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薄层色谱扫描仪的操作方法

发布时间:2017-09-12浏览次数:4364返回列表

薄层色谱扫描仪应用范围非常广泛,薄层色谱(TLC)是色谱技术的种:将固定相涂布于玻璃板上或铝板上,成均匀薄层,样品中各组分随流动相在薄层中定向移动,不同组分和固定性/流动相的作用力不同而实现了分离。薄层色谱(TLC)是种非常有用的跟踪反应的手段,还可以用于柱色谱分离中合适溶剂的选择。薄层色谱常用的固定相有氧化铝或硅胶,它们是性很大(标准)或者是非性的(反相)。流动相则是种性待选的溶剂。在5.301中以及大多数实验室实验中,都将使用标准硅胶板。将溶液中的反应混合物点在薄板上,然后利用毛细作用使溶剂(或混合溶剂)沿板向上移动行展开。下面,我们来介绍下本仪器的操作方法,给大家做个参考。

薄层色谱扫描仪的操作方法如下:
、向方向研磨混合,去除表面的气泡后,倒入涂布器中,在玻板上平稳地移动涂布器行涂布(厚度为0.2~0.3mm),取下涂好薄层的玻板,置水平台上于室温下晾干,后在110℃烘30分钟,即置有干燥剂的干燥箱中备用。使用前检查其均匀度(可通过透射光和反射光检视)。 

二、点样。除另有规定外,用点样器点样于薄层板上,般为圆点,点样基线距底边2.0cm,样点直径及点间距离同纸色谱法,点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜。点样时必须注意勿损伤薄层表面。

三、展开。展开室如需预用展开剂饱和,可在室中加入足够量的展开剂,并在壁上贴二条与室样、宽的滤纸条,端浸入展开剂中,密封室的盖,使系统平衡或按正文规定操作。 将点好样品的薄层板放入展开室的展开剂中,浸入展开剂的深度为距薄层板底边0.5~1.0cm(切勿将样点浸入展开剂中),密封室盖,待展开至规定距离(般为10~15cm),取出薄层板,晾干,按各品种项下的规定检测。 

四、如需用薄层色谱扫描仪对色谱斑点作扫描检出,或直接在薄层上对色谱斑点作扫描定量,则可用薄层扫描法。 薄层扫描的方法,除另有规定外,可根据各种薄层扫描仪的结构点及使用说明,结合具体情况,选择吸收法或荧光法,用双波长或单波长扫描。由于影响薄层扫描结果的因素很多,故应在保证供试品的斑点在定浓度范围内呈线性的情况下,将供试品与对照品在同块薄层上展开后扫描,行并计算定量,以减少误差。各种供试品,只有得到分离度和重现性好的薄层色谱,才能获得满意的结果。