古朵详述、酶联免疫吸附剂测定ELISA的相关问题

  1 如何洗板?

  文献说“手工洗板时每次加入洗涤液后，应静置15-30s，不要将一个酶标孔中的洗涤液溅入另一酶标孔中，防止交叉污染。甩去洗涤液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干。”

  想问的是：“甩去洗涤液”中如何“甩去”?如果整块板一起甩不会导致交叉污染吗?请内行详细指点一下。

  2 标本为动物脑匀浆，需要稀释吗?稀释多少倍合适呢?

  1.我经常这么干没有遇到交叉污染的问题，就是整块板翻转，洗涤液倒入下水道以后，维持孔朝下底朝天的样子往下甩动板，跟瓶子里的后一点水想倒出来的动作差不多.我一般觉得是往下甩，避免左右晃动比较好.不过你如果担心污染，不甩也没有关系，直接扣在吸水纸上吸干也是可以的，但是甩几下，省很多纸啊.重点是洗涤液倒干净之前不要把板翻回来正面.但是倒干净也不等于完全干掉，只要液体少到无法流淌就可以了，如果真干了的话，抗体抗原的结合可能失效.

  倒掉样本时候需要小心，之后的洗涤步骤其实不容易污染.

  2.动物脑匀浆我没有做过.提醒你跟试剂生产商确定好是否能够测这种样本.我曾经遇到过ELISA试剂对含人血清的样本发生非特异性反应的倒霉情况，问了生产商才知他们根本没有测试过人血清。

  如果生产商测试过动物脑匀浆的话，应该也能够告诉你恰当的稀释倍数。

  第二个办法是从文献中找先例，沿用别人优化过的试验方案。

  否则的话，你需要先做一个稀释试验，使用几个你确定为阳性的样本(不要次就用上你珍贵的实验样品)，稀释4X，10X，100X三个倍数应该够了(我做过的几个ELISA试剂对血清样本的建议倍数是4倍比较常见)，加上未稀释的你就有四个浓度梯度。关于稀释的注意事项你如果不清楚再问吧。

  既然如此，你就应该跟生产商要制作匀浆的实验方法啦，跟着他们的办法做为保险。如果是大公司，两个工作日之内一定会有回复，有时候网站上就能找到这种信息。

  酶联免疫吸附 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量"的方针。