豚鼠前心钠肽(Pro-ANP)试剂盒

对于ELISA实验中常见问题及解决方法收集标本前必须清楚要检测的成份是否

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对于ELISA实验中常见问题及解决方法

 

收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本，储存在 4 ℃ 备用，如有特殊 原因需要周期收集标本，
将标本及时分装后放在 -20 ℃ 或 -70 ℃ 条件下保存。避免反复冻融。标本 2 -8 ℃ 可保存 48 小时， -20 ℃ 可保存 1 个月。 -70 度可保存 6 个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。

1、 液体类标本：
标本必须为液体，不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。 1ml 的 全血可得到 0.5ml 的血清
或血浆。每个标本量收集体积＝ 100ul × 检测种类。取材前须向销售人员索要说明书。

2、 血清：
室温血液自然凝固 10-20 分钟后，离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。

◇ 血浆：
应根据试剂盒的要求选择 EDTA 、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，加入 10 ％( v/v )抗凝剂 ( 0.1M 柠檬酸钠或 1% heparin 或 2.0%EDTA.Na2) 混合
10-20 分钟后，离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集上清。如有沉淀形 成，应再次离心。

◇ 尿液、胸腹水、脑脊液：
用无菌管收集。离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。

◇ 细胞培养上清：
检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集上清。检测细胞内的 成份时，用 PBS ( PH7.2
-7.4 )稀 释细胞悬液，细胞浓度达到 100 万 /ml 左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

◇ 组织标本：
切割标本后，称取重量。加入一定量的 PBS ，缓冲液中可加入 1 μ g/L 蛋白酶抑制剂或 50U/ml 的 Aprotinin ( 抑肽酶)。用手工或匀浆
器将标本匀浆充分。离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集上清置于 -20 度或 - 70 度保存，如有必要，可以将样品浓缩干燥。 分装后一份待检测，其余冷冻备用。

 

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