【古朵生物】Elisa实验中血清的采集及注意事项

  ELISA试剂盒实验中，对于采集血清经常碰到很多问题：

  1、标本采集后什么时候开始离心，有说采集半小时后离心的，还有说采集全血后在4℃过夜，再离心，如果采集后7-8小时再离心可以吗?

  2、离心时多少转、离心几分钟比较合适

  血清标本可按常规方法采集，应注意避免溶血，红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质，以HRP 为标记的ELISA 测定中，溶血标本可能会增加非特异性显色。血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应。一般说来，在5 天内测定的血清标本可放置于4℃，标本在冰箱中保存时间过长导致血清IgG 聚合，使间接法的试剂本底加深。超过一周测定的需-20℃保存。冻结血清融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀并避免产生气泡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤，澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落，所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测，宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作，也可加入适当防腐剂。

  实验中，标本离心越早越好，但多数标本要30分钟后才凝集完毕，离心时间在2小时内完成，(尤其生化)时间太长血液中的细胞成分会分解血浆中有机成分，离子也会发生转移造成误差;4度冷藏虽能降低红细胞活性但细胞还会进行缓慢无氧酵解，血糖会明显减低，冷藏时需分离血清储存;对于酶免试验影响较小，但时间太长也会引起偏差如蛋白质变性，水分蒸发造成误差离心速度一般要求1500~3000转之间(25000转)，离心速度低会离心不*，速度过快容易溶血，一般离心5~15分钟即可(约10分钟)。

  ELISA试剂盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量"的方针。