关于无菌检查隔离器,您想知道的也许在这里
发布时间：2019-07-19浏览次数：2654返回列表
无菌检查隔离器目前市场zui常见的有两种材质的隔离器，一种是以不锈钢、钢化玻璃为主要材料的“硬舱体”隔离器；另一种是PVC膜为舱体结构的“软舱体”隔离器。
一、环境检测
隔离器中应对沉降菌，浮游菌和关键表面的微生物进行检测。环境微生物检测应该在SOP中明确以下问题：
浮游菌采样量，以及采样；
沉降菌的采样位置，每块培养皿的暴露时间；
表面微生物取样位置确定，在测试过程中取样，还是在测试结束后取样。用接触碟取样还是用拭子进行取样；
建立微生物的警告限和行动限，以及采取的措施和原因结果的排查；
对表面取样后，接触过培养基的表面如何处理。
对于隔离器上的管道，废液管道、环境监测系统管道的微生物控制需要建立。
二、气流形式
虽然法规中没有明确要求无菌检查隔离器中气流的要求，单向流隔离器能维持动态下的A级，进一步提高无菌检查工艺操作的可靠性，避免假阳性的产生。相对于紊流设计，单向流隔离器气流均匀分布，灭菌气体分布扩散均匀。另，在排残过程中，汽化过氧化氢残留浓度相对紊流设计隔离器为均一稳定，便于测试，具代表性。
当选用紊流隔离器时，应测试隔离器的换气次数和自净时间，一方面确保设备在使用前能以较快的速度达到静态下的A级，另一方面保证汽化过氧化氢的在灭菌后的通风效果满足要求。
不同的进排风口位置，不同的风量大小/换气次数，都会影响内部气流。因此对紊流隔离器需要进行气流流型测试来确认气流死角。这些气流死角可能并不会对灭菌效果产生影响，但是对隔离器使用过程中微生物的控制产生盲区。
三、常见问题解答
1、软、硬舱体如何选择？
答：在无菌制剂生产或无菌检查的应用中，推荐用不锈钢、钢化玻璃作为隔离器的结构材料，这个基本已经没有什么悬念了。
上zui早的隔离器是用PVC做的，在使用过程中有诸多问题。现在除了部分无菌检查隔离器还有用软舱体，其他无菌制剂生产基本不再使用PVC。PVC软舱的主要缺点在于吸附过氧化氢，易老化变色，强度较低，易破损，只能是紊流设计。
2、隔离的密封测试和手套检漏是怎么做，有依据吗？
答：隔离器和手套泄漏测试通常使用压力变化法（Pressurechange）或者压力衰减法（Pressure drop）。
具体测试方法，隔离器的泄漏可参考PDA TR34 附件C，手套检漏可参考ISO14644-7的E.5 Examples of glove leak tests。
3、cRABS和隔离器有何不同，为什么cRABS要求的背景级别一般为B，而EUGMP对隔离器要求的zui低级别为C？
答：RABS指限制进出隔离系统，有开放式的oRABS，也有封闭式的cRABS。没有哪个指南或法规上规定cRABS和Isolator 应该有哪些不同，只是我们从认识上设计的基本原理是类似的，关键看他们如何应用。
一般Isolator 在生产过程中是不允许打开的，一旦开门，整个生产就停止了。所以它可以被放置于背景级别较低的C级（美国FDA较常见）或D级（欧洲较常见）。
使用Isolator的一个重要前提是全自动的、低故障率、少人工干预的生产线。举个例子，与Isolator集成的灌装机在生产过程中总是出现故障，倒瓶、碎瓶等。操作人员总是需要打开隔离器去清理和维护，那么就无法进行正常的生产，这对药企来说简直就是灾难。所以用户可以将背景级别提升到B级，在必要的时候开门对隔离器内部进行干预，这样关上门就可以继续生产了。当然，无论是cRABS还是oRABS，开门都是风险，是需要进行风险评估和验证的，并且在SOP中要说明这种干预的正确处理方式，并且应该形成相关的干预记录。
