【古朵生物】活性蛋白提取试剂盒的应用

  活性蛋白提取试剂盒用于从动物组织中提取有活性的总蛋白，该试剂由一种温和的非离子型去污试剂、缓冲试剂和氯化钠等组成。采用匀浆或超声破碎时，该试剂高效提取的蛋白质可以尽可能地保持活性，可以用于1D和2D电泳、免疫共沉淀、Pull down、EMSA、报告基因分析（Luciferase、β-galactosidase、Chloramphenicol Acetyltransferase等）、蛋白质激酶分析（PKA、PKC、Tyrosine Kinase等）、酶免分析（Western Blot、ELISA、RIA）、蛋白质纯化等实验，含有的去污试剂可通过透析去除。

  活性蛋白提取试剂盒由抽提试剂、蛋白酶抑制剂混合物、DTT和PMSF组成。

  活性蛋白提取试剂盒特点：

  整个实验过程只需要20 min左右；

  可以处理20×100 mg的动物组织样品；

  提取的蛋白质可以透析去除离子和去污试剂，或将缓冲液替换为所需要的合适缓冲液；

  提取的活性蛋白质保持非变性状态，可以直接用于1D和2D电泳、Pull Down、EMSA、免疫共沉淀、蛋白纯化、酶活分析等实验；

  可以维持报告基因酶（Luciferase、β-galactosidase、Chloramphenicol Acetyltransferase等）、蛋白质激酶（PKA、PKC、Tyrosine Kinase等）的活性。

  活性蛋白提取试剂盒操作步骤：

  1.将100 mg组织剪切成小块，尽量去除脂肪组织和结缔组织等非目的组织，加入适量的预冷的1X PBS于4°C，700 g（3000rpm）离心3 min，弃掉上清，重复洗涤两次。

  2.向以上洗涤后的组织中加入1 mL预冷的抽提试剂（使用前向每1 mL抽提试剂中加入1μl DTT，10μl PMSF，1μl蛋白酶抑制剂），置玻璃匀浆器冰上均质30~50次至组织完全成匀质状液体无明显组织小块。

  3.大速度涡旋振荡10 sec，冰上放置20 min，期间取出振荡3~5次，再于4°C，12830g（12000 rpm）离

  心10 min以沉淀组织或细胞碎片，转移上清为组织活性总蛋白部分，分装并保存于-80°C，用于下游实验。

  活性蛋白提取试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨；牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量”的方针