ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在科研上得到了广泛的使用，但操作中的各个环节对试验的检测作用影响较大，人ELISA试剂盒如不留意，有或许导致显色不全、花板等结果。

一.下面将操作中各个环节常出现问题解决办法总结于下：

1.挑选试剂： 挑选质量优良的检测试剂，严厉按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。

2.标本收集与保存： 防止使用肉眼可见的溶血标本、高脂标本和混浊标本；2-8℃下，标本可放置24-48小时，长时间保存需放置-20℃下。请防止重复冻融。

二.人ELISA试剂盒具体请参照：

1.试剂使用中的预备工作及留意事项

2.试剂盒中会有提示，一般需要预备的有： 洗涤液；用前制造；有的试剂盒会标明，配好的4度下一般可以放一个月；假如没有标明，尽量用新鲜的，不要多制造。显色液（有A液和B液的），用前15分钟制造

3.规范品：有的试剂盒中规范品是现已制造好的，4度保存；有的是要现制造的；按照说明书操作,浓缩生物素结合的二抗和HRP：假如需要制造，试剂盒没注明配好可以保存多久的话，尽量现配现用（用前15分钟制造）

4.原则是：试剂盒上没有指出制造物的贮藏方法的话，应该现配现用；不要怕麻烦；还有小瓶的管子开盖前要离心，以免盖子上粘连今后总量不行

5.加 样：室温温育的试剂，特别是温育时间比较短的试验操作的试剂，加样对数据的影响比较大，特别要留意加样问题

三.欠好的操作原因：

1.不会正确使用加样器

2.血清或血浆标本分离欠好即进行加样

3.人ELISA试剂盒手工操作中，加样板过多形成加样後放入孵箱前等待时间过长（特别是室内温度较高时）

4.加完标本再加酶试剂时酶溅起孔外