cRABS和Isolator需要如何进行设计，并不是说cRABS和Isolator有多少差异，关键看生产工艺的需要。
4、H2O2浓度探头校准目前如何送检，校准周期要多久比较合适？
答：过氧化氢浓度探头是属于电化学传感器，根据不同的使用频率，精度会下降。一般定期可以联系供应商进行对传感器的校准或者标定，部分第三方校验机构也能对传感器进行检定。但是一般1~2年需要换传感器。
5、手套为什么一定要这么大？有没有使用手套的小技巧呢？
答：隔离器的手套怎么选择，先是和我们隔离器内需要操作的工艺有关。如果是无菌制剂的生产线，那么手套需要完成的操作是很简单的，非精细化的操作；而无菌检查相对操作就比较复杂和精细，使用手套也加频繁了。同时QC做无菌检查的多为女士，因此大家总会认为隔离器的手套偏大、偏硬。
隔离器的手套不仅要适应操作人员的要求，同时也要保证材质对灭菌介质的耐受，对频繁使用操作的耐磨损，还要保证对微生物具有有效的隔离作用。因此材料一般为CSM（以前叫海普隆），厚度一般在0.38mm（不分左右手）。势必在手感上不能和传统的乳胶手套相比。
正确使用隔离器手套：
di一步，我们应该从心理上接受新的技术和设备，转变原有的操作习惯。
第二，我们应该识别与隔离器手套的相关的风险。比如，隔离器中手套不能随意接触工艺中不必要的表面，任何多余的接触都将是增加污染的风险。可利用工具进行一些无菌操作。避免手套去做力度较大的操作。隔离器手套不能直接接触无菌产品包装和相关核心的部位。法规上有提出戴第二层手套。穿脱手套时动作应当缓慢，避免对隔离器造成剧烈甚至是负压的压力波动。改善和优化物料在隔离器内部的摆放位置，减少手套在隔离器内部的动作。
一、环境检测
隔离器中应对沉降菌，浮游菌和关键表面的微生物进行检测。环境微生物检测应该在SOP中明确以下问题：
浮游菌采样量，以及采样；
沉降菌的采样位置，每块培养皿的暴露时间；
表面微生物取样位置确定，在测试过程中取样，还是在测试结束后取样。用接触碟取样还是用拭子进行取样；
建立微生物的警告限和行动限，以及采取的措施和原因结果的排查；
对表面取样后，接触过培养基的表面如何处理。
对于隔离器上的管道，废液管道、环境监测系统管道的微生物控制需要建立。
二、气流形式
虽然法规中没有明确要求无菌检查隔离器中气流的要求，单向流隔离器能维持动态下的A级，进一步提高无菌检查工艺操作的可靠性，避免假阳性的产生。相对于紊流设计，单向流隔离器气流均匀分布，灭菌气体分布扩散均匀。另，在排残过程中，汽化过氧化氢残留浓度相对紊流设计隔离器为均一稳定，便于测试，具代表性。
当选用紊流隔离器时，应测试隔离器的换气次数和自净时间，一方面确保设备在使用前能以较快的速度达到静态下的A级，另一方面保证汽化过氧化氢的在灭菌后的通风效果满足要求。
不同的进排风口位置，不同的风量大小/换气次数，都会影响内部气流。因此对紊流隔离器需要进行气流流型测试来确认气流死角。这些气流死角可能并不会对灭菌效果产生影响，但是对隔离器使用过程中微生物的控制产生盲区。
三、常见问题解答
1、软、硬舱体如何选择？
答：在无菌制剂生产或无菌检查的应用中，推荐用不锈钢、钢化玻璃作为隔离器的结构材料，这个基本已经没有什么悬念了。
上zui早的隔离器是用PVC做的，在使用过程中有诸多问题。现在除了部分无菌检查隔离器还有用软舱体，其他无菌制剂生产基本不再使用PVC。PVC软舱的主要缺点在于吸附过氧化氢，易老化变色，强度较低，易破损，只能是紊流设计。
