HR0344-50T BCIP/NBT碱性磷酸酯酶显色试剂盒
BCIP/NBT 碱性磷酸酯酶显色试剂盒是一种用于免疫组化显色、Western等膜显色和诱导多功能干细胞iPS 鉴定等的试剂盒。BCIP/NBT 是碱性磷酸酯酶的常用底物。在碱性磷酸酯酶的催化下,BCIP会被水解产生强反应性的产物,该产物会和NBT 发生反应,形成不溶性的深蓝色至蓝紫色的NBT-formazan。...
使用方法:
1、对于组织切片或细胞样品或膜,在与碱性磷酸酯酶标记的抗体或其它形式的探针孵育后,用适当洗涤液洗涤3-5 次,每次3-5分钟。对于检测内源性碱性磷酸酯酶的组织或细胞样品,在适当固定后,也用适当洗涤液洗涤3-5 次,每次3-5分钟。
2、按照如下比例依次加入各溶液,混匀后即配制成BCIP/NBT 染色工作液:
碱性磷酸酯酶显色缓冲液 |
3mL |
10mL |
BCIP溶液 |
10μL |
33μL |
NBT溶液 |
20μL |
66μL |
工作液 |
3.03mL |
10.1mL |
3、最后一次洗涤完毕后,去除洗涤液,加入适量BCIP/NBT 染色工作液,确保能充分覆盖样品。
4、室温避光孵育5-30分钟或更长时间(可长达24小时),直至显色至预期深浅。
5、去除BCIP/NBT染色工作液,用蒸馏水洗涤1-2 次即可终止显色反应。
6、对于组织切片或细胞样品,显色反应终止后,如有必要可以用中性红染色液染色,以便于观察。对于膜,显色反应终止后,可以室温晾干避光保存。
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