂盒。O12本身没有荧光,被活性氧特异性氧化生成绿色荧光物质,绿色荧光强度与活性氧水平成正比,检测绿色荧光就可以知道组织内活性氧的水平。在激发波长500nm,发射波长525 nm附近,使用荧光显微镜/激光共聚焦检测绿色荧光,从而测定组织内活性氧水平。...

产品特点：

● 使用方便：可用荧光显微镜直接观察；

● 背景低,灵敏度高；

● 线性范围宽,使用方便。

检测方法：

● 荧光显微镜 ● 激光共聚焦显微镜

样本类型：

● 新鲜冰冻切片

试剂盒以外自备仪器和试剂耗材：

● 荧光显微镜/激光共聚焦显微镜,激发波长488-535nm,发射波长525±15nm。

● 离心机 ● 移液器 ● PBS或者HBSS（无酚红)

使用注意事项：

● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体洒落。

● 尽量缩短探针标记后到测定所用的时间,以减少各种可能的误差。

● 对于某些样本,如果荧光太强,可以按照1:200-1:1000稀释探针。探针标记的时间也可以根据情况在20-60分钟内适当进行调整。

● 以下操作步骤仅供参考,请根据实际样本情况调整。

使用方法：

一、 试剂配制

1、根据样本数,用纯水将O12活性氧荧光探针200倍稀释,配成染色工作液。

2、用纯水将10×清洗液10倍稀释,配成1×清洗液工作液。

二、探针标记

1、准备待测的厚为10μm的未经固定处理的冰冻切片。

【注】:

● 建议使用新鲜组织（手术切除后1小时内)制成的冰冻切片。

2、室温下,小心加上200μL清洗液工作液,铺满整个切片表面,静置5-10分钟。

3、小心吸除清洗液。

4、滴加100μL染色工作液,在37℃培养箱避光孵育20-60分钟。

【注】:

● 最好在湿盒中孵育,避免液体蒸发。

5、移除染色液。

6、用PBS洗涤切片2-3次。

7、加盖玻片或甘油封片。

8、荧光显微镜检测。

【注】:

● 染色完成后,立即进行荧光定性分析。

● 激发波长488nm,发射波长525nm。

● 荧光增强,表明活性氧（ROS)含量高。

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