2、隔离的密封测试和手套检漏是怎么做，有依据吗？
答：隔离器和手套泄漏测试通常使用压力变化法（Pressurechange）或者压力衰减法（Pressure drop）。
具体测试方法，隔离器的泄漏可参考PDA TR34 附件C，手套检漏可参考ISO14644-7的E.5 Examples of glove leak tests。
3、cRABS和隔离器有何不同，为什么cRABS要求的背景级别一般为B，而EUGMP对隔离器要求的zui低级别为C？
答：RABS指限制进出隔离系统，有开放式的oRABS，也有封闭式的cRABS。没有哪个指南或法规上规定cRABS和Isolator 应该有哪些不同，只是我们从认识上设计的基本原理是类似的，关键看他们如何应用。
一般Isolator 在生产过程中是不允许打开的，一旦开门，整个生产就停止了。所以它可以被放置于背景级别较低的C级（美国FDA较常见）或D级（欧洲较常见）。
使用Isolator的一个重要前提是全自动的、低故障率、少人工干预的生产线。举个例子，与Isolator集成的灌装机在生产过程中总是出现故障，倒瓶、碎瓶等。操作人员总是需要打开隔离器去清理和维护，那么就无法进行正常的生产，这对药企来说简直就是灾难。所以用户可以将背景级别提升到B级，在必要的时候开门对隔离器内部进行干预，这样关上门就可以继续生产了。当然，无论是cRABS还是oRABS，开门都是风险，是需要进行风险评估和验证的，并且在SOP中要说明这种干预的正确处理方式，并且应该形成相关的干预记录。
cRABS和Isolator需要如何进行设计，并不是说cRABS和Isolator有多少差异，关键看生产工艺的需要。
4、H2O2浓度探头校准目前如何送检，校准周期要多久比较合适？
答：过氧化氢浓度探头是属于电化学传感器，根据不同的使用频率，精度会下降。一般定期可以联系供应商进行对传感器的校准或者标定，部分第三方校验机构也能对传感器进行检定。但是一般1~2年需要换传感器。
5、手套为什么一定要这么大？有没有使用手套的小技巧呢？
答：隔离器的手套怎么选择，先是和我们隔离器内需要操作的工艺有关。如果是无菌制剂的生产线，那么手套需要完成的操作是很简单的，非精细化的操作；而无菌检查相对操作就比较复杂和精细，使用手套也加频繁了。同时QC做无菌检查的多为女士，因此大家总会认为隔离器的手套偏大、偏硬。
隔离器的手套不仅要适应操作人员的要求，同时也要保证材质对灭菌介质的耐受，对频繁使用操作的耐磨损，还要保证对微生物具有有效的隔离作用。因此材料一般为CSM（以前叫海普隆），厚度一般在0.38mm（不分左右手）。势必在手感上不能和传统的乳胶手套相比。
正确使用隔离器手套：
di一步，我们应该从心理上接受新的技术和设备，转变原有的操作习惯。
第二，我们应该识别与隔离器手套的相关的风险。比如，隔离器中手套不能随意接触工艺中不必要的表面，任何多余的接触都将是增加污染的风险。可利用工具进行一些无菌操作。避免手套去做力度较大的操作。隔离器手套不能直接接触无菌产品包装和相关核心的部位。法规上有提出戴第二层手套。穿脱手套时动作应当缓慢，避免对隔离器造成剧烈甚至是负压的压力波动。改善和优化物料在隔离器内部的摆放位置，减少手套在隔离器内部的动作。
第三，做好支持性文件，对操作人员进行培训。对每一个部件的操作都需要在SOP中进行描述，并培训操作人员如何正确操作以及日程检查。
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