HR0340-250T 增强型ECL化学发光检测试剂盒
免疫印迹最重要也是最后一步就是酶与底物反应进行检测,本试剂盒以化学荧光发光方法检测蛋白质或核酸类生物大分子。其原理是,蛋白质或核酸在电泳后转移到印迹膜上,以一抗及辣根过氧化物酶HRP标记的二抗结合膜上的目的蛋白,或以HRP标记的探针直接或间接结合膜上的核酸。洗膜后用本产品配制的ECL工作液,在可见光下室温孵...
产品特点:
● 高灵敏度
● 低背景
试剂盒以外自备试剂和仪器
● 移液器 ● 双蒸水
注意事项:
● ECL工作液配制过程中吸取试剂A和试剂B时务必跟换吸头,工作液新鲜配制后立即使用,放置过久会影响灵敏度。
● 根据蛋白丰度不同曝光时间可能是数秒至数小时。
● 曝光时间过长会使背景加深,曝光不足会导致条带模糊。
● 如果曝光后条带不佳,可用洗膜缓冲液洗膜,重新孵育二抗,然后重新用ECL发光和曝光。
● 应使用高质量保鲜膜。
使用方法:
1、使用合适的方法进行Western,直至用PBST洗涤二抗。
2、新鲜配制ECL工作液:试剂A和试剂B按1:1混合后, 用双蒸水10倍稀释,混合后即为ECL工作液。须立即使用!
3、印迹膜蛋白面朝上,用ECL工作液均匀滴加至印迹膜室温孵育1-2分钟。ECL工作液使用量大约为0.125mL/cm2膜或根据个人实验习惯使用。
4、用平头镊夹住印迹膜,垂直置于吸水纸以吸去多余工作液。
5、快速将印迹膜置于二层保鲜膜之间,尽量赶尽气泡。
6、将印迹膜蛋白面朝上,放于X光胶片暗盒内。在暗室内放入X光片,曝光,显影。
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