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李斯特氏菌显色培养基操作步骤

发布时间:2018-03-13浏览次数:1766返回列表

    上海樊克生物科技有限公司,由具有行业背景和丰富市场经验的专业人士组成,致力于为生命科学研究领域提供优质产品,为广大科研工作者提供优质服务。既能满足研发类客户对产品种类、包装、纯度的特殊要求,也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求

    产品名称:李斯特氏菌显色培养基

    规格:BR10ml

    包装:20支/盒

    用途:用于李斯特氏菌的显色培养,单增李斯特氏菌显蓝色,外围有一不透明环

    温馨提示:仅供科研实验,不得用于其它用途!欢迎来电咨询。

    配方:(g/L)

    营养物质 70.0

    显色剂 1.0

    pH 7.2 ± 0.2 25 ℃

    李斯特氏菌添加剂 6.0g

    此配方可以进行改良或增加营养成份以获得佳的结果。




    称取基础培养基 14.2g 加入 180ml 蒸馏水,加热溶解并不停搅拌;另取 1.2g 李斯特氏菌添加剂,加入 20ml 无菌水,并加入一些玻璃球,不停振动,使其乳化均匀,将二者分别于 121 ℃高压灭菌 15 min 。冷至 50 ℃左右时,把李斯特氏菌添加剂加入基础培养基中,并加入李斯特氏菌抑菌剂 1 和 2 各 1 支,混匀,倾入无菌平皿。使培养基的厚度约为 5mm ,这样有利观察不透明环。

    贮存:制备好的固体平板保存于 2-8 ℃,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度 2-8 ℃

    失效:干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。

    操作步骤:

    使用前,把制备好的培养基放置室温 10-20 分钟。

    1 、按 SN 标准、 GB 标准、 FDA 标准、 ISO 标准或其它标准制备样品液;

    2 、把 25g 样品液加入 225mlEB 增菌液中 30 ℃培养 48 小时;或把样品液和 Half-Fraser 增菌液按照 1 : 10 的比例混匀, 30 ℃培养 24 小时。

    3 、取一环增菌液划线接种到李斯特氏菌显色培养基上, 37 ℃培养 24-48 小时。

    质量控制:

    1 、外观:此干燥培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈淡黄色。制备好的平板呈不透明乳白色培养基。

    2 、微生物试验:在 37 ℃培养 24-48 小时

    典型特征:

    单增李斯特氏菌 37 ℃培养 24-28 小时, 平板上出现蓝色菌落,菌落周围有一不透明环。绵羊李斯特氏菌 37 ℃培养 48 小时 ,平板上出现蓝色菌落,菌落周围有一不透明环。西尔李斯特氏菌 37 ℃培养 24-48 小时, 平板上出现蓝色菌落,菌落周围没有不透明环。在食品检测中绵羊李斯特氏菌非常少见。

    培养基pH 的初步调整:

    培养基各成分完全溶解后,应进行pH 的初步调正,因培养基在加热消毒过程中、pH 会有所变化,例如,牛肉浸液约可降低pH0.2.而肠浸液pH 却会有显着的升高。因此,对这个步骤,操作者应随时注意探索经验、以期能掌握培养基的终pH ,保证培养基的质量。pH 调正后,还应将培养基煮沸数分钟,以利培养基沉淀物的析出。

    培养基的分类:

    (1)合成培养基。合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚,组成成分,重复性强,但价格较贵,而且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏(Czapek)培养基等。

    (2)天然培养基。由天然物质制成,如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤,前者用于培养霉菌,后者用于培养细菌。这类培养基的化学成分很不恒定,也难以确定,但配制方便,营养丰富,所以常被采用。

    (3)半合成培养基。在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类,或在合成培养基的基础上添加某些天然成分,如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。