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质粒小量提取试剂盒常见问题与解析
发布时间:2020-10-30浏览次数:1232返回列表
质粒小量提取试剂盒常见从1~4mL菌液可以抽提到5~30?g的质粒,纯度高,OD260/OD280比值一般为1.8-2.0之间,质粒可直接用于PCR、酶切、转化测序和体外转录等后续实验。那么在实验过程中常见问题有哪些,下面跟小编一起来看一下。
质粒得率低可能原因及解决办法:
1、菌体未活化,生长效率低,菌量少。需要活化菌种。
2、属于低拷贝质粒,增加菌液的量。
3、SolutionB裂解不充分,室温静置5min。
4、zui后洗脱体积不够,洗脱液不少于50?L。
质粒纯度差可能原因:
1、SolutionA未加入RNaseA或加入RNaseA的SolutionA 未4℃保存。
2、加入SolutionB剧烈震荡,使得基因组断裂。
3、加入BufferN操作慢,形成微小沉淀,蛋白质无法被充分漂洗干净。
4、BufferW2未加入无水乙醇。
5、OD260/OD280比值一般在1.8-2.0之间,小于1.8可能有蛋白污染,大于2.0有部分降解或RNA污染。
公司所售elisa试剂盒总体优势:
快速简便——说明书详细,试剂完整,操作方便;
精-确度高——板间(inter)及板内(intra)差异性(cv)小;
重复性好——批次间的一致性高;
批内精-密度(测定法精-密内):cv%<8%
间精-密度(精-密检测间):cv%<10%
特异性强——我们选择zui佳抗体-抗原配对;
结果可靠——每个产品都经过仔细筛选、严格检验、质量高、实验结果可信;
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